The 10 reference contexts in paper Ali Mazloum, I. Zhukov Yu., A. Pershin S., A. Igolkin S., N. Vlasova N., Али Мазлум, И. Жуков Ю., А. Першин С., А. Иголкин С., Н. Власова Н. (2018) “ВЛИЯНИЕ РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА p30 НА РЕПРОДУКЦИЮ ВИРУСА АФРИКАНСКОЙ ЧУМЫ СВИНЕЙ IN VITRO // EFFECT OF p30 RECOMBINANT PROTEIN ON AFRICAN SWINE FEVER VIRUS IN VITRO REPRODUCTION” / spz:neicon:veterinary:y:2018:i:3:p:3-7

  1. Start
    5649
    Prefix
    В ходе исследований определили, что p54 отвечает за специфическое связывание вирусных ча­ стиц с макрофагом и проникновение их в клетку, а бе­ лок p30 играет ведущую роль в интернализации вируса. Введение этих белков в инфицированную вирусом АЧС культуру клеток в разной степени воздействует на ре­ продукцию вируса in vitro
    Exact
    [10]
    Suffix
    . E. R. Tulman и соавт. (2009) показали возможность ингибиции размножения вируса АЧС и задержки гем­ адсорбции при использовании сывороток к рекомби­ нантным белкам р54 и р30 [6]. Другой группой исследователей было продемон­ стрировано, что введение ДНК­вакцины, созданной на основе плазмидной ДНК pCMV­PQ, несущей гены р54 и р30, индуцирует выработку антител у мышей [8].
    (check this in PDF content)

  2. Start
    5832
    Prefix
    Введение этих белков в инфицированную вирусом АЧС культуру клеток в разной степени воздействует на ре­ продукцию вируса in vitro [10]. E. R. Tulman и соавт. (2009) показали возможность ингибиции размножения вируса АЧС и задержки гем­ адсорбции при использовании сывороток к рекомби­ нантным белкам р54 и р30
    Exact
    [6]
    Suffix
    . Другой группой исследователей было продемон­ стрировано, что введение ДНК­вакцины, созданной на основе плазмидной ДНК pCMV­PQ, несущей гены р54 и р30, индуцирует выработку антител у мышей [8].
    (check this in PDF content)

  3. Start
    6032
    Prefix
    Tulman и соавт. (2009) показали возможность ингибиции размножения вируса АЧС и задержки гем­ адсорбции при использовании сывороток к рекомби­ нантным белкам р54 и р30 [6]. Другой группой исследователей было продемон­ стрировано, что введение ДНК­вакцины, созданной на основе плазмидной ДНК pCMV­PQ, несущей гены р54 и р30, индуцирует выработку антител у мышей
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Как отмечалось ранее, использование белков p54 и p30 в рассмотренных экспериментах не случайно, так как они являются структурными протеинами, участву­ ющими в вирусном проникновении и интернализации, хотя их роль существенно различается. p30 – один из ранних вирусных белков, который кодируется геном CP204L, имеет молекулярную массу 30 кДа и является одним из наиболее иммуногенных с
    (check this in PDF content)

  4. Start
    6493
    Prefix
    экспериментах не случайно, так как они являются структурными протеинами, участву­ ющими в вирусном проникновении и интернализации, хотя их роль существенно различается. p30 – один из ранних вирусных белков, который кодируется геном CP204L, имеет молекулярную массу 30 кДа и является одним из наиболее иммуногенных структурных белков, ответственных за интернализа­ цию вируса АЧС
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Экспрессия этого белка, как пра­ вило, начинается через 2–4 ч после заражения и про­ должается в течение всего цикла репродукции. Таким образом, наличие синтеза p30 указывает на то, что ви­ рус проник в клетку, утратил свою оболочку и началась экспрессия раннего гена CP204L [7]. p54 – белок, кодируемый геном E183L, является антигенно вариабельным структурным белком, отвеча­ ющим за при
    (check this in PDF content)

  5. Start
    6770
    Prefix
    Экспрессия этого белка, как пра­ вило, начинается через 2–4 ч после заражения и про­ должается в течение всего цикла репродукции. Таким образом, наличие синтеза p30 указывает на то, что ви­ рус проник в клетку, утратил свою оболочку и началась экспрессия раннего гена CP204L
    Exact
    [7]
    Suffix
    . p54 – белок, кодируемый геном E183L, является антигенно вариабельным структурным белком, отвеча­ ющим за прикрепление и проникновение вируса АЧС, и имеет молекулярную массу от 25 до 28 кДа [5].
    (check this in PDF content)

  6. Start
    6969
    Prefix
    Таким образом, наличие синтеза p30 указывает на то, что ви­ рус проник в клетку, утратил свою оболочку и началась экспрессия раннего гена CP204L [7]. p54 – белок, кодируемый геном E183L, является антигенно вариабельным структурным белком, отвеча­ ющим за прикрепление и проникновение вируса АЧС, и имеет молекулярную массу от 25 до 28 кДа
    Exact
    [5]
    Suffix
    . Следует отметить, что вакцины на основе рекомби­ нантных белков, модифицированных вирусов и ДНК индуцируют клеточный и гуморальный иммунный от­ вет к вирусу АЧС, однако на сегодняшний день их при­ менение не дает 100% защиты от заражения.
    (check this in PDF content)

  7. Start
    10222
    Prefix
    Получение рекомбинантного белка р54, а также кло­ нирование ПЦР­продукта проводили в неэкспрессиру­ ющем и экспрессирующем векторах с использованием клеток Е. coli. Для быстрой оценки экспрессии рекомбинантно­ го белка использован анализ суммарного клеточного белка с помощью SDS­PAGE­электрофореза в 10% ПААГ по U. K. Laemmli (1970)
    Exact
    [9]
    Suffix
    . Очистку рекомбинантного белка осуществля­ ли с помощью металл­хелатной хроматографии на Ni­сефарозном сорбенте (Sigma, США). Определение концентрации общего белка проводи­ ли по методу Бредфорда и с использованием графика на основе определения коэффициента поглощения.
    (check this in PDF content)

  8. Start
    11308
    Prefix
    По резуль­ татам секвенирования, проведенного Н. Г. Зиняковым (ФГБУ «ВНИИЗЖ»), нуклеотидный состав полученного гена имел 100%­ю гомологию с аналогичной последо­ вательностью референтного штамма Georgia 2007/01 вируса АЧС
    Exact
    [3]
    Suffix
    . После проведения клонирования гена CP204L в pJET1.2/blunt определили его ориентацию методом рестрикционного анализа с использованием эндо­ нуклеаз XhoI и NcoI. Методом электрофоретического разделения в 1%­м агарозном геле установили размер гена и получили продукт для последующего реклони­ рования в экспрессирующий вектор pET32b(+) (рис. 1).
    (check this in PDF content)

  9. Start
    13179
    Prefix
    Далее добавляли питатель­ ную среду по 10 мл в каждый матрас и инфицировали культуру клеток изолятом Krasnodar 07/17 вируса АЧС в дозе 100 ГАдЕ на матрас (~ 0,01 ГАдЕ на клетку). В ка­ честве контроля воздействия на репродукцию вируса АЧС использовали полудан в дозе 100 нг на матрас
    Exact
    [1]
    Suffix
    , а в качестве отрицательного контроля добавляли 100 нг бычьего сывороточного альбумина. Каждый опыт про­ водили в четырех параллелях: два матраса с культурой клеток СС и два – с КМС. Все пробы инкубировали в течение 7 сут при 37 °С и регистрировали появление гемадсорбции с помо­ щью светового микроскопа.
    (check this in PDF content)

  10. Start
    15108
    Prefix
    Казаковой (2012) для изучения ре­ продукции вируса АЧС in vitro в аналогичных экспе­ риментах использовалась моноспецифическая сы­ воротка, полученная путем иммунизации кроликов рекомбинантным белком р30. Автором установлено, что антитела моноспецифической сыворотки крови кролика к Rec р30e штамма NVL­1 вируса АЧС в раз­ ведении 1:8 задерживали появление гемадсорбции до 5 сут
    Exact
    [2]
    Suffix
    . В результате проведенных исследований установ­ лено, что введение p30 оказало большее влияние на репродукцию вируса АЧС, вплоть до полной инги­ биции, чем внесение моноспецифической сыворотки к белку p30.
    (check this in PDF content)