The 65 reference contexts in paper D. Bolshakov S., T. Nikeshina B., Д. Большаков С., Т. Никешина Б. (2018) “Спектрофотометрические и энзиматические методы биохимического анализа сыворотки крови сельскохозяйственных животных // Spectrophotometric and enzymatic methods for biochemical analysis of blood sera from farm animals” / spz:neicon:veterinary:y:2015:i:3:p:12-21

  1. Start
    4250
    Prefix
    Простые белки состоят только из аминокислот, в сложные входят и другие вещества: в липопротеиды — липиды, в гликопротеиды — углеводы, в нуклеопротеиды — нуклеиновые основания. Колориметрическая реакция между молекулами белка и ионами меди, так называемая биуретовая реакция, известна с 1848 г.
    Exact
    [6]
    Suffix
    . В 1914 г. была опубликована работа Regler и соавт., и с этого времени основное внимание было уделено стабилизации ионов меди в щелочном реагенте. В 1939 г. Kingsley и соавт. модифицировали процедуру, а в 1942 г. предложили использовать в качестве комплексона тартрат натрия или калия.
    (check this in PDF content)

  2. Start
    4783
    Prefix
    Впоследствии эта процедура была модифицирована Weichselbaum и соавт., Gornall и соавт. Принцип метода заключается в том, что белок сыворотки в щелочной среде при взаимодействии с ионами меди образует фиолетовый комплекс
    Exact
    [3, 5–8]
    Suffix
    (таблица). Абсорбция образовавшегося комплекса прямо пропорциональна концентрации белка в исследуемом образце. Альбумин — простой белок, синтезирующийся в печени; в плазме крови поддерживает коллоидно-осмотическое давление, играет важную роль в транспорте многих веществ экзогенного и эндогенного происхождения.
    (check this in PDF content)

  3. Start
    5299
    Prefix
    Альбумин — простой белок, синтезирующийся в печени; в плазме крови поддерживает коллоидно-осмотическое давление, играет важную роль в транспорте многих веществ экзогенного и эндогенного происхождения. Для определения сывороточного альбумина методы фракционного высаливания были слишком трудоемки и заменены методами с применением азокрасителей. Использование реакции с бромкрезоловым зеленым
    Exact
    [6–8, 10]
    Suffix
    стало предпочтительным методом из-за высокой специфичности к альбумину и незначительному влиянию на данную реакцию гемолиза, билирубина и салицилатов. Суть метода заключается в избирательном взаимодействии альбумина с бромкрезоловым зеленым при рН 4,2 (таблица).
    (check this in PDF content)

  4. Start
    5871
    Prefix
    Увеличение поглощения образующегося комплекса альбумин—краситель при 630 нм прямо пропорционально концентрации альбумина. Менее специфичными являются методы определения альбумина с бромкрезоловым красным, метиловым оранжевым и натриевой солью 2-(4-оксиазобензол)бензойной кислоты
    Exact
    [6]
    Suffix
    . ПОКАЗАТЕЛИ АЗОТИСТОГО ОБМЕНА Мочевина — осмотически активное вещество, играющее важную роль в механизмах концентрирования мочи. Синтез мочевины происходит в печени главным образом из аммиака, который образуется при дезаминировании аминокислот, распаде пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов.
    (check this in PDF content)

  5. Start
    6292
    Prefix
    Синтез мочевины происходит в печени главным образом из аммиака, который образуется при дезаминировании аминокислот, распаде пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов. Мочевину определяют прямым методом, в котором при взаимодействии с диацетилом (или диацетилмонооксимом) образуется хромоген
    Exact
    [3, 5–7, 9]
    Suffix
    , и непрямым методом, в котором измеряют концентрацию аммиака как продукта воздействия уреазы на мочевину. Выделенный аммиак можно измерить фотометрически с использованием реактива Несслера и по реакции Berthelot с гипохлоритом и фенолом [3].
    (check this in PDF content)

  6. Start
    6556
    Prefix
    Мочевину определяют прямым методом, в котором при взаимодействии с диацетилом (или диацетилмонооксимом) образуется хромоген [3, 5–7, 9], и непрямым методом, в котором измеряют концентрацию аммиака как продукта воздействия уреазы на мочевину. Выделенный аммиак можно измерить фотометрически с использованием реактива Несслера и по реакции Berthelot с гипохлоритом и фенолом
    Exact
    [3]
    Suffix
    . В 1965 г. Talke и Shubert ввели общую энзиматическую процедуру с использованием уреазы и глутаматдегидрогеназы [8]: мочевина гидролизуется уреазой, при этом образуется аммиак и углекислый газ.
    (check this in PDF content)

  7. Start
    6675
    Prefix
    Выделенный аммиак можно измерить фотометрически с использованием реактива Несслера и по реакции Berthelot с гипохлоритом и фенолом [3]. В 1965 г. Talke и Shubert ввели общую энзиматическую процедуру с использованием уреазы и глутаматдегидрогеназы
    Exact
    [8]
    Suffix
    : мочевина гидролизуется уреазой, при этом образуется аммиак и углекислый газ. Выделенный аммиак в присутствии NADH1 взаимодействует с α-кетоглутаратом с образованием глутамата. В результате реакции NADH подвергается окислению, что сопровождается уменьшением абсорбции (оптический тест Варбурга [6]), интенсивность которой прямо пропорциональна концентрации мочевины в исслед
    (check this in PDF content)

  8. Start
    6992
    Prefix
    Выделенный аммиак в присутствии NADH1 взаимодействует с α-кетоглутаратом с образованием глутамата. В результате реакции NADH подвергается окислению, что сопровождается уменьшением абсорбции (оптический тест Варбурга
    Exact
    [6]
    Suffix
    ), интенсивность которой прямо пропорциональна концентрации мочевины в исследуемом образце (табл.). Мочевая кислота является конечным продуктом распада пуриновых оснований. Образовавшаяся мочевая кислота выделяется почками.
    (check this in PDF content)

  9. Start
    7313
    Prefix
    Мочевая кислота является конечным продуктом распада пуриновых оснований. Образовавшаяся мочевая кислота выделяется почками. Для определения мочевой кислоты в сыворотке крови используются спектрофотометрические
    Exact
    [3, 6–8, 10]
    Suffix
    , энзиматические [8] и другие методы. Наиболее специфические и точные — ферментативные (уреазные) методы. В основе определения лежит реакция окисления мочевой кислоты уриказой до аллантоина и перекиси водорода [8].
    (check this in PDF content)

  10. Start
    7344
    Prefix
    Мочевая кислота является конечным продуктом распада пуриновых оснований. Образовавшаяся мочевая кислота выделяется почками. Для определения мочевой кислоты в сыворотке крови используются спектрофотометрические [3, 6–8, 10], энзиматические
    Exact
    [8]
    Suffix
    и другие методы. Наиболее специфические и точные — ферментативные (уреазные) методы. В основе определения лежит реакция окисления мочевой кислоты уриказой до аллантоина и перекиси водорода [8].
    (check this in PDF content)

  11. Start
    7550
    Prefix
    Для определения мочевой кислоты в сыворотке крови используются спектрофотометрические [3, 6–8, 10], энзиматические [8] и другие методы. Наиболее специфические и точные — ферментативные (уреазные) методы. В основе определения лежит реакция окисления мочевой кислоты уриказой до аллантоина и перекиси водорода
    Exact
    [8]
    Suffix
    . В присутствии пероксидазы перекись водорода инициирует присоединение 4-аминоантипирина к дихлор-2-гидроксибензолсульфонату натрия (ДХГБС) с образованием хромогена, абсорбция которого измеряется при 520 нм (таблица).
    (check this in PDF content)

  12. Start
    8548
    Prefix
    Он основан на способности мочевой кислоты восстанавливать фосфорно-вольфрамовую кислоту 1 NAD (НАД) — никотинамидадениндинуклеотид (существует в двух формах: окисленной (NAD+) и восстановленной (NADH)). с образованием окрашенного соединения. Впоследствии метод подвергался многочисленным модификациям и до настоящего времени остается одним из наиболее распространенных
    Exact
    [3, 6, 7, 9]
    Suffix
    . Креатинин — конечный продукт креатин-фосфатной реакции: креатин при фосфорилировании превращается в креатинфосфат, из которого образуется креатинин (ангидрид креатина). Креатинин участвует в энергетическом обмене мышечной и других тканей.
    (check this in PDF content)

  13. Start
    15125
    Prefix
    Концентрация хлоридов в сыворотке стабильна в течение одного дня при комнатной температуре (18–25 °С) и три месяца в холодильнике при –20 °С Таблица Принципы спектрофотометрического и энзиматического определения основных биохимических показателей сыворотки (плазмы) крови сельскохозяйственных животных (Продолжение) кратом натрия в щелочной среде (цветная реакция Яффе, метод Поппера)
    Exact
    [6, 8]
    Suffix
    с образованием окрашенного комплекса, поглощающего излучение при 510 нм (таблица). Скорость образования окраски пропорциональна концентрации креатинина в образце. ПОКАЗАТЕЛИ ПИГМЕНТНОГО ОБМЕНА Билирубин — желто-красный пигмент; представляет собой линейный тетрапиррол.
    (check this in PDF content)

  14. Start
    18654
    Prefix
    Большинство химических методов определения общего содержания билирубина основаны на реакции между диазотированной сульфаниловой кислотой и билирубином, в результате которой образуется азобилирубин (реакция ван ден Берга
    Exact
    [3]
    Suffix
    ), имеющий максимум поглощения УФ-излучения при 560 нм (таблица). Связанный (прямой) билирубин реагирует быстро, несвязанный (непрямой) — после добавления акселераторных веществ, обладающих свойством ускорять реакцию между свободным билирубином и диазореактивом в водной среде путем повышения растворимости или каталитическим способом.
    (check this in PDF content)

  15. Start
    19116
    Prefix
    Связанный (прямой) билирубин реагирует быстро, несвязанный (непрямой) — после добавления акселераторных веществ, обладающих свойством ускорять реакцию между свободным билирубином и диазореактивом в водной среде путем повышения растворимости или каталитическим способом. В качестве акселераторов используются кофеин и бензоат натрия (метод Йендрашика–Клеггорна–Грофа)
    Exact
    [1, 7]
    Suffix
    , кофеин и мочевина, метиловый спирт, ацетамид и диметилсульфоксид (ДМСО). ПОКАЗАТЕЛИ УГЛЕВОДНОГО ОБМЕНА Глюкоза — основной углевод, присутствующий в периферической крови. Окисление глюкозы — главный путь получения клетками энергии в организме.
    (check this in PDF content)

  16. Start
    20020
    Prefix
    Данный метод оказывает меньшее влияние на результаты анализа и не имеет недостатков ранее предложенных методов: β-D-глюкоза окисляется глюкозооксидазой с образованием D-глюконовой кислоты и пероксида водорода
    Exact
    [1]
    Suffix
    . В присутствии пероксидазы пероксид водорода, n-гидроксибензолсульфоновая кислота (n-ГБС), 4-аминоантипирин и фенол образуют хинониминовый красный краситель [8] (табл.). Концентрация образовавшегося в результате реакции окрашенного продукта пропорциональна концентрации глюкозы.
    (check this in PDF content)

  17. Start
    20188
    Prefix
    Данный метод оказывает меньшее влияние на результаты анализа и не имеет недостатков ранее предложенных методов: β-D-глюкоза окисляется глюкозооксидазой с образованием D-глюконовой кислоты и пероксида водорода [1]. В присутствии пероксидазы пероксид водорода, n-гидроксибензолсульфоновая кислота (n-ГБС), 4-аминоантипирин и фенол образуют хинониминовый красный краситель
    Exact
    [8]
    Suffix
    (табл.). Концентрация образовавшегося в результате реакции окрашенного продукта пропорциональна концентрации глюкозы. К числу спектрофотометрических методов, получивших широкое распространение, можно отнести метод определения глюкозы по цветной реакции с о-толуидином (метод Гультмана) [1, 6, 7], состоящий в определении интенсивности окрашенного раствора при взаимодействии о-тол
    (check this in PDF content)

  18. Start
    20495
    Prefix
    Концентрация образовавшегося в результате реакции окрашенного продукта пропорциональна концентрации глюкозы. К числу спектрофотометрических методов, получивших широкое распространение, можно отнести метод определения глюкозы по цветной реакции с о-толуидином (метод Гультмана)
    Exact
    [1, 6, 7]
    Suffix
    , состоящий в определении интенсивности окрашенного раствора при взаимодействии о-толуидина с глюкозой при нагревании в растворе уксусной кислоты. Молочная кислота (лактат) — продукт метаболизма, образующийся в результате молочной ферментации глюкозы и гликогена, который накапливается при физических упражнениях с высокой нагрузкой как результат повышения гликолитической активности.
    (check this in PDF content)

  19. Start
    21385
    Prefix
    Принцип определения основан на способности молочной кислоты в присутствии серной, фосфорной кислот и солей меди образовывать уксусный альдегид, который, реагируя с параоксидифенилом (С6Н5С6Н4ОН), и дает фиолетово окрашенные продукты
    Exact
    [6, 7]
    Suffix
    . Фотометрирование проводят при длине волны 565 нм. Реакция очень чувствительна, поэтому надо строго выдерживать все условия выполнения исследования. В настоящее время все чаще применяют ферментные методы определения молочной кислоты, основанные на измерении скорости окисления лактата лактатоксидазой (реже лактатдегидрогеназой) до пирувата и перекиси водорода.
    (check this in PDF content)

  20. Start
    22000
    Prefix
    Затем в присутствии 4-аминоантипирина и натриевой соли этил-N-(2-гидрокси-3-сульфопропил)м-толуидина (TOOS) пероксидаза катализирует реакцию перекиси водорода с образованием окрашенного комплекса, абсорбция которого измеряется при 550 нм
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Абсорбция прямо пропорциональна концентрации лактата в исследуемом образце (таблица). ПОКАЗАТЕЛИ ОБМЕНА ЛИПИДОВ Триглицериды (триацилглицерины) — это нейтральные жиры, обеспечивающие клетки энергией.
    (check this in PDF content)

  21. Start
    22527
    Prefix
    Стандартные методы определения концентрации триглицеридов основаны на использовании как ферментного, так и щелочного гидролиза с высвобождением глицерина. Современные методы основаны на использовании энзиматического гидролиза
    Exact
    [8]
    Suffix
    и количественного определения содержания триглицеридов, так как они имеют высокую специфичность, и фосфолипиды не влияют на его результаты: триглицериды гидролизуются липазой, концентрация высвобождающегося глицерина определяется энзиматической реакцией, в результате которой образуется хинониминовый краситель (таблица).
    (check this in PDF content)

  22. Start
    23106
    Prefix
    При использовании химических методов глицерин, освобожденный омылением триглицеридов, окисляют до формальдегида, концентрация последнего определяется спектрофотометрически с применением реакции Hantzch (метод Сардесая–Маннинга)
    Exact
    [7]
    Suffix
    , по цветной реакции с хромотроповой кислотой [3] или ацетилацетоном [10]. Холестерин представляет собой вторичный одноатомный ароматический спирт, в молекуле которого имеется общее для всех стеринов полициклическое ядро циклопентанпергидрофенантрена.
    (check this in PDF content)

  23. Start
    23156
    Prefix
    При использовании химических методов глицерин, освобожденный омылением триглицеридов, окисляют до формальдегида, концентрация последнего определяется спектрофотометрически с применением реакции Hantzch (метод Сардесая–Маннинга) [7], по цветной реакции с хромотроповой кислотой
    Exact
    [3]
    Suffix
    или ацетилацетоном [10]. Холестерин представляет собой вторичный одноатомный ароматический спирт, в молекуле которого имеется общее для всех стеринов полициклическое ядро циклопентанпергидрофенантрена.
    (check this in PDF content)

  24. Start
    23179
    Prefix
    При использовании химических методов глицерин, освобожденный омылением триглицеридов, окисляют до формальдегида, концентрация последнего определяется спектрофотометрически с применением реакции Hantzch (метод Сардесая–Маннинга) [7], по цветной реакции с хромотроповой кислотой [3] или ацетилацетоном
    Exact
    [10]
    Suffix
    . Холестерин представляет собой вторичный одноатомный ароматический спирт, в молекуле которого имеется общее для всех стеринов полициклическое ядро циклопентанпергидрофенантрена. Энзиматические методы определения содержания холестерина, основанные на использовании холестеринэстеразы, оксидазы и реакции Триндера, вытеснили более ранние методы.
    (check this in PDF content)

  25. Start
    23894
    Prefix
    Allian и соавт. разработали общий ферментативный метод, в котором при окислении холестерина в присутсвии пероксида водорода, пероксидазы, 4-аминоантипирина и фенола образуется хинониминовый краситель. Реагент содержит n-ГБС и фенол, образующие краситель с максимумом поглощения при 520 нм, а также сурфактант для обеспечения полного протекания реакции
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Интенсивность окраски раствора пропорциональна концентрации холестерина в пробе. Реакции получения хромогена предшествует гидролиз эфиров холестерина с образованием холестерина (таблица). Несмотря на высокую специфичность энзиматических методов, большое распространение для определения холестерина в сыворотке крови получил метод Илька [1, 3, 5–7, 9].
    (check this in PDF content)

  26. Start
    24243
    Prefix
    Реакции получения хромогена предшествует гидролиз эфиров холестерина с образованием холестерина (таблица). Несмотря на высокую специфичность энзиматических методов, большое распространение для определения холестерина в сыворотке крови получил метод Илька
    Exact
    [1, 3, 5–7, 9]
    Suffix
    . В его основу положена модифицированная реакция Либермана–Бурхарда, которая приводит к изумрудно-зеленому окрашиванию раствора в присутствии холестерина и смеси ледяной уксусной кислоты, уксусного ангидрида и концентрированной серной кислоты.
    (check this in PDF content)

  27. Start
    25148
    Prefix
    По природе спирта ФЛ можно разделить на фосфоглицериды, фосфосфингозины и фосфоинозитиды. Об общей концентрации ФЛ обычно судят по содержанию в них липидного фосфора, на долю которого приходится 4% молекулярного веса ФЛ (справедливо для фосфотидилхолинов (лецитинов)
    Exact
    [7]
    Suffix
    ). Так, метод Бартлетта–Ушера основан на минерализации липидов с помощью хлорной кислоты. Неорганический фосфор, взаимодействуя с молибдатом аммония, образует фосфомолибденовую кислоту, которую восстанавливают эйконогеном и пиросульфитом натрия в молибденовую синь.
    (check this in PDF content)

  28. Start
    25626
    Prefix
    По степени окраски вычисляют количество неорганического фосфора, содержащегося в ФЛ. Поскольку данный метод достаточно трудоемкий, требует проведения стадии экстракции липидов (как правило по методу Фолча
    Exact
    [3, 7]
    Suffix
    ), в рутинных лабораторных исследованиях используют энзиматический метод [8], основанный на гидролизе ФЛ фосфолипазой. Высвобождающийся холин затем окисляется холиноксидазой в бетаин с образованием перекиси водорода.
    (check this in PDF content)

  29. Start
    25710
    Prefix
    Поскольку данный метод достаточно трудоемкий, требует проведения стадии экстракции липидов (как правило по методу Фолча [3, 7]), в рутинных лабораторных исследованиях используют энзиматический метод
    Exact
    [8]
    Suffix
    , основанный на гидролизе ФЛ фосфолипазой. Высвобождающийся холин затем окисляется холиноксидазой в бетаин с образованием перекиси водорода. В присутствии пероксидазы перекись водорода связывается с 4-аминофеназоном и дихлорфенолом с формированием комплекса кинонимина, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации ФЛ (таблица).
    (check this in PDF content)

  30. Start
    26350
    Prefix
    ПОКАЗАТЕЛИ МИНЕРАЛЬНОГО ОБМЕНА Кальций — это наиболее распространенный и один из наиболее важных элементов в организме человека и животных. Примерно 99% всего кальция находится в костях. Определение кальция в сыворотке крови основано на образовании окрашенного комплекса с Арсеназо III
    Exact
    [7]
    Suffix
    , интенсивность окраски раствора которого прямо пропорциональна концентрации кальция в образце. Арсеназо III — металлокомплексон из группы диазокомплексообразователей, которые имеют неодинаковое сродство к различным ионам металлов.
    (check this in PDF content)

  31. Start
    26976
    Prefix
    Соотношение кальция и красителя для образования комплекса: одна часть образца на 100 частей реагента. В качестве комплексона при определении кальция может быть использован глиоксаль-бис-[2-оксианил]
    Exact
    [3, 6]
    Suffix
    и о-крезолфталеин [6, 8, 9]. Магний — это второй по распространенности внутриклеточный катион в организме животных и человека после калия, он участвует в большом количестве ферментативных и метаболических процессов.
    (check this in PDF content)

  32. Start
    27001
    Prefix
    Соотношение кальция и красителя для образования комплекса: одна часть образца на 100 частей реагента. В качестве комплексона при определении кальция может быть использован глиоксаль-бис-[2-оксианил] [3, 6] и о-крезолфталеин
    Exact
    [6, 8, 9]
    Suffix
    . Магний — это второй по распространенности внутриклеточный катион в организме животных и человека после калия, он участвует в большом количестве ферментативных и метаболических процессов. Метод определения концентрации магния впервые был предложен Kramer, Tisdall, Briggs и соавт. в 20-х гг.
    (check this in PDF content)

  33. Start
    27644
    Prefix
    Впоследствии было разработано несколько методик его определения: комплексонометрическое титрование с ЭДТА, флюориметрическая процедура с использованием специфических хелатирующих агентов и спектрофотометрический метод, в основе которого лежит реакция титана желтого и гидроксида магния с образованием красного пигмента
    Exact
    [3, 5–7, 9]
    Suffix
    . Все эти методы имели недостатки, которые отражались на точности результатов. Атомная абсорбция является методом, позволяющим наиболее точно определять концентрацию магния. Данный метод требует дорогостоящего оборудования и большого объема исследуемого материала.
    (check this in PDF content)

  34. Start
    28123
    Prefix
    Данный метод требует дорогостоящего оборудования и большого объема исследуемого материала. Совсем недавно был предложен спектрофотометрический метод, который стал наиболее популярным. В качестве окрашивающих агентов используют кальмагит, ксилидиловый голубой
    Exact
    [8]
    Suffix
    , эриохромовый черный Т, магон [6] или метилтимоловый голубой. При использовании металлохромного индикатора кальмагита нет необходимости проводить депротеинизацию, и результаты анализа имеют высокую сходимость с данными атомной абсорбции: ионы магния реагируют с кальмагитом в щелочной среде, при этом формируется комплекс, имеющий красное окрашивание (табл.
    (check this in PDF content)

  35. Start
    28157
    Prefix
    Совсем недавно был предложен спектрофотометрический метод, который стал наиболее популярным. В качестве окрашивающих агентов используют кальмагит, ксилидиловый голубой [8], эриохромовый черный Т, магон
    Exact
    [6]
    Suffix
    или метилтимоловый голубой. При использовании металлохромного индикатора кальмагита нет необходимости проводить депротеинизацию, и результаты анализа имеют высокую сходимость с данными атомной абсорбции: ионы магния реагируют с кальмагитом в щелочной среде, при этом формируется комплекс, имеющий красное окрашивание (табл.
    (check this in PDF content)

  36. Start
    29210
    Prefix
    Определение содержания неорганического фосфора в сыворотке крови основано на взаимодействии молибдата аммония с фосфатами в кислой среде с образованием фосфорномолибденового комплекса, имеющего синюю окраску, без проведения депротеинизации
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Поглощение при 340 нм прямо пропорционально количеству неорганического фосфора, содержащегося в образце (таблица). Возможно последующее восстановление полученного комплекса эйконогеном [3] или аскорбиновой кислотой [1, 7].
    (check this in PDF content)

  37. Start
    29402
    Prefix
    фосфора в сыворотке крови основано на взаимодействии молибдата аммония с фосфатами в кислой среде с образованием фосфорномолибденового комплекса, имеющего синюю окраску, без проведения депротеинизации [8]. Поглощение при 340 нм прямо пропорционально количеству неорганического фосфора, содержащегося в образце (таблица). Возможно последующее восстановление полученного комплекса эйконогеном
    Exact
    [3]
    Suffix
    или аскорбиновой кислотой [1, 7]. Неорганический фосфор в сыворотке крови может быть определен и с ванадат-молибденовым реактивом (по Пулсу в модификации В.Ф. Коромыслова и Л.А. Кудрявцевой) [5–7, 9], с которым фосфор дает лимонножелтое окрашивание.
    (check this in PDF content)

  38. Start
    29432
    Prefix
    Поглощение при 340 нм прямо пропорционально количеству неорганического фосфора, содержащегося в образце (таблица). Возможно последующее восстановление полученного комплекса эйконогеном [3] или аскорбиновой кислотой
    Exact
    [1, 7]
    Suffix
    . Неорганический фосфор в сыворотке крови может быть определен и с ванадат-молибденовым реактивом (по Пулсу в модификации В.Ф. Коромыслова и Л.А. Кудрявцевой) [5–7, 9], с которым фосфор дает лимонножелтое окрашивание.
    (check this in PDF content)

  39. Start
    29597
    Prefix
    Возможно последующее восстановление полученного комплекса эйконогеном [3] или аскорбиновой кислотой [1, 7]. Неорганический фосфор в сыворотке крови может быть определен и с ванадат-молибденовым реактивом (по Пулсу в модификации В.Ф. Коромыслова и Л.А. Кудрявцевой)
    Exact
    [5–7, 9]
    Suffix
    , с которым фосфор дает лимонножелтое окрашивание. Максимум светопоглощения комплекса приходится на 420 нм. Калий и натрий. Традиционно измерение концентрации натрия и калия в биологических жидкостях проводится методом пламенной фотометрии [5–7, 9], который представляет собой один из видов эмиссионного спектрального анализа, основанного на фотометрировании излучения элементов в пламени.
    (check this in PDF content)

  40. Start
    29848
    Prefix
    Кудрявцевой) [5–7, 9], с которым фосфор дает лимонножелтое окрашивание. Максимум светопоглощения комплекса приходится на 420 нм. Калий и натрий. Традиционно измерение концентрации натрия и калия в биологических жидкостях проводится методом пламенной фотометрии
    Exact
    [5–7, 9]
    Suffix
    , который представляет собой один из видов эмиссионного спектрального анализа, основанного на фотометрировании излучения элементов в пламени. Натрий окрашивает пламя в ярко-желтый цвет, а калий — в слабый красно-фиолетовый.
    (check this in PDF content)

  41. Start
    31108
    Prefix
    В настоящее время количество калия определяется с помощью тетрафенилбората натрия в специально приготовленной смеси для получения коллоидных взвесей, мутность которой пропорциональна концентрации калия в диапазоне от 2 до 7 мэкв/л
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Железо — микроэлемент, содержащийся в организме в наибольшем количестве. Основная часть железа расположена внутри гема в гемоглобине, каталазе, миоглобине, пероксидазе и цитохромах. Железо аккумулируется в форме, связанной с ферритином или гемосидерином, а переносится с помощью трансферрина.
    (check this in PDF content)

  42. Start
    32175
    Prefix
    Определение железа основано на том, что при добавлении содержащего гидроксиламин кислотного буферного раствора железо сыворотки высвобождается из Fe3+-трансферринового комплекса. Железо (III) восстанавливается до железа (II). Ионы железа реагируют с окрашенным агентом (феррозин), что приводит к образованию яркоокрашенного комплекса
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Абсорбция измеряется фотометрически при длине волны 560 нм (таблица). В качестве альтернативного можно использовать метод определения железа по цветной реакции с β-фенантролином [3, 6, 7]: белки осаждают трихлоруксусной кислотой, которая при прогревании разрушает комплекс железа с трансферрином.
    (check this in PDF content)

  43. Start
    32363
    Prefix
    Ионы железа реагируют с окрашенным агентом (феррозин), что приводит к образованию яркоокрашенного комплекса [8]. Абсорбция измеряется фотометрически при длине волны 560 нм (таблица). В качестве альтернативного можно использовать метод определения железа по цветной реакции с β-фенантролином
    Exact
    [3, 6, 7]
    Suffix
    : белки осаждают трихлоруксусной кислотой, которая при прогревании разрушает комплекс железа с трансферрином. Для установления оптимальной величины рН (4,8–5,0) добавляют ацетат аммония, а для восстановления всего железа — гидрозин.
    (check this in PDF content)

  44. Start
    32961
    Prefix
    Хлориды. Для клинического анализа важно определять концентрацию хлоридов, так как они регулируют осмотическое давление внеклеточной жидкости и играют значительную роль в кислотно-щелочном балансе
    Exact
    [2]
    Suffix
    . В 1978 г. хлориды определяли по реакции преципитации в виде хлорида серебра после титрования избытка нитрата серебра тиоцианатным раствором. С этого времени было предложено много методов, включая ртутное титрование с использованием в качестве индикатора дифенилкарбазона [3, 6].
    (check this in PDF content)

  45. Start
    33254
    Prefix
    В 1978 г. хлориды определяли по реакции преципитации в виде хлорида серебра после титрования избытка нитрата серебра тиоцианатным раствором. С этого времени было предложено много методов, включая ртутное титрование с использованием в качестве индикатора дифенилкарбазона
    Exact
    [3, 6]
    Suffix
    . Электрохимический метод был впервые представлен в 1950 г. Он основан на инкубации хлоридсодержащего раствора с электродами, выделяющими катион серебра в кислой среде. Время, необходимое для образования преципитатов в виде хлорида серебра, прямо пропорционально концентрации хлоридов в исследуемом растворе.
    (check this in PDF content)

  46. Start
    33834
    Prefix
    Большее распространение в биохимическом анализе получил метод, предложенный в 1950 г., в основе которого лежит следующий принцип: ионы хлора замещают тиоцианат из неионизированного тиоцианата ртути, при этом образуется хлорид ртути и тиоцианат-ионы
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Образовавшиеся тиоцианат-ионы реагируют с ионами железа с формированием окрашенного комплекса, максимум светопоглощения которого приходится на 480 нм. Интенсивность окрашивания прямо пропорциональна концентрации хлоридов в исследуемой сыворотке крови.
    (check this in PDF content)

  47. Start
    34518
    Prefix
    фосфатаза (ЩФ) (фосфогидролаза моноэфиров ортофосфорной кислоты, фосфомоноэстераза 1) — фермент гидролаза, отщепляющий фосфат (дефосфорилирование) от многих типов молекул, например, нуклеотидов, белков и алкалоидов. Фермент проявляет наибольшую активность в щелочной среде (рН от 8,6 до 10,1). Концентрация ЩФ определяется по изменению скорости гидролиза различных фосфатных эфиров
    Exact
    [5–9]
    Suffix
    . n-Нитрофенилфосфат — один из таких эфиров, использовался как субстрат Fujita в 1939 г. Bowers и McComb в дальнейшем модифицировали процедуру кинетического анализа. В 1974 г. Комитет по энзимологии Скандинавского общества клинической химии и клинической физиологии принял модификацию данного метода и рекомендовал его в качестве референсного.
    (check this in PDF content)

  48. Start
    35083
    Prefix
    Комитет по энзимологии Скандинавского общества клинической химии и клинической физиологии принял модификацию данного метода и рекомендовал его в качестве референсного. Скорость увеличения поглощения излучения при 405 нм, обусловленная образованием n-нитрофенола в процессе гидролиза n-нитрофенилфосфата, пропорциональна активности фермента
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Более известен как метод Бессея–Лоури–Брока [1, 3]. В качестве других энзиматических методов можно использовать метод Боданского и Кинга–Армстронга. Метод Боданского основан на ферментативном гидролизе β-глицерофосфата с освобождением неорганического фосфора, определяемого фотометрически [3, 6–7, 9].
    (check this in PDF content)

  49. Start
    35133
    Prefix
    Скорость увеличения поглощения излучения при 405 нм, обусловленная образованием n-нитрофенола в процессе гидролиза n-нитрофенилфосфата, пропорциональна активности фермента [8]. Более известен как метод Бессея–Лоури–Брока
    Exact
    [1, 3]
    Suffix
    . В качестве других энзиматических методов можно использовать метод Боданского и Кинга–Армстронга. Метод Боданского основан на ферментативном гидролизе β-глицерофосфата с освобождением неорганического фосфора, определяемого фотометрически [3, 6–7, 9].
    (check this in PDF content)

  50. Start
    35384
    Prefix
    В качестве других энзиматических методов можно использовать метод Боданского и Кинга–Армстронга. Метод Боданского основан на ферментативном гидролизе β-глицерофосфата с освобождением неорганического фосфора, определяемого фотометрически
    Exact
    [3, 6–7, 9]
    Suffix
    . А в основе метода Кинга–Армстронга лежит ферментативное расщепление фенилфосфата [3, 6]. Освобожденный в результате реакции фенол определяют фотометрически с реактивом Фолина. Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) (L-лактат: NADоксидоредуктаза) — гликолитический фермент, открытый Мейергофом в 1918 г., катализирует обратимую реакцию восстановления пировиноградной кислоты в молочную.
    (check this in PDF content)

  51. Start
    35478
    Prefix
    Метод Боданского основан на ферментативном гидролизе β-глицерофосфата с освобождением неорганического фосфора, определяемого фотометрически [3, 6–7, 9]. А в основе метода Кинга–Армстронга лежит ферментативное расщепление фенилфосфата
    Exact
    [3, 6]
    Suffix
    . Освобожденный в результате реакции фенол определяют фотометрически с реактивом Фолина. Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) (L-лактат: NADоксидоредуктаза) — гликолитический фермент, открытый Мейергофом в 1918 г., катализирует обратимую реакцию восстановления пировиноградной кислоты в молочную.
    (check this in PDF content)

  52. Start
    36490
    Prefix
    лития в пируват предпочтительнее, так как: 1) скорость реакции линейна на широком диапазоне активности фермента, 2) не требуется предварительная инкубация реакционной среды, 3) реагенты более стабильны. Кинетический метод основан на том, что ЛДГ катализирует окисление L-лактата до пирувата в присутствии NAD, который одновременно восстанавливается до NADH (оптический тест Варбурга)
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Скорость образования NADH измеряется при 340 нм, она прямо пропорциональна активности ЛДГ в сыворотке. Широкое распространение получил и динитрофенилгидразиновый метод [1, 3, 6, 7], основанный на определении пирувата (пировиноградной кислоты) по цветной реакции с 2,4-динитрофенилгидразином (метод Севела–Товарека).
    (check this in PDF content)

  53. Start
    36668
    Prefix
    Кинетический метод основан на том, что ЛДГ катализирует окисление L-лактата до пирувата в присутствии NAD, который одновременно восстанавливается до NADH (оптический тест Варбурга) [8]. Скорость образования NADH измеряется при 340 нм, она прямо пропорциональна активности ЛДГ в сыворотке. Широкое распространение получил и динитрофенилгидразиновый метод
    Exact
    [1, 3, 6, 7]
    Suffix
    , основанный на определении пирувата (пировиноградной кислоты) по цветной реакции с 2,4-динитрофенилгидразином (метод Севела–Товарека). Креатинкиназа (КК) (АТФ: креатин-N-фосфо трансфе раза) — фермент, катализирующий обратимую реакцию фосфорилирования креатина.
    (check this in PDF content)

  54. Start
    37735
    Prefix
    Затем АТФ и глюкоза превращаются в АДФ и глюкозо-6-фосфат при участии гексокиназы. Глюкозо-6-фосфат окисляется до 6-фосфоглюконата под действием глюкозо-6фосфат-дегидрогеназы, что приводит к уменьшению содержания NAD
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Концентрация NADH, измеренная при 340 нм, прямо пропорциональна активности КК в сыворотке. α-Амилаза (1,4-α-D-глюкан-глюканогидролаза) — один из первых открытых ферментов; катализирует эндогидролиз α-1,4-глюкозидных связей крахмала, гликогена и родственных им полисахаридов до мальтозы, декстринов и других полимеров.
    (check this in PDF content)

  55. Start
    38327
    Prefix
    В основе спектрофотометрического метода определения амилазы лежит реакция гидролиза 2-хлор-4нитрофенил-α-D-мальтатриозида α-амилазой с высвобождением 2-хлор-4-нитрофенила (ХНФ) и образованием 2-хлор-4-нитрофенил-α-D-мальтозида, мальтотриозы и глюкозы
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Скорость образования ХНФ измеряется фотометрически, величина поглощения пропорциональна коцентрации амилазы в образце (таблица). Активность амилазы может быть оценена амилоклассическим методом и методом Каравея (со стойким крахмальным субстратом) [1, 3, 6, 7], основанным на фотометрическом определении концентрации крахмала до и после его ферментативного гидролиза.
    (check this in PDF content)

  56. Start
    38588
    Prefix
    Скорость образования ХНФ измеряется фотометрически, величина поглощения пропорциональна коцентрации амилазы в образце (таблица). Активность амилазы может быть оценена амилоклассическим методом и методом Каравея (со стойким крахмальным субстратом)
    Exact
    [1, 3, 6, 7]
    Suffix
    , основанным на фотометрическом определении концентрации крахмала до и после его ферментативного гидролиза. Аспартатаминотрансфераза (АсАТ, АСТ) и аланинаминотрансфераза (АлАТ, АЛТ) катализируют обратимый перенос аминогрупп с L-аспарагиновой кислоты и L-аланина на α-кетоглутаровую кислоту.
    (check this in PDF content)

  57. Start
    39426
    Prefix
    Принцип метода основан на каталитической реакции переноса аминогруппы с L-аланина на α-кетоглутарат с образованием пирувата и L-глутамата под действием АлАТ. ЛДГ подвергается окислению, при этом NADН окисляется до NAD. Уровень снижения абсорбции прямо пропорционален активности АлАТ
    Exact
    [6, 8, 10]
    Suffix
    . Первые кинетические измерения активности АсАТ в диагностических целях были описаны Karmen и соавт. В 1955 г. они проводились с использованием сопряженной реакции в присутствии малатдегидрогеназы (МДГ) и NADH.
    (check this in PDF content)

  58. Start
    39849
    Prefix
    Данная система измерения была значительно улучшена и оптимизирована в 1960 г. Henry и соавт. В 1977 г. МФКХ рекомендовала референсный метод для измерения активности АсАТ, основанный на методе Karmen
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Ферментативный метод определения концентрации АсАТ основан на следующей последовательности реакций: АсАТ катализирует перенос аминогруппы между L-аспартатом и 2-оксоглутаратом. Образующийся в первой реакции оксалоацетат реагирует с NADH в присутствии МДГ с образованием NAD.
    (check this in PDF content)

  59. Start
    40557
    Prefix
    Возможно определение активности аминотрансфераз по методу Райтмана–Френкеля (1957), который основан на получении окрашенных динитрофенилгидразонов щавелевоуксусной (оксалоацетата) и пировиноградной (пирувата) кислот
    Exact
    [3, 6, 7]
    Suffix
    . Холинэстераза. Различают два типа холинэстераз — ацетилхолинэстеразу, или истинную холинэстеразу (АХЭ, ацетилхолин-ацетилгидролаза), и псевдохолинэстеразу (ХЭ, ацилхолин-ацилгидролаза). Истинная холинэстераза содержится преимущественно в эритроцитах, нервной и мышечной тканях; псевдохолинэстераза — в сыворотке крови, печени, поджелудочной железе.
    (check this in PDF content)

  60. Start
    41477
    Prefix
    Псевдохолинэстераза не отличается строгой субстратной специфичностью и гидролизует такие субстраты, как ацетилхолин, бензоилхолин, сукцинилхолин и другие эфиры холина. Принцип определения активности холинэстеразы в сыворотке крови основан на гидролизе ацетилхолинхлорида под действием фермента с образованием уксусной кислоты и холина
    Exact
    [3, 6, 7]
    Suffix
    . Уксусная кислота сдвигает рН буферного раствора, что устанавливается с помощью индикатора (фенолового красного [3, 6], фиолетового синего [7]) по изменению цвета буферного раствора. Определение активности холинэстеразы в сыворотке крови возможно методом с субстратом бутирилтиохолина йодидом [6, 7].
    (check this in PDF content)

  61. Start
    41599
    Prefix
    Принцип определения активности холинэстеразы в сыворотке крови основан на гидролизе ацетилхолинхлорида под действием фермента с образованием уксусной кислоты и холина [3, 6, 7]. Уксусная кислота сдвигает рН буферного раствора, что устанавливается с помощью индикатора (фенолового красного
    Exact
    [3, 6]
    Suffix
    , фиолетового синего [7]) по изменению цвета буферного раствора. Определение активности холинэстеразы в сыворотке крови возможно методом с субстратом бутирилтиохолина йодидом [6, 7]. В этом случае холинэстераза гидролизует субстрат с образованием масляной кислоты (бутирата) и тиохолина.
    (check this in PDF content)

  62. Start
    41627
    Prefix
    Принцип определения активности холинэстеразы в сыворотке крови основан на гидролизе ацетилхолинхлорида под действием фермента с образованием уксусной кислоты и холина [3, 6, 7]. Уксусная кислота сдвигает рН буферного раствора, что устанавливается с помощью индикатора (фенолового красного [3, 6], фиолетового синего
    Exact
    [7]
    Suffix
    ) по изменению цвета буферного раствора. Определение активности холинэстеразы в сыворотке крови возможно методом с субстратом бутирилтиохолина йодидом [6, 7]. В этом случае холинэстераза гидролизует субстрат с образованием масляной кислоты (бутирата) и тиохолина.
    (check this in PDF content)

  63. Start
    41782
    Prefix
    Уксусная кислота сдвигает рН буферного раствора, что устанавливается с помощью индикатора (фенолового красного [3, 6], фиолетового синего [7]) по изменению цвета буферного раствора. Определение активности холинэстеразы в сыворотке крови возможно методом с субстратом бутирилтиохолина йодидом
    Exact
    [6, 7]
    Suffix
    . В этом случае холинэстераза гидролизует субстрат с образованием масляной кислоты (бутирата) и тиохолина. Тиохолин взаимодействует с 5,5’-дитио-бис-(2-нитро-бензойной кислотой) с образованием 2-нитро-5-меркаптобензоата, окрашенного в желтый цвет.
    (check this in PDF content)

  64. Start
    42820
    Prefix
    Принцип кинетического спектрофотометрического метода определения активности основан на том, что ГГТ катализирует реакцию переноса L-γ-глутамилового остатка с L-γ-глутамил-n-нитроанилида на глицилглицин (метод Орловского и др.). Количество освобожденного в ходе реакции n-нитроанилина измеряется и служит мерой активности ГГТ
    Exact
    [6, 7]
    Suffix
    . В качестве субстрата могут быть использованы L-γ-глутамиланилид (метод Гольдберга и др.) и производное L-γ-глутамил-n-нитроанилида — L-γглутамил-3-карбокси-4-нитро анилид. В качестве буферов могут применяться трис-буфер, глицилглициновый, 2-амино-2-метил-1,3-пропандиоловый.
    (check this in PDF content)

  65. Start
    43307
    Prefix
    Вид буфера почти не оказывает влияния на активность фермента. Преимущество глицилглицинового буфера состоит в том, что он одновременно является и буфером, и акцептором γ-глутамилового остатка
    Exact
    [6]
    Suffix
    . ПОКАЗАТЕЛИ ОБЩЕГО КЛИНИЧЕСКОГО АНАЛИЗА КРОВИ Гемоглобин (ГГ). Из различных методов определения уровня ГГ в крови наиболее широко используется 2 АМФ — аденозинмонофосфат (англ. AMP); 3 АДФ — аденозиндифосфат (англ.
    (check this in PDF content)