The 20 reference contexts in paper D. Kutilin S., S. Dimitriadi N., D. Vodolazhsky I., E. Frantsiyants M., O. Kit I., Д. Кутилин С., С. Димитриади Н., Д. Водолажский И., Е. Франциянц М., О. Кит И. (2017) “ВЛИЯНИЕ ТЕПЛОВОЙ ИШЕМИИ-РЕПЕРФУЗИИ НА ЭКСПРЕССИЮ АПОПТОЗ-РЕГУЛИРУЮЩИХ ГЕНОВ В ПОЧЕЧНОЙ ТКАНИ БОЛЬНЫХ С ПОЧЕЧНО-КЛЕТОЧНЫМ РАКОМ // EFFECT OF THERMAL ISCHEMIA-REPERFUSION ON EXPRESSION OF APOPTOSIS-REGULATING GENES IN THE RENAL TISSUE OF PATIENTS WITH RENAL CELL CARCINOMA” / spz:neicon:nefr:y:2017:i:1:p:80-86

  1. Start
    5066
    Prefix
    Тел.: +7-951-538-50-39, e-mail: k.denees@yandex.ru ВВЕДЕНИЕ Органосохраняющие операции при раке почки, в частности, выполнение резекции опухолей сложных локализаций, требуют применения продолжительной тепловой ишемии с последующей реперфузией
    Exact
    [1]
    Suffix
    . Ишемия/реперфузия является основной причиной развития острого повреждения почек (ОПП) [2]. Общее клиническое состояние данного подхода по-прежнему ассоциируется с высоким уровнем заболеваемости и смертности, несмотря на значительные успехи в поддерживающей терапии [3].
    (check this in PDF content)

  2. Start
    5168
    Prefix
    Тел.: +7-951-538-50-39, e-mail: k.denees@yandex.ru ВВЕДЕНИЕ Органосохраняющие операции при раке почки, в частности, выполнение резекции опухолей сложных локализаций, требуют применения продолжительной тепловой ишемии с последующей реперфузией [1]. Ишемия/реперфузия является основной причиной развития острого повреждения почек (ОПП)
    Exact
    [2]
    Suffix
    . Общее клиническое состояние данного подхода по-прежнему ассоциируется с высоким уровнем заболеваемости и смертности, несмотря на значительные успехи в поддерживающей терапии [3]. Важные открытия были сделаны в определении биологических последствий ишемического повреждения почек.
    (check this in PDF content)

  3. Start
    5354
    Prefix
    Ишемия/реперфузия является основной причиной развития острого повреждения почек (ОПП) [2]. Общее клиническое состояние данного подхода по-прежнему ассоциируется с высоким уровнем заболеваемости и смертности, несмотря на значительные успехи в поддерживающей терапии
    Exact
    [3]
    Suffix
    . Важные открытия были сделаны в определении биологических последствий ишемического повреждения почек. Морфологический ответ клеток почечных канальцев зависит от интенсивности и тяжести ишемии и включает в себя потерю клеточной полярности, апоптоз, дедифференцировку жизнеспособных клеток, пролиферацию, дифференцировку и реституцию нормального эпителия [4].
    (check this in PDF content)

  4. Start
    5736
    Prefix
    Морфологический ответ клеток почечных канальцев зависит от интенсивности и тяжести ишемии и включает в себя потерю клеточной полярности, апоптоз, дедифференцировку жизнеспособных клеток, пролиферацию, дифференцировку и реституцию нормального эпителия
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Молекулярные механизмы, лежащие в основе каждого из этих явлений, интенсивно изучаются и имеют значительные перспективы для новых терапевтических подходов, направленных на повышение качества лечения и/или ускорения процесса восстановления.
    (check this in PDF content)

  5. Start
    6174
    Prefix
    в основе каждого из этих явлений, интенсивно изучаются и имеют значительные перспективы для новых терапевтических подходов, направленных на повышение качества лечения и/или ускорения процесса восстановления. В качестве возможного механизма, приводящего к гибели клеток почечных канальцев и эпителия после ишемического воздействия на почки, рассматривается апоптоз
    Exact
    [5]
    Suffix
    . Апоптоз, характеризующийся сморщиванием клеток, конденсацией и фрагментацией ядер и межнуклеосомной деградацией ДНК, был зарегистрирован в культивируемых клетках почечных канальцев в образцах биоптатов человека, полученных из почек трупов [6].
    (check this in PDF content)

  6. Start
    6436
    Prefix
    Апоптоз, характеризующийся сморщиванием клеток, конденсацией и фрагментацией ядер и межнуклеосомной деградацией ДНК, был зарегистрирован в культивируемых клетках почечных канальцев в образцах биоптатов человека, полученных из почек трупов
    Exact
    [6]
    Suffix
    . Поэтому в настоящее время интерес исследователей направлен на идентификацию внутриклеточных путей, участвующих в рецепции стимулов, передаче сигналов и реализации фаз апоптоза клетками трубчатого эпителия почек в результате воздействия ишемии/реперфузии.
    (check this in PDF content)

  7. Start
    6962
    Prefix
    По данным ряда авторов, даже при использовании тепловой ишемии стандартной продолжительности (до 20 мин включительно) в раннем послеоперационном периоде возникают осложнения в виде развития острого повреждения почек (ОПП) в 20–30% случаев
    Exact
    [6–9]
    Suffix
    . Ишемия тканей сопровождается повреждением субклеточных структур, в том числе митохондрий, что приводит к активации факторов апоптоза и инициации каспаз-зависимого апоптозного каскада, в результате которого клетки «совершают самоубийство» [10].
    (check this in PDF content)

  8. Start
    7216
    Prefix
    Ишемия тканей сопровождается повреждением субклеточных структур, в том числе митохондрий, что приводит к активации факторов апоптоза и инициации каспаз-зависимого апоптозного каскада, в результате которого клетки «совершают самоубийство»
    Exact
    [10]
    Suffix
    . До настоящего времени влияние тепловой ишемии и последующей реперфузии на транскрипционный профиль апоптоз-регулирующих генов в почечной ткани пациентов, больных раком, описано недостаточно [11].
    (check this in PDF content)

  9. Start
    7426
    Prefix
    До настоящего времени влияние тепловой ишемии и последующей реперфузии на транскрипционный профиль апоптоз-регулирующих генов в почечной ткани пациентов, больных раком, описано недостаточно
    Exact
    [11]
    Suffix
    . Поэтому целью нашего исследования стало изучение изменения экспрессии апоптоз-регулирующих генов MDM 2, BAX, CASP7, CASP3, CASP8, CASP9, BCL2, CASP8/ FADD (CFLAR), p53, APAF1, AIFM1, ICAD, XIAP в почечной ткани больных с почечно-клеточным раком для расширения представлений о фундаментальных молекулярных механизмах повреждающего действия ишемии и реперфузии.
    (check this in PDF content)

  10. Start
    9415
    Prefix
    Фрагменты ткани измельчали и растирали в фарфоровых ступках в лизирующем растворе, содержащем 4 М гуанидин тиоцианат, 25 мМ цитрат натрия, 0,5% саркозил и 0,1 М 2-меркаптоэтанол. Дальнейшее выделение РНК из тканей проводили по методу P. Chomczynski и N. Sacchi
    Exact
    [12]
    Suffix
    . Полученные образцы суммарной РНК обрабатывали препаратами ДНК-азы. Синтез кДНК проводили с использованием коммерческих наборов «Reverta-L» («Интерлабсервис», Россия). Методом RT-qPCR определяли величины относительной экспрессии 13 генетических локусов: MDM2, BAX, CASP7, CASP3, CASP8, CASP9, BCL2, CASP8/FADD (CFLAR), p53, APAF1, AIFM1, ICAD, XIAP.
    (check this in PDF content)

  11. Start
    11732
    Prefix
    Количественную ПЦР-РВ-амплификацию проводили на термоциклере «Bio-Rad CFX96» («Bio-Rad», USA) по следующей программе: первичная денатурация: t=95 0С в течение 3 мин 40 циклов: t=95 0С в течение 10 с, t=58 0С в течение 30 с, t=72 0С в течение 30 с. Относительную экспрессию генетического локуса (RЕ) рассчитывали по формуле RЕ =2-ΔΔCt
    Exact
    [13, 14]
    Suffix
    . Нормализацию проводили по референсному гену ACTB и экспрессии генов в образцах пункционной биопсии, отобранных у этих же пациентов до остановки кровоснабжения, последовательно по схеме, приведенной ниже: 1.
    (check this in PDF content)

  12. Start
    19386
    Prefix
    Соотношение экспрессии пар про-/антиапоптозных генов p53/MDM2 и BAX/BCL2 до ишемии, на 10-й минуте ишемии и через 20 мин после восстановления кровотока в почке. достоверное увеличение экспрессии на 30% гена XIAP, основной функцией которого является ингибирование процесса апоптоза в клетках
    Exact
    [15]
    Suffix
    . XIAP связывает и ингибирует каспазы-3, -7 и -9, таким образом, блокируя как внешний (рецепторный), так и внутренний (митохондриальный) пути апоптоза [16]. Пермеабилизация митохондриальной мембраны регулируется белками семейства ВCL2 [17].
    (check this in PDF content)

  13. Start
    19554
    Prefix
    до ишемии, на 10-й минуте ишемии и через 20 мин после восстановления кровотока в почке. достоверное увеличение экспрессии на 30% гена XIAP, основной функцией которого является ингибирование процесса апоптоза в клетках [15]. XIAP связывает и ингибирует каспазы-3, -7 и -9, таким образом, блокируя как внешний (рецепторный), так и внутренний (митохондриальный) пути апоптоза
    Exact
    [16]
    Suffix
    . Пермеабилизация митохондриальной мембраны регулируется белками семейства ВCL2 [17]. Встраивание в мембрану митохондрий белков BAX приводит к образованию пороподобных структур, а активация и функционирование BAX может блокироваться антиапоптотическим белком BCL-2 [18].
    (check this in PDF content)

  14. Start
    19645
    Prefix
    XIAP связывает и ингибирует каспазы-3, -7 и -9, таким образом, блокируя как внешний (рецепторный), так и внутренний (митохондриальный) пути апоптоза [16]. Пермеабилизация митохондриальной мембраны регулируется белками семейства ВCL2
    Exact
    [17]
    Suffix
    . Встраивание в мембрану митохондрий белков BAX приводит к образованию пороподобных структур, а активация и функционирование BAX может блокироваться антиапоптотическим белком BCL-2 [18].
    (check this in PDF content)

  15. Start
    19845
    Prefix
    Пермеабилизация митохондриальной мембраны регулируется белками семейства ВCL2 [17]. Встраивание в мембрану митохондрий белков BAX приводит к образованию пороподобных структур, а активация и функционирование BAX может блокироваться антиапоптотическим белком BCL-2
    Exact
    [18]
    Suffix
    . В нашем эксперименте через 20 мин после реперфузии почки в её тканях обнаружено статистически достоверное увеличение экспрессии гена BCL2 (превышающее увеличение экспрессии гена BAX), результатом чего может быть ингибирование митохондриального пути апоптоза. p53 относится к генам-онкосупрессорам, но одной из важных функций продукта этого гена (белка p53) является
    (check this in PDF content)

  16. Start
    20296
    Prefix
    почки в её тканях обнаружено статистически достоверное увеличение экспрессии гена BCL2 (превышающее увеличение экспрессии гена BAX), результатом чего может быть ингибирование митохондриального пути апоптоза. p53 относится к генам-онкосупрессорам, но одной из важных функций продукта этого гена (белка p53) является активация белков репарации ДНК при её повреждении
    Exact
    [19]
    Suffix
    . Существенное и статистически достоверное увеличение экспрессии этого белка в почечной ткани на этапе реперфузии может свидетельствовать об усилении процессов образования АФК и повреждении ДНК.
    (check this in PDF content)

  17. Start
    20638
    Prefix
    Существенное и статистически достоверное увеличение экспрессии этого белка в почечной ткани на этапе реперфузии может свидетельствовать об усилении процессов образования АФК и повреждении ДНК. С другой стороны – увеличение в почечной ткани пациентов экспрессии гена р53 может стимулировать экспрессию гена MDM2
    Exact
    [20]
    Suffix
    . Продукт гена MDM2 в свою очередь блокирует действие р53, связываясь с ним, убиквитинилирует его для последующей деградации протеасомой. Всё это в совокупности с активаций экспрессии гена XIAP и BCL2, вероятно, препятствует развитию апоптических процессов в данном временном интервале.
    (check this in PDF content)

  18. Start
    21589
    Prefix
    Следует отметить значительное повышение экспрессии генов CASP8, CASP9 и AIFM1 (см. рис. 3) и их важную роль в развитии апоптоза. Каспаза-8 – классическая инициирующая каспаза, участвующая в передаче сигнала от рецепторов апоптоза Fas, TNF-R1 и DR1-5 связывается с белком FADD и инициирует протеолитический каскад
    Exact
    [21]
    Suffix
    . Каспаза-9 активирует каспазу-3, которая в свою очередь расщепляет прокаспазу-9, таким образом создается цикл амплификации апоптозного сигнала, при этом активация каспазы-9 сопровождается высвобождением модуля CARD, повышающего экспрессию антиапоптозных генов [22].
    (check this in PDF content)

  19. Start
    21872
    Prefix
    Каспаза-9 активирует каспазу-3, которая в свою очередь расщепляет прокаспазу-9, таким образом создается цикл амплификации апоптозного сигнала, при этом активация каспазы-9 сопровождается высвобождением модуля CARD, повышающего экспрессию антиапоптозных генов
    Exact
    [22]
    Suffix
    . В результате индукции апоптоза белок AIFM1 перемещается в ядро, где он вызывает конденсацию и фрагментацию хромосом; кроме того, он индуцирует высвобождение митохондриями апоптогенного фактора цитохрома С [23].
    (check this in PDF content)

  20. Start
    22094
    Prefix
    В результате индукции апоптоза белок AIFM1 перемещается в ядро, где он вызывает конденсацию и фрагментацию хромосом; кроме того, он индуцирует высвобождение митохондриями апоптогенного фактора цитохрома С
    Exact
    [23]
    Suffix
    . При анализе соотношения экспрессии генов p53/MDM2 и BAX/BCL2 (см. рис. 4) необходимо учитывать тот факт, что экспрессия генов MDM2 и BCL2 значительно превышает экспрессию генов p53 и BAX на 48 и 71% (при сравнении относительно гена ACTB) соответственно.
    (check this in PDF content)