The 26 references with contexts in paper S. Ponomarenko V., С. Пономаренко В. (2018) “Экономические барьеры, тормозящие производство терапевтического рекомбинантного трипсина человека. Применение инновационных технологий для их преодоления // Economic barriers restraining the production of therapeutic recombinant human trypsin. Use of innovative technologies to overcome them” / spz:neicon:pharmacoeconomics:y:2018:i:3:p:58-66

1
UniProtKB – P07477 (TRY1_HUMAN). [electronic resource]. URL: https://www.uniprot.org/uniprot/P07477/. Accessed: 08.07.2018.
Total in-text references: 3
  1. In-text reference with the coordinate start=6524
    Prefix
    Он является очень важным для животных организмов ферментом – гидролизует белки, расщепляя их пептидные цепи на карбоксильном фланге аминокислот лизина или аргинина, за исключением некоторых случаев
    Exact
    [1,2]
    Suffix
    . Установлена трехмерная структура трипсина, которая имеет несколько дисульфидных связей [3]. Трипсины млекопитающих гомологичны по структуре и проявляют одинаковый механизм ферментативной реакции [2,4].

  2. In-text reference with the coordinate start=7728
    Prefix
    В организме человека превалирует производство трипсина 1 бета (Trp1) [11]. Синтез его предшественника, катионического трипсиногена, кодируется геном PRSS1 (или TRP1), который находится в хромосоме 7 генома человека
    Exact
    [1]
    Suffix
    . Чаще всего, особенно для медицинских исследований, рекомбинантный трипсин человека (рТч) экспрессируется как Trp1. Протеолитик Trp1 – наиболее изученный белок из субсемейства трипсинов в генетике, молекулярной биологии, биохимии и физио- логии, о нем получено больше клинических данных, чем для других изоформ [15-16].

  3. In-text reference with the coordinate start=18964
    Prefix
    Необходимо развивать инновационные технологии для снижения стоимости производства рТч, что приведет к увеличению глобального применения этой протеазы в терапии различных болезней (см. табл. 1). Особенности производства рекомбинантного трипсина Trp1 – это белок, состоящий из 224 аминокислотных остатков с молекулярной массой 23 КДа
    Exact
    [1]
    Suffix
    , среди которых шесть аргининов и 13 лизинов. В катионическом трипсиногене человека содержится 20 этих диаминокарбоновых аминокислот, по которым фермент способен аутогидролизоваться, и скорость образования может быть для разных пептидных фрагментов очень быстрой, быстрой или медленной в зависимости от структурных особенностей белка [23].

2
Vandermarliere e., Mueller M., Martens L. Getting intimate with trypsin, the leading protease in proteomics. Mass Spectrometry Reviews. 2013; 32: 453-465.
Total in-text references: 3
  1. In-text reference with the coordinate start=6524
    Prefix
    Он является очень важным для животных организмов ферментом – гидролизует белки, расщепляя их пептидные цепи на карбоксильном фланге аминокислот лизина или аргинина, за исключением некоторых случаев
    Exact
    [1,2]
    Suffix
    . Установлена трехмерная структура трипсина, которая имеет несколько дисульфидных связей [3]. Трипсины млекопитающих гомологичны по структуре и проявляют одинаковый механизм ферментативной реакции [2,4].

  2. In-text reference with the coordinate start=6727
    Prefix
    Установлена трехмерная структура трипсина, которая имеет несколько дисульфидных связей [3]. Трипсины млекопитающих гомологичны по структуре и проявляют одинаковый механизм ферментативной реакции
    Exact
    [2,4]
    Suffix
    . Трипсины животных экстрагируют из их желез и последовательно очищают методами, использующими особенности физико-химических свойств этого протеина [5-9]. Поджелудочная железа (ПЖ) животных производит большое количество трипсина, который у млекопитающих транслируется как неактивный профермент трипсиноген.

  3. In-text reference with the coordinate start=9393
    Prefix
    Такого же качества протеаза требуется в большом количестве для трипсинолиза в производстве других терапевтических белков и вакцин. Этот энзим используют в анализах разного типа, например, для подтверждения первичной структуры белков, так как он высокоспецефично расщепляет пептиды после аргинина или лизина
    Exact
    [2,23]
    Suffix
    . Почти весь коммерческий трипсин выделяют из ПЖ свиней или крупного рогатого скота (КРС), хотя в последнее время растет количество и качество промышленных протеаз, вырабатываемых из растений или микроорганизмов.

3
Gaboriaud C., Serre L., Guy-Crotte O., Forest e., FontecillaCamps J. S. Crystal structure of human trypsin 1: unexpected phosphorylation of Tyr151. J. Mol. Biol. 1996; 259 (5): 995-1010. DOI: 10.1006/jmbi.1996.0376.
Total in-text references: 2
  1. In-text reference with the coordinate start=6620
    Prefix
    Он является очень важным для животных организмов ферментом – гидролизует белки, расщепляя их пептидные цепи на карбоксильном фланге аминокислот лизина или аргинина, за исключением некоторых случаев [1,2]. Установлена трехмерная структура трипсина, которая имеет несколько дисульфидных связей
    Exact
    [3]
    Suffix
    . Трипсины млекопитающих гомологичны по структуре и проявляют одинаковый механизм ферментативной реакции [2,4]. Трипсины животных экстрагируют из их желез и последовательно очищают методами, использующими особенности физико-химических свойств этого протеина [5-9].

  2. In-text reference with the coordinate start=23921
    Prefix
    Критически высокозатратными являются при получении рекомбинантного белка из e. coli несколько фаз down-stream-процесса: фолдинг трипсиногена, очистка и полишинг, а также кристаллизация трипсина (см. табл. 2). Трипсин человека для своей биологически активной структуры образует пять дисульфидных мостиков
    Exact
    [3]
    Suffix
    . Такое количество цистеинов затрудняет реакцию правильной укладки молекулы in vitro, а также ведет к образованию большого числа структурных изоформ. Требуется инновационный метод для повышения эффективности фолдинга трипсиногена, образующего тельца вклютрадиционными методами [24], однако в технологии его производства имеется несколько проблемных фаз (табл. 2).

4
Rypniewski W., Pirrakis A., Vorgias C. e., Wilson K. S. evolutionary Devergence and Concervation of Trypsin. Protein engineering. 1994; 7 (1): 57-64.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=6727
    Prefix
    Установлена трехмерная структура трипсина, которая имеет несколько дисульфидных связей [3]. Трипсины млекопитающих гомологичны по структуре и проявляют одинаковый механизм ферментативной реакции
    Exact
    [2,4]
    Suffix
    . Трипсины животных экстрагируют из их желез и последовательно очищают методами, использующими особенности физико-химических свойств этого протеина [5-9]. Поджелудочная железа (ПЖ) животных производит большое количество трипсина, который у млекопитающих транслируется как неактивный профермент трипсиноген.

5
Patent RU (11) 2 265 053 (13) C2 IPC C 12 N 9/76. The method of obtaining trypsin. Albulov AI, Samuylenko A. Ya., Fomenko A. S. and others. The patent holder is VNITIBP. Application: 2002134730/13, December 24, 2002. Published on: 27.11.2005. Bul. N 33. [Patent RU(11) 2 265 053(13) C2 MPk C 12 N 9/76. Sposob polucheniya tripsina. Albulov A. I., Samuylenko A.YA., Fomenko A. S. et al. Patentoobladatel’ – VNITIBP. Zayavka: 2002134730/13, 24.12.2002. opublikovano: 27.11.2005. Byul. N 33 (in Russian)].
Total in-text references: 2
  1. In-text reference with the coordinate start=6880
    Prefix
    Трипсины млекопитающих гомологичны по структуре и проявляют одинаковый механизм ферментативной реакции [2,4]. Трипсины животных экстрагируют из их желез и последовательно очищают методами, использующими особенности физико-химических свойств этого протеина
    Exact
    [5-9]
    Suffix
    . Поджелудочная железа (ПЖ) животных производит большое количество трипсина, который у млекопитающих транслируется как неактивный профермент трипсиноген. Он транспортируется в кишечник, где активируется мембранно-связанной протеазой (энтеропептидазой) с формированием активного фермента [10].

  2. In-text reference with the coordinate start=27544
    Prefix
    Высокозатратный фолдинг трипсиногена ПреимуществаВыделяют и очищают натуральный, биологически активный трипсин Не требуется фолдинг полипептида in vitro. Вырабатывается рекомбинантный трипсин Высокая экспрессия и продукция белка, идентичного трипсину человека Ссылки
    Exact
    [5-9]
    Suffix
    [37-38][39-41] ФАРМАКОЭКОНОМИКА. Современная фармакоэкономика и фармакоэпидемиология. 2018; Том 11, No 3 www.pharmacoeconomics.ru макоэкономических и других исследований, подтверждающих потребность и преимущество терапии рТч, как это было выполнено для других рекомбинантных терапевтиков, вызывает у инвестора определенный уровень неуверенности в выгодной реализации проекта.

6
Kislitsin Yu.A., Rebrikov D. V., Dunaevskiy Ya.e., Rudenskaya G. N. Bioorganicheskaya himiya (in Russian). 2003; 29 (3): 269-276.
Total in-text references: 3
  1. In-text reference with the coordinate start=6880
    Prefix
    Трипсины млекопитающих гомологичны по структуре и проявляют одинаковый механизм ферментативной реакции [2,4]. Трипсины животных экстрагируют из их желез и последовательно очищают методами, использующими особенности физико-химических свойств этого протеина
    Exact
    [5-9]
    Suffix
    . Поджелудочная железа (ПЖ) животных производит большое количество трипсина, который у млекопитающих транслируется как неактивный профермент трипсиноген. Он транспортируется в кишечник, где активируется мембранно-связанной протеазой (энтеропептидазой) с формированием активного фермента [10].

  2. In-text reference with the coordinate start=22138
    Prefix
    Следует отметить, что угроза аутогидролиза сохраняется для трипсина всех животных [11-12] и для описанных технологий производства протеазы. Однако аутокаталитическая деградация трипсиногена в 10 раз ниже, чем активного трипсина, что объясняет большие потери целевого продукта из животного сырья
    Exact
    [6-7]
    Suffix
    . Для промышленных целей производят трипсин и очень редко – трипсиноген из ПЖ [7]. Практика показывает, что аутопротеолиз выделяемых протеаз трудно предотвратить, поэтому методы, принципиально снижающие аутокатализ трипсина, можно использовать в производстве других рекомбинантных энзимов.

  3. In-text reference with the coordinate start=27544
    Prefix
    Высокозатратный фолдинг трипсиногена ПреимуществаВыделяют и очищают натуральный, биологически активный трипсин Не требуется фолдинг полипептида in vitro. Вырабатывается рекомбинантный трипсин Высокая экспрессия и продукция белка, идентичного трипсину человека Ссылки
    Exact
    [5-9]
    Suffix
    [37-38][39-41] ФАРМАКОЭКОНОМИКА. Современная фармакоэкономика и фармакоэпидемиология. 2018; Том 11, No 3 www.pharmacoeconomics.ru макоэкономических и других исследований, подтверждающих потребность и преимущество терапии рТч, как это было выполнено для других рекомбинантных терапевтиков, вызывает у инвестора определенный уровень неуверенности в выгодной реализации проекта.

7
Brodrick J. W., Largman C., Johnson J. H., Geokas M. C. Human Cation Trypsinogen Purification, Characterization, and Characteristic of Autoactivation. J. Biol. Chem. 1978; 253 (8): 2732-2736.
Total in-text references: 4
  1. In-text reference with the coordinate start=6880
    Prefix
    Трипсины млекопитающих гомологичны по структуре и проявляют одинаковый механизм ферментативной реакции [2,4]. Трипсины животных экстрагируют из их желез и последовательно очищают методами, использующими особенности физико-химических свойств этого протеина
    Exact
    [5-9]
    Suffix
    . Поджелудочная железа (ПЖ) животных производит большое количество трипсина, который у млекопитающих транслируется как неактивный профермент трипсиноген. Он транспортируется в кишечник, где активируется мембранно-связанной протеазой (энтеропептидазой) с формированием активного фермента [10].

  2. In-text reference with the coordinate start=22138
    Prefix
    Следует отметить, что угроза аутогидролиза сохраняется для трипсина всех животных [11-12] и для описанных технологий производства протеазы. Однако аутокаталитическая деградация трипсиногена в 10 раз ниже, чем активного трипсина, что объясняет большие потери целевого продукта из животного сырья
    Exact
    [6-7]
    Suffix
    . Для промышленных целей производят трипсин и очень редко – трипсиноген из ПЖ [7]. Практика показывает, что аутопротеолиз выделяемых протеаз трудно предотвратить, поэтому методы, принципиально снижающие аутокатализ трипсина, можно использовать в производстве других рекомбинантных энзимов.

  3. In-text reference with the coordinate start=22219
    Prefix
    Однако аутокаталитическая деградация трипсиногена в 10 раз ниже, чем активного трипсина, что объясняет большие потери целевого продукта из животного сырья [6-7]. Для промышленных целей производят трипсин и очень редко – трипсиноген из ПЖ
    Exact
    [7]
    Suffix
    . Практика показывает, что аутопротеолиз выделяемых протеаз трудно предотвратить, поэтому методы, принципиально снижающие аутокатализ трипсина, можно использовать в производстве других рекомбинантных энзимов.

  4. In-text reference with the coordinate start=27544
    Prefix
    Высокозатратный фолдинг трипсиногена ПреимуществаВыделяют и очищают натуральный, биологически активный трипсин Не требуется фолдинг полипептида in vitro. Вырабатывается рекомбинантный трипсин Высокая экспрессия и продукция белка, идентичного трипсину человека Ссылки
    Exact
    [5-9]
    Suffix
    [37-38][39-41] ФАРМАКОЭКОНОМИКА. Современная фармакоэкономика и фармакоэпидемиология. 2018; Том 11, No 3 www.pharmacoeconomics.ru макоэкономических и других исследований, подтверждающих потребность и преимущество терапии рТч, как это было выполнено для других рекомбинантных терапевтиков, вызывает у инвестора определенный уровень неуверенности в выгодной реализации проекта.

8
Iannucci N. B., Albanesi G. J., Marani M. M., Fernández H.M. Isolation of Trypsin from Bovine Pancreas Using Immobilized Benzamidine and Peptide CTPR Ligands in expanded Beds. Separat. Sci. Techn. 2005; 40: 3277-3287. DOI: 10.1080/01496390500423631.
Total in-text references: 2
  1. In-text reference with the coordinate start=6880
    Prefix
    Трипсины млекопитающих гомологичны по структуре и проявляют одинаковый механизм ферментативной реакции [2,4]. Трипсины животных экстрагируют из их желез и последовательно очищают методами, использующими особенности физико-химических свойств этого протеина
    Exact
    [5-9]
    Suffix
    . Поджелудочная железа (ПЖ) животных производит большое количество трипсина, который у млекопитающих транслируется как неактивный профермент трипсиноген. Он транспортируется в кишечник, где активируется мембранно-связанной протеазой (энтеропептидазой) с формированием активного фермента [10].

  2. In-text reference with the coordinate start=27544
    Prefix
    Высокозатратный фолдинг трипсиногена ПреимуществаВыделяют и очищают натуральный, биологически активный трипсин Не требуется фолдинг полипептида in vitro. Вырабатывается рекомбинантный трипсин Высокая экспрессия и продукция белка, идентичного трипсину человека Ссылки
    Exact
    [5-9]
    Suffix
    [37-38][39-41] ФАРМАКОЭКОНОМИКА. Современная фармакоэкономика и фармакоэпидемиология. 2018; Том 11, No 3 www.pharmacoeconomics.ru макоэкономических и других исследований, подтверждающих потребность и преимущество терапии рТч, как это было выполнено для других рекомбинантных терапевтиков, вызывает у инвестора определенный уровень неуверенности в выгодной реализации проекта.

9
Goudarzi B. Gh., Talebi M., Bagherian R., Haji Hosseini R. A simple, fast and commercial method for trypsin purification from bovine pancreas. Vet. Res. Biol. Prod. 2011; 24 (1-90): 33-39.
Total in-text references: 2
  1. In-text reference with the coordinate start=6880
    Prefix
    Трипсины млекопитающих гомологичны по структуре и проявляют одинаковый механизм ферментативной реакции [2,4]. Трипсины животных экстрагируют из их желез и последовательно очищают методами, использующими особенности физико-химических свойств этого протеина
    Exact
    [5-9]
    Suffix
    . Поджелудочная железа (ПЖ) животных производит большое количество трипсина, который у млекопитающих транслируется как неактивный профермент трипсиноген. Он транспортируется в кишечник, где активируется мембранно-связанной протеазой (энтеропептидазой) с формированием активного фермента [10].

  2. In-text reference with the coordinate start=27544
    Prefix
    Высокозатратный фолдинг трипсиногена ПреимуществаВыделяют и очищают натуральный, биологически активный трипсин Не требуется фолдинг полипептида in vitro. Вырабатывается рекомбинантный трипсин Высокая экспрессия и продукция белка, идентичного трипсину человека Ссылки
    Exact
    [5-9]
    Suffix
    [37-38][39-41] ФАРМАКОЭКОНОМИКА. Современная фармакоэкономика и фармакоэпидемиология. 2018; Том 11, No 3 www.pharmacoeconomics.ru макоэкономических и других исследований, подтверждающих потребность и преимущество терапии рТч, как это было выполнено для других рекомбинантных терапевтиков, вызывает у инвестора определенный уровень неуверенности в выгодной реализации проекта.

10
Buettner K., Kreisig T., Sträter N., Zuchner T. Protein surface charge of trypsinogen changes its activation pattern. BMC Biotechnology. 2014; 14 (960): 1-11. DOI: 10.1186/s12896-014-0109-5. roche/ RTRYPRO?lang=de®ion=De RTRYP-RO Roche. Accessed: 09.07.2018. 28. Trypsin recombinant Pig. [electronic resource]. URL: https:// www.mybiosource.com/prods/Recombinant-Protein/Trypsin/ RYP/ datasheet.php?products_id=9422455. Accessed: 09.07.2018. 29. Trypsin Powder, Porcine 1:250. [electronic resource]. URL: https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/85450c?lang= de®ion= De. Accessed: 09.07.2018. 30. Recombinant Human Trypsin [electronic resource]. URL: https://www.made-in-china.com/showroom/yaxinbio/productdetailrqpQzZOjMCWe/China-Recombinant-Human-Trypsin.html. Accessed: 08.07.20
Total in-text references: 3
  1. In-text reference with the coordinate start=7169
    Prefix
    Поджелудочная железа (ПЖ) животных производит большое количество трипсина, который у млекопитающих транслируется как неактивный профермент трипсиноген. Он транспортируется в кишечник, где активируется мембранно-связанной протеазой (энтеропептидазой) с формированием активного фермента
    Exact
    [10]
    Suffix
    . Образованный трипсин обладает высокой каталитической активностью и способен активировать как сам трипсиноген, так и другие зимогены [10-12]. Трипсин играет ключевую роль не только в пищеварительном процессе, он также незаменим в ряде важных биохимических реакций организма.

  2. In-text reference with the coordinate start=7307
    Prefix
    Он транспортируется в кишечник, где активируется мембранно-связанной протеазой (энтеропептидазой) с формированием активного фермента [10]. Образованный трипсин обладает высокой каталитической активностью и способен активировать как сам трипсиноген, так и другие зимогены
    Exact
    [10-12]
    Suffix
    . Трипсин играет ключевую роль не только в пищеварительном процессе, он также незаменим в ряде важных биохимических реакций организма. У млекопитающих обнаружено несколько изоформ этого энзима [13-15].

  3. In-text reference with the coordinate start=17247
    Prefix
    Современная фармакоэкономика и фармакоэпидемиология. 2018; Том 11, No 3 www.pharmacoeconomics.ru ный выход высокоочищенного рекомбинантного трипсина в тысячи раз ниже, чем других биофармацевтиков [22]. Основной причиной таких потерь целевого белка является ферментативный аутокатализ трипсина по указанным аминокислотным остаткам
    Exact
    [10,12]
    Suffix
    . Поэтому блокирование или значительное замедление аутокаталитической реакции эндопептидазы необходимо для предотвращения губительных потерь целевого продукта при производстве и хранении [10,36].

11
Hegyi e., Sahin-Toth M. Genetic Risk in Chronic Pancreatitis: The Trypsin-Dependent Pathway. Dig. Dis. Sci. 2017; 62: 1692-1701. DOI: 10.1007/s10620-017-4601-3.
Total in-text references: 3
  1. In-text reference with the coordinate start=7307
    Prefix
    Он транспортируется в кишечник, где активируется мембранно-связанной протеазой (энтеропептидазой) с формированием активного фермента [10]. Образованный трипсин обладает высокой каталитической активностью и способен активировать как сам трипсиноген, так и другие зимогены
    Exact
    [10-12]
    Suffix
    . Трипсин играет ключевую роль не только в пищеварительном процессе, он также незаменим в ряде важных биохимических реакций организма. У млекопитающих обнаружено несколько изоформ этого энзима [13-15].

  2. In-text reference with the coordinate start=7582
    Prefix
    Трипсин играет ключевую роль не только в пищеварительном процессе, он также незаменим в ряде важных биохимических реакций организма. У млекопитающих обнаружено несколько изоформ этого энзима [13-15]. В организме человека превалирует производство трипсина 1 бета (Trp1)
    Exact
    [11]
    Suffix
    . Синтез его предшественника, катионического трипсиногена, кодируется геном PRSS1 (или TRP1), который находится в хромосоме 7 генома человека [1]. Чаще всего, особенно для медицинских исследований, рекомбинантный трипсин человека (рТч) экспрессируется как Trp1.

  3. In-text reference with the coordinate start=21926
    Prefix
    ПЖ – поджелудочная железа; ФАС – фармацевтически активная субстанция. Note. ПЖ – pancreas; ФАС – pharmaceutically active substance. са. Следует отметить, что угроза аутогидролиза сохраняется для трипсина всех животных
    Exact
    [11-12]
    Suffix
    и для описанных технологий производства протеазы. Однако аутокаталитическая деградация трипсиногена в 10 раз ниже, чем активного трипсина, что объясняет большие потери целевого продукта из животного сырья [6-7].

12
Németh B. C., Wartmann T., Halangk W., Sahin-Tóth M. Autoactivation of Mouse Trypsinogens Is Regulated by Chymotrypsin C via Cleavage of the Autolysis Loop. J. Biol. Chem. 2013; 288 (33): 24049-62. DOI: 10.1074/jbc.M113.478800.
Total in-text references: 3
  1. In-text reference with the coordinate start=7307
    Prefix
    Он транспортируется в кишечник, где активируется мембранно-связанной протеазой (энтеропептидазой) с формированием активного фермента [10]. Образованный трипсин обладает высокой каталитической активностью и способен активировать как сам трипсиноген, так и другие зимогены
    Exact
    [10-12]
    Suffix
    . Трипсин играет ключевую роль не только в пищеварительном процессе, он также незаменим в ряде важных биохимических реакций организма. У млекопитающих обнаружено несколько изоформ этого энзима [13-15].

  2. In-text reference with the coordinate start=17247
    Prefix
    Современная фармакоэкономика и фармакоэпидемиология. 2018; Том 11, No 3 www.pharmacoeconomics.ru ный выход высокоочищенного рекомбинантного трипсина в тысячи раз ниже, чем других биофармацевтиков [22]. Основной причиной таких потерь целевого белка является ферментативный аутокатализ трипсина по указанным аминокислотным остаткам
    Exact
    [10,12]
    Suffix
    . Поэтому блокирование или значительное замедление аутокаталитической реакции эндопептидазы необходимо для предотвращения губительных потерь целевого продукта при производстве и хранении [10,36].

  3. In-text reference with the coordinate start=21926
    Prefix
    ПЖ – поджелудочная железа; ФАС – фармацевтически активная субстанция. Note. ПЖ – pancreas; ФАС – pharmaceutically active substance. са. Следует отметить, что угроза аутогидролиза сохраняется для трипсина всех животных
    Exact
    [11-12]
    Suffix
    и для описанных технологий производства протеазы. Однако аутокаталитическая деградация трипсиногена в 10 раз ниже, чем активного трипсина, что объясняет большие потери целевого продукта из животного сырья [6-7].

13
Grishina Z., Ostrowska e., Halangk W., Sahin-Toth M., Reiser G. Activity of recombinant trypsin isoforms on human proteinaseactivated receptors (PAR): mesotrypsin cannot activate epithelial PAR1, -2, but weakly activates brain PAR-1. British J. Pharmacology. 2005;
Total in-text references: 2
  1. In-text reference with the coordinate start=7504
    Prefix
    Образованный трипсин обладает высокой каталитической активностью и способен активировать как сам трипсиноген, так и другие зимогены [10-12]. Трипсин играет ключевую роль не только в пищеварительном процессе, он также незаменим в ряде важных биохимических реакций организма. У млекопитающих обнаружено несколько изоформ этого энзима
    Exact
    [13-15]
    Suffix
    . В организме человека превалирует производство трипсина 1 бета (Trp1) [11]. Синтез его предшественника, катионического трипсиногена, кодируется геном PRSS1 (или TRP1), который находится в хромосоме 7 генома человека [1].

  2. In-text reference with the coordinate start=31969
    Prefix
    Сравнивалась эффективность энзимных препаратов при терапии муковисцидоза [21]. Было показано, что рТч и трипсин КРС проявляют одинаковое сродство к рецепторам клеток человека и близкую скорость их активации
    Exact
    [13]
    Suffix
    . Фармакоэкономический анализ трипсиновых препаратов, включая инвазивный рТч, является задачей для заинтересованных организаций. Отсутствие фарТаблица 4. SWOT-анализ проекта производства рТч.  Table 4.

14
990-999. 14. Yousef G. M., elliott M. B., Kopolovic A. D., Serry e., Diamandis e. P. Sequence and evolutionary analysis of the human trypsin subfamily of serine peptidases. Bioch. Bioph. Acta. 2004; 1698: 77-86.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=7504
    Prefix
    Образованный трипсин обладает высокой каталитической активностью и способен активировать как сам трипсиноген, так и другие зимогены [10-12]. Трипсин играет ключевую роль не только в пищеварительном процессе, он также незаменим в ряде важных биохимических реакций организма. У млекопитающих обнаружено несколько изоформ этого энзима
    Exact
    [13-15]
    Suffix
    . В организме человека превалирует производство трипсина 1 бета (Trp1) [11]. Синтез его предшественника, катионического трипсиногена, кодируется геном PRSS1 (или TRP1), который находится в хромосоме 7 генома человека [1].

15
Németh B. C., Sahin-Tóth M. Human cationic trypsinogen (PRSS1) variants and chronic pancreatitis. Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Phyiol. 2014; 306: G466-G473. DOI: 10.1152/ajpgi.00419.2013.
Total in-text references: 2
  1. In-text reference with the coordinate start=7504
    Prefix
    Образованный трипсин обладает высокой каталитической активностью и способен активировать как сам трипсиноген, так и другие зимогены [10-12]. Трипсин играет ключевую роль не только в пищеварительном процессе, он также незаменим в ряде важных биохимических реакций организма. У млекопитающих обнаружено несколько изоформ этого энзима
    Exact
    [13-15]
    Suffix
    . В организме человека превалирует производство трипсина 1 бета (Trp1) [11]. Синтез его предшественника, катионического трипсиногена, кодируется геном PRSS1 (или TRP1), который находится в хромосоме 7 генома человека [1].

  2. In-text reference with the coordinate start=8041
    Prefix
    Протеолитик Trp1 – наиболее изученный белок из субсемейства трипсинов в генетике, молекулярной биологии, биохимии и физио- логии, о нем получено больше клинических данных, чем для других изоформ
    Exact
    [15-16]
    Suffix
    . Трипсин в качестве лекарства применяется с конца 30-х гг. прошлого столетия не только per os для улучшения пищеварения, но внутримышечно, внутривенно, а также в виде ингаляций, орошений и аппликаций [17-18].

16
Hu C., Wen L., Deng L., Zhang C., Lugea A., Su H. Y., Waldron R. T., Pandol S. J., Xia Q. The Differential Role of Human Cationic Trypsinogen (PRSS1) p.R122H Mutation in Hereditary and Nonhereditary Chronic Pancreatitis: A Systematic Review and MetaAnalysis. Gastroenterol. Res. Pract. 2017; ID 9505460: 1-7. DOI: 10.1155/2017/9505460.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=8041
    Prefix
    Протеолитик Trp1 – наиболее изученный белок из субсемейства трипсинов в генетике, молекулярной биологии, биохимии и физио- логии, о нем получено больше клинических данных, чем для других изоформ
    Exact
    [15-16]
    Suffix
    . Трипсин в качестве лекарства применяется с конца 30-х гг. прошлого столетия не только per os для улучшения пищеварения, но внутримышечно, внутривенно, а также в виде ингаляций, орошений и аппликаций [17-18].

17
Roxas M. The Role of enzyme Supplementation in Digestive Disorders. Altern. Med. Rev. 2008; 13 (4): 307-314.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=8244
    Prefix
    Трипсин в качестве лекарства применяется с конца 30-х гг. прошлого столетия не только per os для улучшения пищеварения, но внутримышечно, внутривенно, а также в виде ингаляций, орошений и аппликаций
    Exact
    [17-18]
    Suffix
    . Его назначают как тромболитический, противовоспалительный, болеутоляющий и противоотечный препарат при лечении тромбозов, ран и ожогов (табл. 1). Эта эндопептидаза разрушает некоторые вирусы и бактериальные токсины, а также избирательно расщепляет некротированные ткани [19].

18
Ianiro G., Pecere S., Giorgio V., Gasbarrini A. and Cammarota G. Digestive enzyme Supplementation in Gastrointestinal Diseases. Current Drug Metabolism. 2016; 17 (2): 187-193.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=8244
    Prefix
    Трипсин в качестве лекарства применяется с конца 30-х гг. прошлого столетия не только per os для улучшения пищеварения, но внутримышечно, внутривенно, а также в виде ингаляций, орошений и аппликаций
    Exact
    [17-18]
    Suffix
    . Его назначают как тромболитический, противовоспалительный, болеутоляющий и противоотечный препарат при лечении тромбозов, ран и ожогов (табл. 1). Эта эндопептидаза разрушает некоторые вирусы и бактериальные токсины, а также избирательно расщепляет некротированные ткани [19].

19
Shah D., Mital K. The Role of Trypsin: Chymotrypsin in Tissue Repair. Adv. Ther. 2018; 35 (1): 31-42.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=8520
    Prefix
    Его назначают как тромболитический, противовоспалительный, болеутоляющий и противоотечный препарат при лечении тромбозов, ран и ожогов (табл. 1). Эта эндопептидаза разрушает некоторые вирусы и бактериальные токсины, а также избирательно расщепляет некротированные ткани
    Exact
    [19]
    Suffix
    . Трипсин используют в терапии генетических болезней, вызванных дефицитом или отсутствием протеаз, таких как муковисцидоз, наследственный панкреатит [20-21]. К сожалению, доступной информации о его применении недостаточно, чтобы прогнозировать рынок терапевтического рТч.

20
Konstan M. W., Frank J., Accurso F. J., Nasr S. Z., Ahrens R. C., Graff G. R. efficacy and safety of a unique enteric-coated bicarbonatebuffered pancreatic enzyme replacement therapy in children and adults with cystic fibrosis. Clin. Invest. 2013; 3 (8): 723-729.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=8673
    Prefix
    Эта эндопептидаза разрушает некоторые вирусы и бактериальные токсины, а также избирательно расщепляет некротированные ткани [19]. Трипсин используют в терапии генетических болезней, вызванных дефицитом или отсутствием протеаз, таких как муковисцидоз, наследственный панкреатит
    Exact
    [20-21]
    Suffix
    . К сожалению, доступной информации о его применении недостаточно, чтобы прогнозировать рынок терапевтического рТч. Трипсин используется во многочисленных биотехнологических процессах, таких как производство рекомбинантных белков, в т. ч. фармацевтических.

21
Taylor C. J., Thieroff-ekerdt R., Shiff S., Magnus L., Fleming R., Gommoll C. Comparison of two pancreatic enzyme products for exocrine insufficiency in patients with cystic fibrosis. J. Cystic Fibrosis. 2016; 15: 675-680.
Total in-text references: 2
  1. In-text reference with the coordinate start=8673
    Prefix
    Эта эндопептидаза разрушает некоторые вирусы и бактериальные токсины, а также избирательно расщепляет некротированные ткани [19]. Трипсин используют в терапии генетических болезней, вызванных дефицитом или отсутствием протеаз, таких как муковисцидоз, наследственный панкреатит
    Exact
    [20-21]
    Suffix
    . К сожалению, доступной информации о его применении недостаточно, чтобы прогнозировать рынок терапевтического рТч. Трипсин используется во многочисленных биотехнологических процессах, таких как производство рекомбинантных белков, в т. ч. фармацевтических.

  2. In-text reference with the coordinate start=31838
    Prefix
    Производство значительного сегмента рекомбинантных биофармацевтиков требует длительный горизонт инвестиций, так как необходимы: крупномасштабное финансирование от начала проекта; большие производственные расходы и высококвалифицированные специалисты [22,42]. Сравнивалась эффективность энзимных препаратов при терапии муковисцидоза
    Exact
    [21]
    Suffix
    . Было показано, что рТч и трипсин КРС проявляют одинаковое сродство к рецепторам клеток человека и близкую скорость их активации [13]. Фармакоэкономический анализ трипсиновых препаратов, включая инвазивный рТч, является задачей для заинтересованных организаций.

22
Petrides D. Bioprocess Design and economics. Bioseparations Science and engineering 2nd edition (ed by: Harrison R. G., Todd P. W., Rudge S. R., Petrides D. P.). Oxford University Press. 2015; 11.1-83.
Total in-text references: 3
  1. In-text reference with the coordinate start=9082
    Prefix
    Трипсин используется во многочисленных биотехнологических процессах, таких как производство рекомбинантных белков, в т. ч. фармацевтических. Так, в 2015 г. для производства рекомбинантного инсулина требовалось более 50 кг высокоочищенного, в соответствии с требованиями ЕМА или FDA, трипсина
    Exact
    [22]
    Suffix
    . Такого же качества протеаза требуется в большом количестве для трипсинолиза в производстве других терапевтических белков и вакцин. Этот энзим используют в анализах разного типа, например, для подтверждения первичной структуры белков, так как он высокоспецефично расщепляет пептиды после аргинина или лизина [2,23].

  2. In-text reference with the coordinate start=17114
    Prefix
    железы Ферментные растворы, гели или мази Терапия кожных тканей Гнойные раны и ожоги Некрэктомия и диабетическая стопа Флегмоны, абсцессы, маститы Язвы, пролежни, склеродермии ФАРМАКОЭКОНОМИКА. Современная фармакоэкономика и фармакоэпидемиология. 2018; Том 11, No 3 www.pharmacoeconomics.ru ный выход высокоочищенного рекомбинантного трипсина в тысячи раз ниже, чем других биофармацевтиков
    Exact
    [22]
    Suffix
    . Основной причиной таких потерь целевого белка является ферментативный аутокатализ трипсина по указанным аминокислотным остаткам [10,12]. Поэтому блокирование или значительное замедление аутокаталитической реакции эндопептидазы необходимо для предотвращения губительных потерь целевого продукта при производстве и хранении [10,36].

  3. In-text reference with the coordinate start=19477
    Prefix
    аминокислот, по которым фермент способен аутогидролизоваться, и скорость образования может быть для разных пептидных фрагментов очень быстрой, быстрой или медленной в зависимости от структурных особенностей белка [23]. Обычно в производстве терапевтических белков наиболее затратным является down-stream-процесс и его оптимизация позволяет в значительной мере снизить производственные затраты
    Exact
    [22]
    Suffix
    . Цены на высокоочищенный трипсин в несколько тысяч раз выше [29-35], чем на первичный (см. рис. 1), что свидетельствует о гигантских потерях целевого белка в down-stream-процессе. КонечРисунок 1.

23
Pan Y., Cheng K., Mao J., Liu F., Liu J., Ye M., Zou H. Quantitative proteomics reveals the kinetics of trypsin-catalyzed protein digestion. Anal. Bioanal. Chem. 2014; 406: 6247-6256.
Total in-text references: 2
  1. In-text reference with the coordinate start=9393
    Prefix
    Такого же качества протеаза требуется в большом количестве для трипсинолиза в производстве других терапевтических белков и вакцин. Этот энзим используют в анализах разного типа, например, для подтверждения первичной структуры белков, так как он высокоспецефично расщепляет пептиды после аргинина или лизина
    Exact
    [2,23]
    Suffix
    . Почти весь коммерческий трипсин выделяют из ПЖ свиней или крупного рогатого скота (КРС), хотя в последнее время растет количество и качество промышленных протеаз, вырабатываемых из растений или микроорганизмов.

  2. In-text reference with the coordinate start=19298
    Prefix
    В катионическом трипсиногене человека содержится 20 этих диаминокарбоновых аминокислот, по которым фермент способен аутогидролизоваться, и скорость образования может быть для разных пептидных фрагментов очень быстрой, быстрой или медленной в зависимости от структурных особенностей белка
    Exact
    [23]
    Suffix
    . Обычно в производстве терапевтических белков наиболее затратным является down-stream-процесс и его оптимизация позволяет в значительной мере снизить производственные затраты [22]. Цены на высокоочищенный трипсин в несколько тысяч раз выше [29-35], чем на первичный (см. рис. 1), что свидетельствует о гигантских потерях целевого белка в down-stream-процессе.

24
Sarrouch B., Santos T. M., Miyoshi A., Dias R., Azevedo V. UpTo-Date Insight on Industrial enzymes Applications and Global Market. J. Bioproces. Biotechniq. 2012; (S4:002): 1-10.
Total in-text references: 3
  1. In-text reference with the coordinate start=13718
    Prefix
    Разброс коммерческих цен на очищенный трипсин [30-35] может достигать 3-4 порядков (рис. 1). имеют радикальное значение. Ведущие производители промышленных ферментов в США и ЕС: Novozymes (Дания), Danisco (Дания), Genencor (США), DSM (Нидерланды) и BASF (Германия)
    Exact
    [24]
    Suffix
    . Эти же фирмы производят трипсин, в т. ч. для терапии разных заболеваний (см. табл. 1). В медицинской практике разрешен трипсин кристаллический (как для местного, так и для парентерального применения) и трипсин аморфный (только для местного применения).

  2. In-text reference with the coordinate start=24202
    Prefix
    Такое количество цистеинов затрудняет реакцию правильной укладки молекулы in vitro, а также ведет к образованию большого числа структурных изоформ. Требуется инновационный метод для повышения эффективности фолдинга трипсиногена, образующего тельца вклютрадиционными методами
    Exact
    [24]
    Suffix
    , однако в технологии его производства имеется несколько проблемных фаз (табл. 2). Для биосинтеза рекомбинантного трипсина в промышленных масштабах применяются преимущественно две системы экспрессии.

  3. In-text reference with the coordinate start=25498
    Prefix
    Поэтому бактериальная экспрессионная система экономически выгодна для многих терапевтических биофармацевтиков и также для производства рТч (см. табл. 3) [22,39-41]. Общая технологическая схема изготовления рекомбинантных ферментов экспрессией в микроорганизмах приведена в работе
    Exact
    [24]
    Suffix
    . В таблице 2 сравниваются три способа производства трипсина, их up-steam- и down-steam-процессы. Технология производства трипсина, экспрессированного в бактериях, имеет больше down-steam-фаз (см. табл. 2.

25
Guidance for Industry exocrine Pancreatic Insufficiency Drug Products – Submitting NDAs U. S. Department of Health and Human Services Food and Drug Administration Center for Drug evaluation and Research (CDeR) April 2006 Clinical/Medical.
Total in-text references: 2
  1. In-text reference with the coordinate start=12195
    Prefix
    Препараты, содержащие трипсин, применяются более 80 лет. Чтобы защитить пациентов США от протеазы низкого качества, FDA приняла решение в 2006 г. о регистрации лекарственных препаратов из ПЖ как новых
    Exact
    [25]
    Suffix
    . Развитие биофармацевтических технологий способствует тому, что в скором времени не только трипсин, но и другие новые терапевтические протеазы будут генно-инженерными. Основные производители и рынок рекомбинантного трипсина Крупные производители рекомбинантных энзимов – Novozymes, Thermo Fisher, Roche, BBI Group, Merck, Biological Industries, Shanghai Yaxin Biotechnology CoLtd и др. [26] –

  2. In-text reference with the coordinate start=17760
    Prefix
    Трипсин, как и другие рекомбинантные полипептиды, синтезируют в гетерологичных клетках, затем его выделяют и очищают Исходя из объемов продаж рекомбинантного трипсина и данных о решениях FDA и ЕМА
    Exact
    [25]
    Suffix
    , становится ясно, что мировой рынок лекарственного рТч практически не существует. Поэтому еще рано судить об объемах его продаж и прогнозировать непосредственно динамику его потребления. Можно примерно оценить потребность для пула зарегистрированных больных с тромбофлебитом или генетическими нарушениями.

26
Global Recombinant Trypsin Solution Market Report 2018 by Manufacturer, Region, Type and Application, Forecast to 2023. [electronic resource]. URL: https://www.marketresearchstore.com/ report/global-recombinant-trypsin-solution-market-report-2018by-250199. Accessed: 09.07.2018.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=12582
    Prefix
    Основные производители и рынок рекомбинантного трипсина Крупные производители рекомбинантных энзимов – Novozymes, Thermo Fisher, Roche, BBI Group, Merck, Biological Industries, Shanghai Yaxin Biotechnology CoLtd и др.
    Exact
    [26]
    Suffix
    – производят коммерческие генно-инженерные трипсины свиньи, человека, КРС и других животных в зависимости от интересов заказчика, но, как было уже указано, для медицины и процессинга биофармацевтиков наиболее полезен рТч.