The 12 reference contexts in paper M. Doronin I., A. Timina M., D. Lozovoy A., V. Starikov A., D. Mikhalishin V., N. Medvedeva N., A. Borisov V., М. Доронин И., А. Тимина М., Д. Лозовой А., В. Стариков А., Д. Михалишин В., Н. Медведева Н., А. Борисов В. (2018) “СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ 146S КОМПОНЕНТА ВИРУСА ЯЩУРА В СЫРЬЕ ДЛЯ ВАКЦИНЫ С ПРИМЕНЕНИЕМ МЕТОДА ОБРАТНОЙ ТРАНСКРИПЦИИ И ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ // METHOD FOR FMD VIRUS 146S COMPONENT CONCENTRATION DETERMINATION WITH REAL-TIME REVERSE TRANSCRIPTION – POLYMERASE CHAIN REACTION IN VACCINE RAW MATERIALS” / spz:neicon:veterinary:y:2018:i:2:p:26-30

  1. Start
    2538
    Prefix
    Ключевые слова: вирус ящура, концентрация 146S компонента, ОТ-ПЦР-РВ, пороговый цикл амплификации. ВВЕДЕНИЕ Ящур – высококонтагиозное везикулярное вирусное заболевание парнокопытных животных, которое относится к категории трансграничных инфекций
    Exact
    [3, 11]
    Suffix
    . Возбудителем является безоболочечный РНК-содержащий вирус, принадлежащий к порядку Picornavirales, роду Aphthovirus семейства Picornaviridae [11]. Вирус ящура характеризуется высокой антигенной изменчивостью за счет мутаций в генах капсидных белков и представлен 7 типами и множеством подтипов [11, 13].
    (check this in PDF content)

  2. Start
    2689
    Prefix
    ВВЕДЕНИЕ Ящур – высококонтагиозное везикулярное вирусное заболевание парнокопытных животных, которое относится к категории трансграничных инфекций [3, 11]. Возбудителем является безоболочечный РНК-содержащий вирус, принадлежащий к порядку Picornavirales, роду Aphthovirus семейства Picornaviridae
    Exact
    [11]
    Suffix
    . Вирус ящура характеризуется высокой антигенной изменчивостью за счет мутаций в генах капсидных белков и представлен 7 типами и множеством подтипов [11, 13]. Ящур наносит огромный экономический ущерб, который связан с затратами на ликвидацию болезни и введением строгих ограничений, налагаемых на внутреннюю и международную торговлю продукцией животноводства.
    (check this in PDF content)

  3. Start
    2843
    Prefix
    Возбудителем является безоболочечный РНК-содержащий вирус, принадлежащий к порядку Picornavirales, роду Aphthovirus семейства Picornaviridae [11]. Вирус ящура характеризуется высокой антигенной изменчивостью за счет мутаций в генах капсидных белков и представлен 7 типами и множеством подтипов
    Exact
    [11, 13]
    Suffix
    . Ящур наносит огромный экономический ущерб, который связан с затратами на ликвидацию болезни и введением строгих ограничений, налагаемых на внутреннюю и международную торговлю продукцией животноводства.
    (check this in PDF content)

  4. Start
    3235
    Prefix
    Ящур наносит огромный экономический ущерб, который связан с затратами на ликвидацию болезни и введением строгих ограничений, налагаемых на внутреннюю и международную торговлю продукцией животноводства. Система мер для борьбы с ящуром и его профилактики предусматривает массовую иммунизацию животных, а также контроль уровня напряженности поствакцинального иммунитета
    Exact
    [6, 13]
    Suffix
    . При репродукции в суспензионной перевиваемой клеточной линии из почки новорожденного сирийского хомяка (BHK-21/2-17) вирус ящура образует 4 варианта специфических компонентов: 146S компонент (полные частицы), состоящий из одной молекулы вирусной РНК и 60 копий полипептида, каждая из которых представляет собой комплекс белков VP1-VP2-VP3VP4; 75S частицы, лишенные РНК и включающие в себя 6
    (check this in PDF content)

  5. Start
    3786
    Prefix
    4 варианта специфических компонентов: 146S компонент (полные частицы), состоящий из одной молекулы вирусной РНК и 60 копий полипептида, каждая из которых представляет собой комплекс белков VP1-VP2-VP3VP4; 75S частицы, лишенные РНК и включающие в себя 60 копий полипептида VP1-VP3-VP0; 12S компонент, состоящий из белков VP1, VP2, VP3; 3,8S субъединицы, представленные неструктурным белком VPg
    Exact
    [8, 10]
    Suffix
    . При производстве противоящурных вакцин большое значение имеет концентрация в исходном сырье 146S частиц, обладающих высокой иммуногенностью и устойчивостью [3, 12]. Поэтому каждую партию сырья для производства противоящурных вакцин исследуют на определение концентрации 146S компонента, применяя количественный вариант реакции связывания комплемента (РСК).
    (check this in PDF content)

  6. Start
    3955
    Prefix
    собой комплекс белков VP1-VP2-VP3VP4; 75S частицы, лишенные РНК и включающие в себя 60 копий полипептида VP1-VP3-VP0; 12S компонент, состоящий из белков VP1, VP2, VP3; 3,8S субъединицы, представленные неструктурным белком VPg [8, 10]. При производстве противоящурных вакцин большое значение имеет концентрация в исходном сырье 146S частиц, обладающих высокой иммуногенностью и устойчивостью
    Exact
    [3, 12]
    Suffix
    . Поэтому каждую партию сырья для производства противоящурных вакцин исследуют на определение концентрации 146S компонента, применяя количественный вариант реакции связывания комплемента (РСК). Однако данный метод имеет ряд недостатков: трудоемкость и продолжительность проводимого анализа (не менее 2–3 сут), особенно при одновременном исследовании большого количества проб [1].
    (check this in PDF content)

  7. Start
    4354
    Prefix
    Поэтому каждую партию сырья для производства противоящурных вакцин исследуют на определение концентрации 146S компонента, применяя количественный вариант реакции связывания комплемента (РСК). Однако данный метод имеет ряд недостатков: трудоемкость и продолжительность проводимого анализа (не менее 2–3 сут), особенно при одновременном исследовании большого количества проб
    Exact
    [1]
    Suffix
    . В связи с этим целесообразно было предложить способ определения концентрации полных частиц вируса ящура в сырье для вакцины на основе обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ОТ-ПЦР-РВ), который отличается высокой чувствительностью и специфичностью, является более экспрессным методом, что позволит одновременно исследовать несколько
    (check this in PDF content)

  8. Start
    4843
    Prefix
    частиц вируса ящура в сырье для вакцины на основе обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ОТ-ПЦР-РВ), который отличается высокой чувствительностью и специфичностью, является более экспрессным методом, что позволит одновременно исследовать несколько десятков проб вируссодержащего сырья и сократить время проведения анализа до 4 ч
    Exact
    [7, 9]
    Suffix
    . Учитывая преимущества ОТ-ПЦР-РВ по сравнению с РСК, актуально установить отрицательную линейную корреляционТаблица 1 Соотношение результатов определения концентрации 146S компонента вируса ящура в РСК и величины порогового цикла амплификации в ОТ-ПЦР-РВ n = 3 Исследуемый образец Концентрация 146S компонента в РСК, мкг/см3 Пороговый цикл амплификации ОТ-ПЦР-РВ С1С2С3СсрCt1Ct2Ct3Ctср Контроль
    (check this in PDF content)

  9. Start
    7887
    Prefix
    Для определения концентрации 146S компонента (в мкг/см3) применяли количественный вариант РСК с использованием антигена вируса ящура и штаммспецифических сывороток крови морских свинок на указанные выше штаммы вируса ящура
    Exact
    [1]
    Suffix
    . Выделение РНК вируса ящура из сырья для вакцины проводили с использованием коммерческого набора «РИБО-сорб» (ФБУН «ЦНИИ эпидемиологии» Роспотреб надзора) в соответствии с инструкцией производителя.
    (check this in PDF content)

  10. Start
    8681
    Prefix
    Результаты реакции анализировали с помощью программного обеспечения Rotor-Gene 1.8.17.5, определяющего величину порогового цикла амплификации, которая обратно пропорциональна количеству копий вирусной РНК и концентрации 146S компонента
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Вакцины. В работе использовали 3 эмульсионные моновалентные вакцины «АРРИАХ-ВАК» против ящура типов А, О, Азия-1. Вакцина против ящура типа А, по результатам РСК, содержала 146S компонент в количестве 6,15 ± 0,11 мкг в дозе, против типа О – 6,03 ± 0,12 мкг в дозе, против типа Азия-1 – 6,43 ± 0,12 мкг в дозе; по данным ОТ-ПЦР-РВ, против типа А – 6,20 мкг в дозе, против тип
    (check this in PDF content)

  11. Start
    10345
    Prefix
    Патологоанатомический осмотр животных проводили через 7 сут после заражения. Определение титра антител в сыворотках крови животных после иммунизации осуществляли с помощью реакции нейтрализации в соответствии с утвержденными методическими указаниями
    Exact
    [2]
    Suffix
    . Статистическая обработка данных. Полученные результаты обрабатывали, определяя средние арифметические значения, степень достоверности статистической разницы между средними величинами, определенными по разностному методу Стьюдента-Фишера, а также коэффициент детерминации [5].
    (check this in PDF content)

  12. Start
    10632
    Prefix
    Полученные результаты обрабатывали, определяя средние арифметические значения, степень достоверности статистической разницы между средними величинами, определенными по разностному методу Стьюдента-Фишера, а также коэффициент детерминации
    Exact
    [5]
    Suffix
    . Построение диаграмм проводили с использованием пакета прикладных программ Microsoft Excel 2010. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ На первом этапе работы для выявления связи между значениями концентрации 146S частиц в РСК и пороговых циклов амплификации в ОТ-ПЦР-РВ подготавливали калибровочную панель контрольных положительных образцов с содержанием РНК вируса ящура, эквивале
    (check this in PDF content)