The 12 reference contexts in paper M. Yakupov R., A. Yakovleva S., A. Scherbakov V., М. Якупов Р., А. Яковлева С., А. Щербаков В. (2018) “Использование рекомбинантных белков рЗО, pK205R и pB602L в серодиагностике африканской чумы свиней // Use of p30,pK205R and pB602L recombinant proteins for African swine fever serodiagnosis” / spz:neicon:veterinary:y:2015:i:3:p:37-47

  1. Start
    4554
    Prefix
    Возбудитель АЧС — крупный оболочечный вирус семейства Asfarviridae, рода Asfivirus. Геном вируса АЧС, представленный двухцепочечной ДНК длиной 170–192 тысячи пар нуклеотидов, кодирует до 150 белков, из них не менее 28 являются структурными
    Exact
    [11]
    Suffix
    . В связи с тем, что эффективные и безопасные вакцины против АЧС не разработаны, борьба с болезнью ведется путем ее диагностики и ликвидации очагов заболевания. Лабораторная диагностика АЧС основана на выявлении возбудителя болезни или антител к нему в крови и органах инфицированных животных.
    (check this in PDF content)

  2. Start
    5229
    Prefix
    Серологические методы предпочтительны для диагностики подострых и хронических форм болезни, обнаружение антител к вирусу АЧС является основным способом выявления животных, инфицированных низковирулентными штаммами
    Exact
    [3]
    Suffix
    . В качестве основного метода серологической диагностики АЧС Всемирная организация здравоохранения животных (МЭБ) рекомендует иммуноферментный анализ (ИФА), где в качестве антигена используются частично очищенные препараты белков вируса АЧС, выращенного в культуре клеток MS (далее МЭБ-ИФА) [6].
    (check this in PDF content)

  3. Start
    5532
    Prefix
    В качестве основного метода серологической диагностики АЧС Всемирная организация здравоохранения животных (МЭБ) рекомендует иммуноферментный анализ (ИФА), где в качестве антигена используются частично очищенные препараты белков вируса АЧС, выращенного в культуре клеток MS (далее МЭБ-ИФА)
    Exact
    [6]
    Suffix
    . Получение такого антигена трудно стандартизировать, и оно связано с биологическими рисками. Кроме того, при высокой чувствительности МЭБ-ИФА его специфичность относительно невысока [4]. В связи с этим активно ведутся исследования по получению и использованию в серодиагностике АЧС рекомбинантных антигенов, которые биологически безопасны, РЕЗЮМЕ Экспрессией в E. coli полу
    (check this in PDF content)

  4. Start
    5723
    Prefix
    животных (МЭБ) рекомендует иммуноферментный анализ (ИФА), где в качестве антигена используются частично очищенные препараты белков вируса АЧС, выращенного в культуре клеток MS (далее МЭБ-ИФА) [6]. Получение такого антигена трудно стандартизировать, и оно связано с биологическими рисками. Кроме того, при высокой чувствительности МЭБ-ИФА его специфичность относительно невысока
    Exact
    [4]
    Suffix
    . В связи с этим активно ведутся исследования по получению и использованию в серодиагностике АЧС рекомбинантных антигенов, которые биологически безопасны, РЕЗЮМЕ Экспрессией в E. coli получены рекомбинантные белки р30, pK205R и рB602L вируса африканской чумы свиней.
    (check this in PDF content)

  5. Start
    7857
    Prefix
    Владимир, e-mail: ascherbakov@arriah.ru более технологичны в приготовлении и обеспечивают более высокую специфичность ИФА. К настоящему времени описано применение в серодиагностике АЧС нескольких рекомбинантных белков: р54
    Exact
    [7, 8]
    Suffix
    , р30 [9, 12], pp62 [5], р10, р72, рA104R, pC44L, pCP312R [13], рK205R и рB602L [10]. Цель данной работы состояла в том, чтобы экспрессией в E. coli получить рекомбинантные белки р30, pK205R и pB602L, разработать на их основе непрямой вариант ИФА и сравнить р30-, рK205R- и рB602L-ИФА между собой и с коммерческими тест-системами для серодиагностики АЧС.
    (check this in PDF content)

  6. Start
    7869
    Prefix
    Владимир, e-mail: ascherbakov@arriah.ru более технологичны в приготовлении и обеспечивают более высокую специфичность ИФА. К настоящему времени описано применение в серодиагностике АЧС нескольких рекомбинантных белков: р54 [7, 8], р30
    Exact
    [9, 12]
    Suffix
    , pp62 [5], р10, р72, рA104R, pC44L, pCP312R [13], рK205R и рB602L [10]. Цель данной работы состояла в том, чтобы экспрессией в E. coli получить рекомбинантные белки р30, pK205R и pB602L, разработать на их основе непрямой вариант ИФА и сравнить р30-, рK205R- и рB602L-ИФА между собой и с коммерческими тест-системами для серодиагностики АЧС.
    (check this in PDF content)

  7. Start
    7883
    Prefix
    Владимир, e-mail: ascherbakov@arriah.ru более технологичны в приготовлении и обеспечивают более высокую специфичность ИФА. К настоящему времени описано применение в серодиагностике АЧС нескольких рекомбинантных белков: р54 [7, 8], р30 [9, 12], pp62
    Exact
    [5]
    Suffix
    , р10, р72, рA104R, pC44L, pCP312R [13], рK205R и рB602L [10]. Цель данной работы состояла в том, чтобы экспрессией в E. coli получить рекомбинантные белки р30, pK205R и pB602L, разработать на их основе непрямой вариант ИФА и сравнить р30-, рK205R- и рB602L-ИФА между собой и с коммерческими тест-системами для серодиагностики АЧС.
    (check this in PDF content)

  8. Start
    7921
    Prefix
    Владимир, e-mail: ascherbakov@arriah.ru более технологичны в приготовлении и обеспечивают более высокую специфичность ИФА. К настоящему времени описано применение в серодиагностике АЧС нескольких рекомбинантных белков: р54 [7, 8], р30 [9, 12], pp62 [5], р10, р72, рA104R, pC44L, pCP312R
    Exact
    [13]
    Suffix
    , рK205R и рB602L [10]. Цель данной работы состояла в том, чтобы экспрессией в E. coli получить рекомбинантные белки р30, pK205R и pB602L, разработать на их основе непрямой вариант ИФА и сравнить р30-, рK205R- и рB602L-ИФА между собой и с коммерческими тест-системами для серодиагностики АЧС.
    (check this in PDF content)

  9. Start
    7943
    Prefix
    Владимир, e-mail: ascherbakov@arriah.ru более технологичны в приготовлении и обеспечивают более высокую специфичность ИФА. К настоящему времени описано применение в серодиагностике АЧС нескольких рекомбинантных белков: р54 [7, 8], р30 [9, 12], pp62 [5], р10, р72, рA104R, pC44L, pCP312R [13], рK205R и рB602L
    Exact
    [10]
    Suffix
    . Цель данной работы состояла в том, чтобы экспрессией в E. coli получить рекомбинантные белки р30, pK205R и pB602L, разработать на их основе непрямой вариант ИФА и сравнить р30-, рK205R- и рB602L-ИФА между собой и с коммерческими тест-системами для серодиагностики АЧС.
    (check this in PDF content)

  10. Start
    9139
    Prefix
    Продукты реакции анализировали с помощью электрофореза в 2,0% агарозном геле, содержащем 0,001% бромистого этидия, при силе тока 50 мА. Молекулярное клонирование ампликонов осуществляли по общепринятым методикам
    Exact
    [1]
    Suffix
    . Экспрессия и очистка рекомбинантных белков. Культивирование Е. coli проводили в орбитальном шейкере при 150 об/мин и 37 °С. Для индукции экспрессии в культуру клеток, достигшую логарифмической фазы роста, добавляли IPTG (Promega, США).
    (check this in PDF content)

  11. Start
    11515
    Prefix
    Диагностическую чувствительность и специфичность ИФА вычисляли по формулам, рекомендованным МЭБ: Дчув = (ИП / ИП + ЛО) × 100%; Дспец = (ИО / ИО + ЛП) × 100%, где ИП — истинно положительный результат; ЛО — ложноотрицательный результат; ИО — истинно отрицательный результат; ЛП —– ложноположительный результат
    Exact
    [3]
    Suffix
    . РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Получение рекомбинантных белков. Гены CP204L, K205R и B602L амплифицировали методом ПЦР, используя ДНК российского изолята вируса АЧС. В реакции применяли праймеры, содержащие сайты рестрикции Bam HI и Hind III.
    (check this in PDF content)

  12. Start
    22182
    Prefix
    В 2013 г. р30-ИФА и pK205RИФА были применены в международных сравнительных испытаниях по диагностике АЧС, организованных референтной лабораторией по АЧС Европейского союза (URL-CISA-INIA, Мадрид, Испания). В ходе испытаний был правильно определен инфекционный статус всех закодированных сывороток
    Exact
    [2]
    Suffix
    . Результаты испытаний подтверждают, что разработанные тест-системы р30-ИФА и pK205R-ИФА являются чувствительными, специфичными и позволяют достоверно определять антитела к вирусу АЧС в сыворотках крови свиней.
    (check this in PDF content)