The 10 reference contexts in paper A. Scherbakov V., A. Yakovleva S., A. Timina M., M. Yakupov R., А. Щербаков В., А. Яковлева С., А. Тимина М., М. Якупов Р. (2018) “Клонирование и экспрессия в E. COLI генов К205 R и B602L вируса африканской чему свиней // Cloning and expression of African swine fever virus K205R and B602L genes inf. COLI” / spz:neicon:veterinary:y:2015:i:2:p:27-31

  1. Start
    4167
    Prefix
    Возбудитель африканской чумы свиней — крупный оболочечный вирус семейства Asfarviridae, рода Asfivirus. Геном вируса АЧС, представленный двухцепочечной ДНК длиной 170–192 тысячи пар нуклеотидов, кодирует до 150 белков. Из них не менее 28 являются структурными
    Exact
    [3]
    Suffix
    . В связи с тем, что эффективные и безопасные вакцины против АЧС не разработаны, борьба с болезнью ведется путем ее диагностики и ликвидации очагов заболевания. Лабораторная диагностика АЧС основана на выявлении возбудителя болезни или антител к нему в крови и органах инфицированных животных.
    (check this in PDF content)

  2. Start
    5509
    Prefix
    Продукты реакции анализировали с помощью электрофореза в 2%-ном агарозном геле, содержащем 0,001% бромистого этидия, при силе тока 50 мА. Молекулярное клонирование генов K205R и B602L осуществляли по общепринятым методикам
    Exact
    [1]
    Suffix
    . Экспрессия рекомбинантных белков. Культивирование Е. coli проводили в орбитальном шейкере при 150 об/мин и 37 ºС. В дневную культуру клеток, достигшую логарифмической фазы роста, добавляли индуктор IPTG (Promega, США).
    (check this in PDF content)

  3. Start
    11411
    Prefix
    Для оценки степени очистки и концентрации рекомбинантных белков проводили электрофорез в 12%-ном полиакриаламидном геле по методу Лэммли. к вирусу АЧС является основным способом выявлеДля этого аликвоты дневной культуры отбирали через ния животных, инфицированных низковирулентными штаммами
    Exact
    [2]
    Suffix
    . В качестве основного метода серологической диагностики АЧС Всемирная организация здравоохранения животных (МЭБ) рекомендует иммуноферментный анализ. В иммуноферментном анализе, рекомендованном МЭБ (далее МЭБ-ИФА), в качестве антигена используются частично очищенные препараты белков вируса АЧС, выращенного в культуре клеток MS [6].
    (check this in PDF content)

  4. Start
    11748
    Prefix
    В качестве основного метода серологической диагностики АЧС Всемирная организация здравоохранения животных (МЭБ) рекомендует иммуноферментный анализ. В иммуноферментном анализе, рекомендованном МЭБ (далее МЭБ-ИФА), в качестве антигена используются частично очищенные препараты белков вируса АЧС, выращенного в культуре клеток MS
    Exact
    [6]
    Suffix
    . Получение такого антигена трудно стандартизировать, и оно связано с биологическими рисками. Кроме того, при высокой чувствительности МЭБ-ИФА его специфичность относительно невысока [4]. В связи с этим активно ведутся исследования по получению и использованию в серодиагностике АЧС рекомбинантных антигенов.
    (check this in PDF content)

  5. Start
    11936
    Prefix
    В иммуноферментном анализе, рекомендованном МЭБ (далее МЭБ-ИФА), в качестве антигена используются частично очищенные препараты белков вируса АЧС, выращенного в культуре клеток MS [6]. Получение такого антигена трудно стандартизировать, и оно связано с биологическими рисками. Кроме того, при высокой чувствительности МЭБ-ИФА его специфичность относительно невысока
    Exact
    [4]
    Suffix
    . В связи с этим активно ведутся исследования по получению и использованию в серодиагностике АЧС рекомбинантных антигенов. Рекомбинантные антигены биологически безопасны, более технологичны в приготовлении и обеспечивают более высокую специфичность ИФА.
    (check this in PDF content)

  6. Start
    12304
    Prefix
    Рекомбинантные антигены биологически безопасны, более технологичны в приготовлении и обеспечивают более высокую специфичность ИФА. К настоящему времени описано применение в серодиагностике АЧС нескольких рекомбинантных белков: р54
    Exact
    [7, 8]
    Suffix
    , р30 [9, 11], pp62 [5], р10, р72, рA104R, pC44L, pCP312R [12]. В 2009 г C. Gallardo и соавт. показали, что перспективными антигенами для серодиагностики АЧС являются рекомбинантные белки рK205R и рB602L.
    (check this in PDF content)

  7. Start
    12315
    Prefix
    Рекомбинантные антигены биологически безопасны, более технологичны в приготовлении и обеспечивают более высокую специфичность ИФА. К настоящему времени описано применение в серодиагностике АЧС нескольких рекомбинантных белков: р54 [7, 8], р30
    Exact
    [9, 11]
    Suffix
    , pp62 [5], р10, р72, рA104R, pC44L, pCP312R [12]. В 2009 г C. Gallardo и соавт. показали, что перспективными антигенами для серодиагностики АЧС являются рекомбинантные белки рK205R и рB602L.
    (check this in PDF content)

  8. Start
    12329
    Prefix
    Рекомбинантные антигены биологически безопасны, более технологичны в приготовлении и обеспечивают более высокую специфичность ИФА. К настоящему времени описано применение в серодиагностике АЧС нескольких рекомбинантных белков: р54 [7, 8], р30 [9, 11], pp62
    Exact
    [5]
    Suffix
    , р10, р72, рA104R, pC44L, pCP312R [12]. В 2009 г C. Gallardo и соавт. показали, что перспективными антигенами для серодиагностики АЧС являются рекомбинантные белки рK205R и рB602L. ИФА с применением этих рекомбинантных антигенов отличался высокой чувствительностью и специфичностью при выявлении антител к вирусу АЧС в сыворотках крови свиней [10].
    (check this in PDF content)

  9. Start
    12367
    Prefix
    Рекомбинантные антигены биологически безопасны, более технологичны в приготовлении и обеспечивают более высокую специфичность ИФА. К настоящему времени описано применение в серодиагностике АЧС нескольких рекомбинантных белков: р54 [7, 8], р30 [9, 11], pp62 [5], р10, р72, рA104R, pC44L, pCP312R
    Exact
    [12]
    Suffix
    . В 2009 г C. Gallardo и соавт. показали, что перспективными антигенами для серодиагностики АЧС являются рекомбинантные белки рK205R и рB602L. ИФА с применением этих рекомбинантных антигенов отличался высокой чувствительностью и специфичностью при выявлении антител к вирусу АЧС в сыворотках крови свиней [10].
    (check this in PDF content)

  10. Start
    12683
    Prefix
    Gallardo и соавт. показали, что перспективными антигенами для серодиагностики АЧС являются рекомбинантные белки рK205R и рB602L. ИФА с применением этих рекомбинантных антигенов отличался высокой чувствительностью и специфичностью при выявлении антител к вирусу АЧС в сыворотках крови свиней
    Exact
    [10]
    Suffix
    . Цель работы состояла в том, чтобы экспрессией в E. coli получить рекомбинантные белки pK205R и pB602L и отработать условия их экспрессии и очистки. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Вирусы. Для молекулярного клонирования генов K205R и B602L использовали изолят Оренбург-2008 вируса АЧС.
    (check this in PDF content)