The 10 reference contexts in paper A. Yakovleva S., A. Kanshina V., A. Scherbakov V., Ye. Orlova S., А. Яковлева С., А. Каньшина В., А. Щербаков В., Е. Орлова С. (2018) “РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ ТЕСТ-СИСТЕМЫ ЗАВ-ИФА ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ АНТИТЕЛ К НЕСТРУКТУРНЫМ БЕЛКАМ ВИРУСА ЯЩУРА В СЫВОРОТКАХ КРОВИ КРУПНОГО И МЕЛКОГО РОГАТОГО СКОТА // DEVELOPMENT AND VALIDATION OF 3AB-ELISATEST-SYSTEM FOR DETECTION OF ANTIBODIES TO FMD VIRUS NONSTRUCTURAL PROTEINS IN BLOOD SERA FROM CATTLE AND SMALL RUMINANTS” / spz:neicon:veterinary:y:2015:i:4:p:36-42

  1. Start
    3645
    Prefix
    В России ящур не эндемичен, однако существует постоянная угроза заноса этой болезни из соседних азиатских стран, прежде всего из Китая. Вспышки ящура, вызванные заносом инфекции извне, регистрировались в современной России в 1995, 2000, 2004–2006 и 2010–2014 гг.
    Exact
    [12, 13]
    Suffix
    . В Российской Федерации применяется стратегия профилактики и борьбы с ящуром, которая предполагает недопущение возникновения и распространения болезни на территории страны. В регионах с высокой степенью риска заноса и распространения ящура создана буферная зона, в которой крупный и мелкий рогатый скот вакцинируется против ящура.
    (check this in PDF content)

  2. Start
    4659
    Prefix
    Антитела к неструктурным белкам вируса ящура выявляются у инфицированных животных и не обнаруживаются у вакцинированных при условии применения очищенных вакцин, соответствующих требованиям Всемирной организации здравоохранения животных (МЭБ)
    Exact
    [3, 8]
    Suffix
    . Ранее нами были получены рекомбинантные неструктурные белки 3А, 3В и 3АВ вируса ящура [1] и на их основе разработаны две иммуноферментные тестсистемы для обнаружения антител к неструктурным белкам вируса ящура.
    (check this in PDF content)

  3. Start
    4758
    Prefix
    Антитела к неструктурным белкам вируса ящура выявляются у инфицированных животных и не обнаруживаются у вакцинированных при условии применения очищенных вакцин, соответствующих требованиям Всемирной организации здравоохранения животных (МЭБ) [3, 8]. Ранее нами были получены рекомбинантные неструктурные белки 3А, 3В и 3АВ вируса ящура
    Exact
    [1]
    Suffix
    и на их основе разработаны две иммуноферментные тестсистемы для обнаружения антител к неструктурным белкам вируса ящура. Первая тест-система, разработанная в 2004 г., позволяла исследовать сыворотки крови только крупного рогатого скота (КРС) [2].
    (check this in PDF content)

  4. Start
    5019
    Prefix
    Ранее нами были получены рекомбинантные неструктурные белки 3А, 3В и 3АВ вируса ящура [1] и на их основе разработаны две иммуноферментные тестсистемы для обнаружения антител к неструктурным белкам вируса ящура. Первая тест-система, разработанная в 2004 г., позволяла исследовать сыворотки крови только крупного рогатого скота (КРС)
    Exact
    [2]
    Suffix
    . В данной работе представлены результаты валидации второй тест-системы — 3АВ-ИФА, предназначенной для обнаружения антител к неструктурным белкам вируса ящура в сыворотках крови как крупного (КРС), так и мелкого рогатого скота (МРС).
    (check this in PDF content)

  5. Start
    5422
    Prefix
    В данной работе представлены результаты валидации второй тест-системы — 3АВ-ИФА, предназначенной для обнаружения антител к неструктурным белкам вируса ящура в сыворотках крови как крупного (КРС), так и мелкого рогатого скота (МРС). МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Антиген. В качестве антигена использовали рекомбинантный белок 3АВ, полученный экспрессией в E. coli. Условия экспрессии и очистки описаны ранее
    Exact
    [1]
    Suffix
    . Сыворотки крови животных. В качестве положительного контроля использовали референтную сыворотку крови КРС, экспериментально зараженного вирусом ящура типа А. В качестве отрицательного контроля использовали сыворотку крови КРС, не имеющего антител к вирусу ящура.
    (check this in PDF content)

  6. Start
    7235
    Prefix
    ИФА с коммерческим набором PrioCHECK FMDV NS FMDV antibody test kit, ELISA (Prionics, Швейцария) проводили в соответствии с инструкцией к набору. Статистическую обработку результатов ИФА проводили согласно рекомендациям МЭБ
    Exact
    [9, 10]
    Suffix
    . РЕЗУЛЬТАТЫ Валидацию 3АВ-ИФА проводили в соответствии с рекомендациями МЭБ [9, 10]. Процесс включал несколько этапов. Оптимизация реагентов и протокола реакции. В ходе выполнения этого этапа были установлены рабочие разведения антигена и антивидового конъюгата, оптимальный состав блокирующего раствора, температурно-временной режим для каждого этапа ИФА, допустимые значения опт
    (check this in PDF content)

  7. Start
    7325
    Prefix
    ИФА с коммерческим набором PrioCHECK FMDV NS FMDV antibody test kit, ELISA (Prionics, Швейцария) проводили в соответствии с инструкцией к набору. Статистическую обработку результатов ИФА проводили согласно рекомендациям МЭБ [9, 10]. РЕЗУЛЬТАТЫ Валидацию 3АВ-ИФА проводили в соответствии с рекомендациями МЭБ
    Exact
    [9, 10]
    Suffix
    . Процесс включал несколько этапов. Оптимизация реагентов и протокола реакции. В ходе выполнения этого этапа были установлены рабочие разведения антигена и антивидового конъюгата, оптимальный состав блокирующего раствора, температурно-временной режим для каждого этапа ИФА, допустимые значения оптической плотности контрольных сывороток.
    (check this in PDF content)

  8. Start
    17350
    Prefix
    крови Минимальное значение ПП, % (хmin) Максимальное значение ПП, % (хmax) Среднее значение ПП, % ( х ) Среднее квадратичное отклонение, (δ) Коэффициент вариации, % (С) Положительная сыворотка95,60106,27101,213,4643,4 Слабоположительная сыворотка49,3461,9553,324,0947,7 Рис. 2. Точечная диаграмма результатов в 3АВ-ИФА для здоровых (код-0) и инфицированных (код-1) животных ями МЭБ
    Exact
    [12]
    Suffix
    животные были вакцинированы трижды с интервалом в 1 месяц. Кровь отбиралась до вакцинации и через 21–28 сут. после каждой вакцинации. Все 32 исследованных образца показали в 3АВ-ИФА отсутствие антител к неструктурным белкам вируса ящура (табл. 5).
    (check this in PDF content)

  9. Start
    21256
    Prefix
    Проведенные исследования показали, что в оптимизированном варианте 3АВ-ИФА обеспечивает высокий уровень сходимости и воспроизводимости результатов: коэффициент вариации составлял менее 10%. Диагностическая специфичность 3АВ-ИФА на панели из 1280 сывороток крови составляла 99,8%, что сравнимо с зарубежными тест-системами для выявления антител к неструктурным белкам вируса ящура
    Exact
    [5–7, 11]
    Suffix
    . Диагностическая чувствительность 3АВ-ИФА на панели из 322 сывороток крови от КРС и МРС, экспериТаблица 4 Результаты исследований в 3АВ-ИФА сывороток крови КРС, экспериментально зараженного вирусом ящура Дни после инфицирования Результаты 3АВ-ИФА (положит./исследован.) тип Атип Отип Азия-1Всего 00/160/100/50/31 811/165/95/521/30 916/168/105/529/31 1016/1610/105/531/31 1116/1610/105/531/31 1216/
    (check this in PDF content)

  10. Start
    22445
    Prefix
    Строго говоря, такие сыворотки крови могут считаться заведомо положительными весьма условно и обычно при определении чувствительности ИФА не применяются. Так, A. Dekker с соавт. (2008) и C. He с соавт. (2010) при валидации NSP-ИФА использовали как заведомо положительные сыворотки крови, отобранные на 21 ДПИ
    Exact
    [4, 11]
    Suffix
    . Если сыворотки крови, отобранные на 8–9 ДПИ, исключить из панели заведомо положительных проб, чувствительность 3АВИФА будет составлять 100%. ROC-анализ, проведенный с использованием программы MedCalc, подтвердил правильность выбранного значения ПНП реакции и высокую прогностическую способность 3АВ-ИФА.
    (check this in PDF content)