The 19 reference contexts in paper S. Kuleshova I., Светлана Кулешова Ивановна (2018) “Определение активности антибиотиков методом диффузии в агар // Testing activity of antibiotics by agar diffusion” / spz:neicon:vedomostincesmp:y:2015:i:3:p:13-17

  1. Start
    1235
    Prefix
    Cнижение активности антибиотиков приводит к изменениям, которые невозможно обнаружить химическими методами, поэтому микробиологические или биологические испытания рекомендованы в качестве стандартных методов при подозрении на уменьшение активности антибиотиков
    Exact
    [1]
    Suffix
    . В ГФ ХII, часть 1 включена ОФС 42-0068-07 «Определение антимикробной активности антибиотиков», в которой достаточно подробно описаны два варианта метода диффузии в агар и использование стандартной кривой, с указанием условий проведения испытания, культивирования и хранения тест-микроорганизмов, приведен состав питательных сред и буферных растворов, используемых при анализе кон
    (check this in PDF content)

  2. Start
    7456
    Prefix
    Количество активного действующего вещества в лекарственной форме тесно связано с активностью антибиотика, входящего в состав препарата, и если ее определение не является точным, слишком высоким, или слишком низким, вероятны неадекватная терапия и нежелательные побочные эффекты при применении такого препарата
    Exact
    [2]
    Suffix
    . Поэтому для проведения испытания так важно использование аттестованных стандартных образцов с достоверно установленной активностью, имеющих фармакопейное качество. При этом необходимо строго соблюдать условия хранения и использовать по назначению в строгом соответствии с указаниями на этикетке.
    (check this in PDF content)

  3. Start
    10180
    Prefix
    Питательная среда должна обеспечивать не только оптимальные условия для роста микробной взвеси, но и достаточную скорость диффузии исследуемого антибиотика. Известно, что способность антибиотиков диффундировать в твердых питательных средах зависит от химической природы и концентрации
    Exact
    [3–5]
    Suffix
    . Поэтому состав среды имеет существенное значение при проведении испытания методом диффузии в агар. Так, при использовании питательных сред с агар-агаром разных производителей можно получить «относительную активность», т.е. активность по отношению к активности стандартного образца, для одного и того же компонента, отличающуюся на несколько процентов.
    (check this in PDF content)

  4. Start
    10842
    Prefix
    Относительная активность одного из компонента полимиксина – полимиксина В2, определенная на питательной среде, изготовленной с использованием агара «Eiken», получена 98 ± 6,1%, на питательной среде с агаром «Difco» – 129 ± 6,0%.
    Exact
    [5]
    Suffix
    . Для устранения ошибок, связанных с составом питательных сред, можно рекомендовать закупку достаточно больших партий высококачественных компонентов питательных сред и строгое соблюдение условий хранения в течение допустимого срока использования [2].
    (check this in PDF content)

  5. Start
    11096
    Prefix
    Для устранения ошибок, связанных с составом питательных сред, можно рекомендовать закупку достаточно больших партий высококачественных компонентов питательных сред и строгое соблюдение условий хранения в течение допустимого срока использования
    Exact
    [2]
    Suffix
    . Во всех вариантах метода, трехдозного варианта метода диффузии в агар и определение антимикробной активности антибиотиков с использованием стандартной кривой, предусмотрено помещение стандартных растворов на одной и той же чашке с раствором испытуемого препарата.
    (check this in PDF content)

  6. Start
    12289
    Prefix
    Поэтому у микробиологов, выполняющих такие испытание, необходимо наработать навыки аккуратной и точной работы с чашками Петри при внесении как расплавленной (засеянной и незасеянной) питательной среды на чашки, так и растворов антибиотиков. Разная толщина агара в чашках влияет на чувствительность используемого микроорганизма и на размеры зон угнетения.
    Exact
    [4]
    Suffix
    . При внесении посевной дозы обязательно учитывать оптимальную температуру питательно среды для суспензии спор и для вегетативных клеток [6]. При работе с чашками Петри необходимо соблюдать несколько правил [1, 3, 5, 7]: - устанавливают чашки на строго горизонтальную поверхность; - чашки должны быть одного размера; - в каждую чашку наливают одинаковое количество растопленно
    (check this in PDF content)

  7. Start
    12437
    Prefix
    Разная толщина агара в чашках влияет на чувствительность используемого микроорганизма и на размеры зон угнетения. [4]. При внесении посевной дозы обязательно учитывать оптимальную температуру питательно среды для суспензии спор и для вегетативных клеток
    Exact
    [6]
    Suffix
    . При работе с чашками Петри необходимо соблюдать несколько правил [1, 3, 5, 7]: - устанавливают чашки на строго горизонтальную поверхность; - чашки должны быть одного размера; - в каждую чашку наливают одинаковое количество растопленной агаровой среды и равномерно распределяют по чашке (горизонтальная поверхность, одинаковый объем среды и ее глубина в чашках уменьшают в
    (check this in PDF content)

  8. Start
    12636
    Prefix
    При внесении посевной дозы обязательно учитывать оптимальную температуру питательно среды для суспензии спор и для вегетативных клеток [6]. При работе с чашками Петри необходимо соблюдать несколько правил
    Exact
    [1, 3, 5, 7]
    Suffix
    : - устанавливают чашки на строго горизонтальную поверхность; - чашки должны быть одного размера; - в каждую чашку наливают одинаковое количество растопленной агаровой среды и равномерно распределяют по чашке (горизонтальная поверхность, одинаковый объем среды и ее глубина в чашках уменьшают вариацию зон в разных чашках); - лунки или цилиндрики (стерильные) устанав
    (check this in PDF content)

  9. Start
    13932
    Prefix
    На рисунке 2 представлены фотографии опыта с зонами угнетения правильной округлой формы для измерения размеров зон с требуемой точностью 0,1 мм (корректный опыт) и опыта с нечетко очерченными краями неправильной формы, не позволяющий получить достоверный результат
    Exact
    [2]
    Suffix
    . Оптимальными размерами зон угнетения роста тестмикроорганизмов принято считать диаметры зон не менее 14 мм для минимальной концентрации и не более 25 мм для максимальной. Для достижения таких результатов помимо всего перечисленного выше необходимо также постоянство температуры в термостате и соблюдение продолжительности инкубации.
    (check this in PDF content)

  10. Start
    14533
    Prefix
    Уменьшение толщины агара способствует увеличению зон, повышенная толщина среды – к уменьшению зон, альтернативно, размеры зон могут быть увеличены или уменьшены концентрацией стандартного образца и испытуемого антибиотика
    Exact
    [3]
    Suffix
    . Метод диффузии в агар используется для количественного определения содержания активного вещества в лекарственных средствах. Согласно требованиям нормативных документов методика количественного определения должна отвечать параметрам валидации «Точность», «Прецизионность (воспроизводимость и сходимость)», «Специфичность», «Линейность», «Диапазон применения» [8].
    (check this in PDF content)

  11. Start
    14919
    Prefix
    Согласно требованиям нормативных документов методика количественного определения должна отвечать параметрам валидации «Точность», «Прецизионность (воспроизводимость и сходимость)», «Специфичность», «Линейность», «Диапазон применения»
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Все эти требования применимы к биологическим методам, используемых для установления активности действующих веществ лекарственных средств [9]. Оценка линейности и диапазона применения (аналитическая область методики) позволяет определить область концентраций растворов антибиотика, в которой соблюдается прямо пропорциональная зависимость размера диаметра зон
    (check this in PDF content)

  12. Start
    15070
    Prefix
    Согласно требованиям нормативных документов методика количественного определения должна отвечать параметрам валидации «Точность», «Прецизионность (воспроизводимость и сходимость)», «Специфичность», «Линейность», «Диапазон применения» [8]. Все эти требования применимы к биологическим методам, используемых для установления активности действующих веществ лекарственных средств
    Exact
    [9]
    Suffix
    . Оценка линейности и диапазона применения (аналитическая область методики) позволяет определить область концентраций растворов антибиотика, в которой соблюдается прямо пропорциональная зависимость размера диаметра зон угнетения тестмикроорганизма от логарифма концентрации раствора антибиотика.
    (check this in PDF content)

  13. Start
    16273
    Prefix
    При изменении условий (замена питательных сред или их компонентов) рекомендуется проверить параметр «Линейность»; при этом в качестве средней концентрации использовать контрольную концентрацию раствора стандартного образца, указанную в таблице 33.2. Оценка точности результатов проводится по ширине доверительного интервала
    Exact
    [1, 8]
    Suffix
    . Для полученных значений активности всегда рассчитывают доверительный интервал, обычно выбирая 95% [1, 6, 7]. Расчет антимикробной активности антибиотика и определение границ доверительного интервала при проведении испытания с использованием стандартной кривой подробно описан в соответствующей монографии ГФ ХII.
    (check this in PDF content)

  14. Start
    16383
    Prefix
    ) рекомендуется проверить параметр «Линейность»; при этом в качестве средней концентрации использовать контрольную концентрацию раствора стандартного образца, указанную в таблице 33.2. Оценка точности результатов проводится по ширине доверительного интервала [1, 8]. Для полученных значений активности всегда рассчитывают доверительный интервал, обычно выбирая 95%
    Exact
    [1, 6, 7]
    Suffix
    . Расчет антимикробной активности антибиотика и определение границ доверительного интервала при проведении испытания с использованием стандартной кривой подробно описан в соответствующей монографии ГФ ХII.
    (check this in PDF content)

  15. Start
    16766
    Prefix
    Расчет антимикробной активности антибиотика и определение границ доверительного интервала при проведении испытания с использованием стандартной кривой подробно описан в соответствующей монографии ГФ ХII. Для оценки достоверности и точности результатов, полученных трехдозным вариантом метода диффузии в агар, используют дисперсионный анализ
    Exact
    [10]
    Suffix
    . Сходимость и воспроизводимость (прецизионность) полученных результатов обычно выражают как стандартное отклонение или относительное стандартное отклонение для серии результатов [1, 11].
    (check this in PDF content)

  16. Start
    16959
    Prefix
    Для оценки достоверности и точности результатов, полученных трехдозным вариантом метода диффузии в агар, используют дисперсионный анализ [10]. Сходимость и воспроизводимость (прецизионность) полученных результатов обычно выражают как стандартное отклонение или относительное стандартное отклонение для серии результатов
    Exact
    [1, 11]
    Suffix
    . Для получения достоверных результатов рекомендуется проводить исследование активности антибиотиков не менее 6 поРис. 1. Схема внесения растворов антибиотика при проведении испытания трехдозным вариантом метода диффузии в агар на чашках Петри.
    (check this in PDF content)

  17. Start
    17935
    Prefix
    Образцы чашек Петри с сформированными зонами угнетения роста тест-микроорганизмов после внесения на засеянную агаризованную питательную среду антибиотика. А) некорректный опыт, Б) корректный опыт вторных испытаний в разные дни (не менее 2 дней) для варианта метода с использованием стандартной кривой
    Exact
    [6]
    Suffix
    , поэтому расчет относительного стандартного отклонения является обязательным для оценки сходимости результатов. При строгой стандартизации условий проведения испытания по результатам работы лаборатории антибиотиков ФГБУ «НЦЭСПМ» относительное стандартное отклонение, как правило, не превышало 5% независимо от используемого варианта метода.
    (check this in PDF content)

  18. Start
    18575
    Prefix
    При оценке достоверности значений активности, полученных трехдозным вариантом метода диффузии в агар, необходимо учитывать, что способ статистической обработки результатов основан на модели параллельных линий. Условия валидности модели параллельных линий следующие
    Exact
    [1, 7, 5]
    Suffix
    : -взаимосвязь между логарифмом концентрации антибиотика и размером зон угнетения может быть представлена в виде прямой линии во всем диапазоне исследованных доз (концентраций); - при анализе прямая линия (график зависимости логарифма дозы от диаметра зон угнетения) для любого испытуемого лекарственного средства параллельна соответствующей прямой линии для стандартного образца; -
    (check this in PDF content)

  19. Start
    19896
    Prefix
    Предполагаемая активность испытуемого препарата должна быть близка к действительной активности и, чем точнее определена принятая предполагаемая активность испытуемого препарата к принятой активности стандартного препарата, тем ближе одна к одной будут эти линии, поскольку они должны давать одинаковые эффекты при одинаковых дозах
    Exact
    [5]
    Suffix
    . Таким образом, метод диффузии в агар, применяемый для определения активности лекарственных препраратов группы антибиотиков, требует строгой стандартизации условий проведения испытания на все этапах анализа, высокой квалификации сотрудников, выполняющих определение.
    (check this in PDF content)