The 22 reference contexts in paper A. Chernov N., А. Чернов Н. (2017) “COОТНОШЕНИЕ РЕЦЕПТОРОВ TrkA И р75 НА КЛЕТКАХ НЕЙРОЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ ОПУХОЛЕЙ – НОВАЯ МИШЕНЬ ВОЗДЕЙСТВИЯ КОМБИНАЦИЙ ФАКТОРА РОСТА НЕРВОВ С ЦИСПЛАТИНОМ ИЛИ ТЕМОЗОЛОМИДОМ // THE RATIO OF TrkA AND p75 RECEPTORS ON THE CELL NEUROEPITHELIAL TUMORS – A NEW TARGET EFFECT OF NERVE GROWTH FACTOR WITH CISPLATIN AND TEMOZOLOMIDE AND THE COMBINATIONS” / spz:neicon:ogsh:y:2016:i:4:p:53-61

  1. Start
    3977
    Prefix
    Key words: nerve growth factor, combination of nerve growth factor with cisplatin or temozolomide, TrkA, p75 receptors, the ratio receptors, index of cytotoxicity, correlations Введение В настоящее время злокачественные новообразования по показателям распространенности, инвалидизации и смертности вышли на 2-е место вслед за патологией сердечно-сосудистой системы
    Exact
    [1]
    Suffix
    . У детей и подростков интракраниальные неоплазии по степени распространенности занимают 2-е место после лейкозов, представляя собой гетерогенную по гистологическим типам группу. К наиболее злокачественным опухолям относятся медуллобластомы, нейробластомы, глиобластомы и анапластические астроцитомы [2, 3].
    (check this in PDF content)

  2. Start
    4275
    Prefix
    У детей и подростков интракраниальные неоплазии по степени распространенности занимают 2-е место после лейкозов, представляя собой гетерогенную по гистологическим типам группу. К наиболее злокачественным опухолям относятся медуллобластомы, нейробластомы, глиобластомы и анапластические астроцитомы
    Exact
    [2, 3]
    Suffix
    . Прогноз для этих пациентов крайне неблагоприятный. Общая 5-летняя выживаемость составляет менее 50– 60 % после хирургического вмешательства, дополняемого химио- и лучевой терапией [4–6]. Общеизвестным фактом являются тяжелые токсические последствия химиотерапии на организм пациента.
    (check this in PDF content)

  3. Start
    4460
    Prefix
    К наиболее злокачественным опухолям относятся медуллобластомы, нейробластомы, глиобластомы и анапластические астроцитомы [2, 3]. Прогноз для этих пациентов крайне неблагоприятный. Общая 5-летняя выживаемость составляет менее 50– 60 % после хирургического вмешательства, дополняемого химио- и лучевой терапией
    Exact
    [4–6]
    Suffix
    . Общеизвестным фактом являются тяжелые токсические последствия химиотерапии на организм пациента. Это делает актуальным поиск новых подходов и стратегий лечения опухолей мозга: антиангиогенная, сонофотодинамическая и таргетная терапия [7, 8].
    (check this in PDF content)

  4. Start
    4700
    Prefix
    Общеизвестным фактом являются тяжелые токсические последствия химиотерапии на организм пациента. Это делает актуальным поиск новых подходов и стратегий лечения опухолей мозга: антиангиогенная, сонофотодинамическая и таргетная терапия
    Exact
    [7, 8]
    Suffix
    . Последняя подразумевает исследование новых эффективных соединений, а также мишеней их воздействия на опухолевые клетки [7]. Среди таких соединений перспективным выглядит класс эндогенных биорегуляторов полифункциональной природы – ростовых факторов, которых к настоящему времени открыто более 80 [9].
    (check this in PDF content)

  5. Start
    4826
    Prefix
    Это делает актуальным поиск новых подходов и стратегий лечения опухолей мозга: антиангиогенная, сонофотодинамическая и таргетная терапия [7, 8]. Последняя подразумевает исследование новых эффективных соединений, а также мишеней их воздействия на опухолевые клетки
    Exact
    [7]
    Suffix
    . Среди таких соединений перспективным выглядит класс эндогенных биорегуляторов полифункциональной природы – ростовых факторов, которых к настоящему времени открыто более 80 [9]. Наиболее хорошо изучен фактор роста нервов (ФРН), способствующий выживаемости и развитию клеток центральной нервной системы, одновременно вызывающий ингибирование ангиогенеза, инвазии опухоли [10, 11].
    (check this in PDF content)

  6. Start
    5003
    Prefix
    Последняя подразумевает исследование новых эффективных соединений, а также мишеней их воздействия на опухолевые клетки [7]. Среди таких соединений перспективным выглядит класс эндогенных биорегуляторов полифункциональной природы – ростовых факторов, которых к настоящему времени открыто более 80
    Exact
    [9]
    Suffix
    . Наиболее хорошо изучен фактор роста нервов (ФРН), способствующий выживаемости и развитию клеток центральной нервной системы, одновременно вызывающий ингибирование ангиогенеза, инвазии опухоли [10, 11].
    (check this in PDF content)

  7. Start
    5198
    Prefix
    Среди таких соединений перспективным выглядит класс эндогенных биорегуляторов полифункциональной природы – ростовых факторов, которых к настоящему времени открыто более 80 [9]. Наиболее хорошо изучен фактор роста нервов (ФРН), способствующий выживаемости и развитию клеток центральной нервной системы, одновременно вызывающий ингибирование ангиогенеза, инвазии опухоли
    Exact
    [10, 11]
    Suffix
    . Обнаружено, что ФРН обладает цитотоксическим противоопухолевым эффектом на культурах клеток интракраниальных неоплазий, который может усиливаться при комбинированном его применении с химиопрепаратами [9].
    (check this in PDF content)

  8. Start
    5407
    Prefix
    Обнаружено, что ФРН обладает цитотоксическим противоопухолевым эффектом на культурах клеток интракраниальных неоплазий, который может усиливаться при комбинированном его применении с химиопрепаратами
    Exact
    [9]
    Suffix
    . Поскольку химиотерапия опухолей мозга в клинике проводится с применением темозоломида и препаратов платиновой группы (цисплатина, карбоплатина и т. д.) [1, 4, 13, 14], то для сочетания с ФРН автором были выбраны указанные химиопрепараты.
    (check this in PDF content)

  9. Start
    5561
    Prefix
    Обнаружено, что ФРН обладает цитотоксическим противоопухолевым эффектом на культурах клеток интракраниальных неоплазий, который может усиливаться при комбинированном его применении с химиопрепаратами [9]. Поскольку химиотерапия опухолей мозга в клинике проводится с применением темозоломида и препаратов платиновой группы (цисплатина, карбоплатина и т. д.)
    Exact
    [1, 4, 13, 14]
    Suffix
    , то для сочетания с ФРН автором были выбраны указанные химиопрепараты. Доказано, что ФРН реализует свои эффекты на клетках через связывание с рецепторами – высокоаффинным тирозинкиназным TrkA и низкоаффинным, содержащим домен смерти р75 [11, 15, 16].
    (check this in PDF content)

  10. Start
    5808
    Prefix
    химиотерапия опухолей мозга в клинике проводится с применением темозоломида и препаратов платиновой группы (цисплатина, карбоплатина и т. д.) [1, 4, 13, 14], то для сочетания с ФРН автором были выбраны указанные химиопрепараты. Доказано, что ФРН реализует свои эффекты на клетках через связывание с рецепторами – высокоаффинным тирозинкиназным TrkA и низкоаффинным, содержащим домен смерти р75
    Exact
    [11, 15, 16]
    Suffix
    . Экспрессия первого из этих рецепторов на нейробластомах является маркером благоприятного прогноза у пациентов с данной патологией, способствуя спонтанной регрессии опухоли в менее злокачественную ганглионеврому [11, 16–19].
    (check this in PDF content)

  11. Start
    6031
    Prefix
    Экспрессия первого из этих рецепторов на нейробластомах является маркером благоприятного прогноза у пациентов с данной патологией, способствуя спонтанной регрессии опухоли в менее злокачественную ганглионеврому
    Exact
    [11, 16–19]
    Suffix
    . Остается неизученным вопрос, могут ли рецепторы TrkA и р75 на клетках анапластической астроцитомы, глиобластомы и медуллобластомы являться мишенями воздействия комбинаций ФРН с цисплатином или темозоломидом.
    (check this in PDF content)

  12. Start
    7965
    Prefix
    , Россия) и переносили в количестве 500 тыс. клеток / мл в чашки Петри (d = 35 мм, Nunc, Дания) с 1 мл среды «Игла» в модификации Дульбекко (DМЕМ, Sigma-Aldrich, США), содержащей 10 % эмбриональной телячьей сыворотки. Клетки опухолей культивировали на протяжении 2 сут в стандартных условиях СО2-инкубатора (Heraccell, США) при температуре 37 °С, 95 % влажности и 5 % парциальном давлении СО2
    Exact
    [20, 21]
    Suffix
    . Индекс цитотоксичности реагентов. На культурах опухолей тестировали цисплатин (Veropharm, Россия) в дозе 3,3 × 10–6 M (1 мкг / мл), темозоломид (Orion Pharma, Финляндия) в дозе 10,3 × 10–6 M (2 мкг / мл), 7S-форму рекомбинантного ФРН человека (SigmaAldrich, США) в дозе 8,8 × 10–9 M (0,1 мкг / мл) и комбинации ФРН с 10-кратно сниженной концентрацией цисплатина или темозоломида (цисплатин – 3
    (check this in PDF content)

  13. Start
    8772
    Prefix
    Внесение реагентов проводили на стадии логарифмического роста культур, достижение которой оценивали визуально по резко возросшему количеству митозов и численности клеток с помощью цифровой фотокамеры Altra20, снабженной программным обеспечением Analysis getlT (Olympus, Япония), на инвертированном микроскопе НУ-2Е (Carl Zeiss, Германия) при увеличении × 312
    Exact
    [12]
    Suffix
    . Оценку индекса цитотоксичности (ИЦ) тестируемых соединений проводили спустя 1 сут после экспозиции опухолевых культур с реагентами. Для этого оценивали чувствительность образцов неоплазий к реагентам на основе изучения гибели клеток, визуализируемой по поглощению 0,2 % раствора трипанового синего (Alta Aesar, Германия) в камере Горяева.
    (check this in PDF content)

  14. Start
    9577
    Prefix
    Клетки пипетировали, вносили 1–2 капли 0,2 % раствора трипанового синего и переносили 20 мкл суспензии в камеру Горяева. Подсчитывали количество мертвых (окрашенных) и жизнеспособных (прозрачных) клеток в 15 больших квадратах по диагонали и определяли их соотношение
    Exact
    [20]
    Suffix
    . Полученный эффект – степень подавления роста опухолевых клеток химиопрепаратом [22] – был выражен ИЦ: N % = (1 – Опыт / Контроль) × 100, где N % – ИЦ препаратов; Опыт – выживаемость клеток при действии химиопрепаратов, ФРН и его комбинаций с химиопрепаратами; Контроль – выживаемость клеток в контроле [22].
    (check this in PDF content)

  15. Start
    9661
    Prefix
    Подсчитывали количество мертвых (окрашенных) и жизнеспособных (прозрачных) клеток в 15 больших квадратах по диагонали и определяли их соотношение [20]. Полученный эффект – степень подавления роста опухолевых клеток химиопрепаратом
    Exact
    [22]
    Suffix
    – был выражен ИЦ: N % = (1 – Опыт / Контроль) × 100, где N % – ИЦ препаратов; Опыт – выживаемость клеток при действии химиопрепаратов, ФРН и его комбинаций с химиопрепаратами; Контроль – выживаемость клеток в контроле [22].
    (check this in PDF content)

  16. Start
    9872
    Prefix
    Полученный эффект – степень подавления роста опухолевых клеток химиопрепаратом [22] – был выражен ИЦ: N % = (1 – Опыт / Контроль) × 100, где N % – ИЦ препаратов; Опыт – выживаемость клеток при действии химиопрепаратов, ФРН и его комбинаций с химиопрепаратами; Контроль – выживаемость клеток в контроле
    Exact
    [22]
    Suffix
    . Иммунофлуоресценция. Выявление рецепторов TrkA, p75 выполнено на первичных культурах, полученных от пациентов с анапластической астроцитомой, глиобластомой и медуллобластомой. В каждую чашку Петри по истечении 2 сут роста культур наносили ФРН либо его комбинацию с 10-кратно сниженными концентрациями цисплатина или темозоломида.
    (check this in PDF content)

  17. Start
    11004
    Prefix
    После 3-кратной промывки ФСБ культуры подвергали воздействию вторичных кроличьих FITCконъюгированных антител Anti-Rabit Ig-FITC (SigmaAldrich, США) в разведении 1:1000 и выдерживали в темноте на протяжении 2 ч при комнатной температуре
    Exact
    [23]
    Suffix
    . После инкубации посевы 3 раза отмывали от избытка реагентов и просматривали под флуоресцентным микроскопом Leitz MPV-2 (Германия) с цифровой камерой Leica DC350F (Германия) с возбуждающим 330–390 нм и эмиссионным 455–700 нм фильтрами L2, экспозицией 690 мс, усилением G1 при увеличении объектива × 16.
    (check this in PDF content)

  18. Start
    12260
    Prefix
    Результаты представляли как среднее арифметическое ± стандартная ошибка среднего для выборки объема n (M ± m). Для сравнения 2 групп с относительно большим объемом выборки (n > 50) по выраженности количественных признаков применяли однофакторный дисперсионный анализ (ANOVA one-way) и F-критерий (Фишера)
    Exact
    [24]
    Suffix
    . Предварительно каждую выборку проверяли на нормальность (рас пределение Гаусса) по критерию Колмогорова–Смирнова / Лиллифора и на однородность дисперсий по F-критерию. Вариабельность признаков оценивали по величине стандартного квадратического отклонения (σ).
    (check this in PDF content)

  19. Start
    12968
    Prefix
    Установление корреляционных зависимостей между 2 неродственными показателями в выборке, подчиняющейся нормальному распределению, осуществляли с использованием коэффициента ранговой корреляции Пирсона r
    Exact
    [24, 25]
    Suffix
    . Статистическую значимость коэффициентов корреляции в выборках, подчиняющихся нормальному распределению, оценивали по критерию Стьюдента t [25, 24]. Статистическую значимыми считали различия при уровне значимости p < 0,05.
    (check this in PDF content)

  20. Start
    13115
    Prefix
    Установление корреляционных зависимостей между 2 неродственными показателями в выборке, подчиняющейся нормальному распределению, осуществляли с использованием коэффициента ранговой корреляции Пирсона r [24, 25]. Статистическую значимость коэффициентов корреляции в выборках, подчиняющихся нормальному распределению, оценивали по критерию Стьюдента t
    Exact
    [25, 24]
    Suffix
    . Статистическую значимыми считали различия при уровне значимости p < 0,05. Для проведения описательной статистики и оценки статистической значимости различий между 2 группами использовали программу StatPlus 2005 пакета Statistica 6.0.
    (check this in PDF content)

  21. Start
    32898
    Prefix
    На гибель опухолевых клеток также влияют тип доминирующего рецептора, его статус, описываемый соотношением TrkA / p75 (сверхэкспрессия, ингибирование или одинаковое количество), возможно формирование структурных гетерокомплексов рецепторов TrkA–p75
    Exact
    [26]
    Suffix
    . На наличие последнего факта указывают коэффициенты корреляций между ИЦ реагентов и экспрессией TrkA-, p75-рецепторов одного знака и соответствующие им функциональные изменения экспрессии рецепторов [27–31].
    (check this in PDF content)

  22. Start
    33101
    Prefix
    На наличие последнего факта указывают коэффициенты корреляций между ИЦ реагентов и экспрессией TrkA-, p75-рецепторов одного знака и соответствующие им функциональные изменения экспрессии рецепторов
    Exact
    [27–31]
    Suffix
    . Выводы Установлено присутствие TrkA- и p75-рецепторов на клетках анапластической астроцитомы, глиобластомы и медуллобластомы при воздействии на них ФРН и его комбинаций с цисплатином или темозоломидом.
    (check this in PDF content)