The 22 references with contexts in paper E. Kazachinskaia I., A. Ivanova V., A. Sorokin V., E. Subbotina L., A. Kachko V., I. Razumov A., V. Loktev B., Е. Казачинская И., А. Иванова В., А. Сорокин В., А. Качко В., Е. Субботина Л., И. Разумов А., В. Локтев Б. (2014) “МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА И РЕКОМБИНАНТНЫЕ БЕЛКИ ФИЛОВИРУСОВ. ИММУНОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ДЛЯ ИММУНОДИАГНОСТИКИ // MONOCLONAL ANTIBODIES AND RECOMBINANT PROTEINS OF FILOVIRUSES: IMMUNOCHEMICAL PROPERTIES AND EVALUATION OF THEIR EFFICIENCY FOR IMMUNE DIAGNOSTICS OF MARBURG AND EBOLA VIRUSES” / spz:neicon:mimmun:y:2010:i:3:p:177-190

1
Борисевич В.Н., Михайлов В.В., Краснянский Б.П., Градобоев В.Н., Лебединская Е.В., Потрываева Н.В., Тиманькова Г.Д. Разработка и изучение свойств иммуноглобулинов против лихорадки Эбола // Вопросы вирусологии. – 1996. – No 6. – C. 270-273.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=8489
    Prefix
    Рекомбинантные белки VP40 и NP ВЭ получали аналогично по методикам, приведенным в [5]. Сыворотки и иммуноглобулины, специфичные к вирусу Эбола. Препарат очищенных лошадиных иммуноглобулинов (Ig-лошадь-ВЭ) был получен из ВЦ НИИМ МО РФ (г. Сергиев Посад)
    Exact
    [1]
    Suffix
    . Поликлональные антисыворотки (АС-ВЭ) получали путем иммунизации препаратом ВЭ мышей BALB/c (весом 18-20 г) и крыс Lou (весом 180-200 г), как описано [4]. Получение поликлональной антисыворотки кролика против ВЭ описано [19].

2
Букреев А.А., Скрипченко А.А., Гусев Ю.М., Фролов В.Г., Кандрушин Е.В., Красницкая И.М., Шестопалов А.М. Перспективный метод препаративной наработки и очистки вируса Марбург // Вопросы вирусологии. – 1995. – No 4. – С. 161-165.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=7785
    Prefix
    В экспериментах использовали очищенный, концентрированный из культуральной среды инфицированных клеток Vero, инактивированный ВЭ, субтип Заир (штамм Mayinga) [18]. Вирус Марбург (штамм Popp) был получен методом ультрацентрифугирования плазмы крови инфицированных морских свинок по методике, приведенной в
    Exact
    [2]
    Suffix
    , инактивирован обработкой 0,17% димером этиленимина с последующей инкубацией при 8-10 °С в течение 24 ч и далее прогреванием при 60 °С в течение 1 часа, как описано в работе [41]. Антиген ВМ был любезно предоставлен доктором Белановым Е.

3
Владыко А.С., Чепурнов А.А., Быст рова С.И., Лемешко И.Н., Лукашевич И.С. Выявление антигена вируса Марбург методом твердофазного иммуноферментного анализа // Вопросы вирусологии. – 1991. – No 5. – С. 419-421.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=25010
    Prefix
    Только одна группа авторов сообщает о двух экспериментальных системах ИФА на основе «захватывающих» антиген и «индикаторных» МКА, специфичных к GP ВЭ [38] и к VP40 ВЭ [39]. Из описанных в литературе ИФА систем в формате «сэндвич» для выявления ВМ
    Exact
    [3, 6, 15]
    Suffix
    нет системы на основе двух МКА. В некоторых из перечисленных работ показано, что антитела к внутренним структурным вирусным белкам – нуклеопротеину и матриксному – успешно выявляли инактивированный вирус в биологических пробах экспериментально зараженных животных.

4
Казачинская Е.И., Перебоев А.В., Чепурнов А.А., Беланов Е.Ф., Разумов И.А. Моноклональные антитела к вирусу Эбола: получение, характеризация и изучение перекрестной реактивности с вирусом Марбург // Вопросы вирусологии. – 2000. – No 3. – С. 40-44.
Total in-text references: 7
  1. In-text reference with the coordinate start=6900
    Prefix
    перспективно использовать для иммунодиагностики филовирусных инфекций структурные белки – нуклеопротеин (NP), матриксный белок VP40 и кофактор вирусной полимеразы (белок VP35), которые составляют 17, 37,7 и 24,5% от массы вириона соответ ственно [27]. Ранее нами была получена коллекция гибридом, стабильно продуцирующих МКА к структурным белкам NP, VP40, VP35 ВМ [14] и к белкам NP и VP35 ВЭ
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Целью данной работы было пополнение коллекции гибридом и исследование иммунохимических свойств МКА в конкурентном ИФА для выявления пар МКА способных: а) эффективно «захватывать» вирусные и рекомбинантные антигены ВМ и ВЭ в твердофазном ИФА; б) эффективно выявлять образовавшиеся на твердой фазе иммунные комплексы; а также исследование иммунохимических свойств рекомбинантных белков VP35, VP4

  2. In-text reference with the coordinate start=8645
    Prefix
    Препарат очищенных лошадиных иммуноглобулинов (Ig-лошадь-ВЭ) был получен из ВЦ НИИМ МО РФ (г. Сергиев Посад) [1]. Поликлональные антисыворотки (АС-ВЭ) получали путем иммунизации препаратом ВЭ мышей BALB/c (весом 18-20 г) и крыс Lou (весом 180-200 г), как описано
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Получение поликлональной антисыворотки кролика против ВЭ описано [19]. Антисыворотки к рекомбинантным белкам получали при иммунизации беспородных белых мышей. Сыворотки и иммуноглобулины, специфичные к вирусу Марбург.

  3. In-text reference with the coordinate start=9403
    Prefix
    С целью получения иммунных сывороток (АС-ВМ) проводили иммунизацию инактивированным препаратом ВМ мышей BALB/c и кроликов [14]. Антисыворотки к рекомбинантным белкам получали при иммунизации беспородных белых мышей. Получение гибридом. Слияние клеток (гибридизацию) проводили, как описано
    Exact
    [4]
    Suffix
    , с помощью полиэтиленгликоля по методу, предложенному Gefter М. [30]. Использовали соотношение миеломных клеток NS/1 к иммунным спленоцитам 1:3. Отбор позитивных гибридом, секретирующих специфические МКА к антигену, осуществляли методом ТИФА.

  4. In-text reference with the coordinate start=9837
    Prefix
    Отбор позитивных гибридом, секретирующих специфические МКА к антигену, осуществляли методом ТИФА. Гибридомы, секретирующие специфичные антитела, были дважды клонированы методом предельных разведений. Криоконсервацию гибридных клеточных линий проводили в жидком азоте, как описано
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Моноклональные антитела. Наработку МКА проводили, как описано [4]. Для очистки МКА использовали каприловую кислоту в соответствии с рекомендациями [22] и с последующим осаждением в 50% растворе сульфата аммония (pH 7,0).

  5. In-text reference with the coordinate start=9904
    Prefix
    Гибридомы, секретирующие специфичные антитела, были дважды клонированы методом предельных разведений. Криоконсервацию гибридных клеточных линий проводили в жидком азоте, как описано [4]. Моноклональные антитела. Наработку МКА проводили, как описано
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Для очистки МКА использовали каприловую кислоту в соответствии с рекомендациями [22] и с последующим осаждением в 50% растворе сульфата аммония (pH 7,0). Типирование классов и подклассов МКА проводили методом ТИФА с использованием моноспецифических мышиных антител («Sigma», США).

  6. In-text reference with the coordinate start=27875
    Prefix
    0 0,5 0,0 25001250625312,5156,2578,1239,619,89,94,952,471,23 Концентрация антигенов нг/мл Титрование рек. белка VP35Титрование вируса МарбургОтрицательный контроль Рисунок 5а. график титрования антигена вируса Марбург и рекомбинантного белка VP35 парой Мка 3F9 и 3F9* Примечание. В качестве отрицательного контроля использовали захватывающие антиген МКА 1С7, специфичные к белку VP35 вируса Эбола
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Исходная концентрация препаратов антигенов по СФ 1мг/мл, первая точка титрования в разведении 1:400 соответствует концентрации 2500 нг/мл; 3F9*, 7H10*, 1C1*,7B11* – индикаторные МКА, меченные биотином. 4,0 3,5 3,0 2,5 2,0 1,5 1,0 0,5 0,0 25001250625312,5156,2578,1239,619,89,94,952,471,23 Концентрация антигенов нг/мл Титрование рек. белка VP40 ВМТитрование вируса МарбургОтрицательный контроль

  7. In-text reference with the coordinate start=31003
    Prefix
    пары МКА строго специфичны к внутренним структурным вирусным белкам NP, VP40 и VP35 и не имеют перекрестной реактивности с гетерологичными антигенами и подходят для разработки ИФА тестсистем для выявления филовирусных антигенов. Это особенно важно, так как ранее нами был обнаружен факт наличия некоторой перекрестной активности поликлональных антител, специфичных к этим двум филовирусам
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Исследование иммунохимических свойств полноразмерных рекомбинантных белков NP, VP40 и VP35 вирусов Эбола и Марбург методами ИФА и иммуноблота показало, что они антигенно подобны нативным вирусным антигенам и могут быть успешно использованы для конструирования иммунодиагностических методов нового поколения.

5
Казачинская Е.И., Терновой В.А., Рудзевич Т.Н., Нетесов С.В., Чепурнов А.А., Разумов И.А. Исследование антигенной структуры белка VP35 вируса Эбола // Вопросы вирусологии. – 2001. – No 5. – C. 25-31.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=8317
    Prefix
    Белки ВМ были получены в результате экспрессии полноразмерных генов VP35 и VP40 в клетках E. coli, по методикам, приведенным в [16]. Рекомбинантные белки VP40 и NP ВЭ получали аналогично по методикам, приведенным в
    Exact
    [5]
    Suffix
    . Сыворотки и иммуноглобулины, специфичные к вирусу Эбола. Препарат очищенных лошадиных иммуноглобулинов (Ig-лошадь-ВЭ) был получен из ВЦ НИИМ МО РФ (г. Сергиев Посад) [1]. Поликлональные антисыворотки (АС-ВЭ) получали путем иммунизации препаратом ВЭ мышей BALB/c (весом 18-20 г) и крыс Lou (весом 180-200 г), как описано [4].

6
Кизимов Н.В., Луб М.Ю., Черный Н.Б., Беланов Е.Ф. Использование иммуноферментного анализа (ИФА) для обнаружения антигена вируса Марбург // Межведомственная конференция «Изучение и профилактика особо опасных вирусных инфекций» / Тезисы докладов. 7-8 апреля 1993 г., Кольцово.
Total in-text references: 2
  1. In-text reference with the coordinate start=6046
    Prefix
    У пациентов ВЭ может быть обнаружен на третий день после начала заболевания и его концентрация в крови достигает 106-108 вирусных частиц в миллилитре [48, 49]. ВМ появляется в крови инфицированных морских свинок и обезьян Macaca mulatta на 4 сутки от заражения и может быть обнаружен методом ИФА
    Exact
    [6]
    Suffix
    . Также характерно высокое содержание ВМ в слюне и выделениях лабораторно инфицированных животных [21]. Эта особенность развития заболевания делает высокоэффективными методы иммунологической диагностики, основанные на раннем выявлении вирусных антигенов в биологических жидкостях человека и животных.

  2. In-text reference with the coordinate start=25010
    Prefix
    Только одна группа авторов сообщает о двух экспериментальных системах ИФА на основе «захватывающих» антиген и «индикаторных» МКА, специфичных к GP ВЭ [38] и к VP40 ВЭ [39]. Из описанных в литературе ИФА систем в формате «сэндвич» для выявления ВМ
    Exact
    [3, 6, 15]
    Suffix
    нет системы на основе двух МКА. В некоторых из перечисленных работ показано, что антитела к внутренним структурным вирусным белкам – нуклеопротеину и матриксному – успешно выявляли инактивированный вирус в биологических пробах экспериментально зараженных животных.

9
Мерзликин Н.В., Чепурнов А.А., Истомина Н.Н., Офицеров В.И., Воробьева М.С. Разработка и применение иммуноферментных тестсистем для диагностики лихорадки Эбола // Вопросы вирусологии. – 1995. – No 1. – С. 31-35.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=5739
    Prefix
    Характерной особенностью филовирусных заболеваний является раннее появление вирусных антигенов в сыворотке крови. Так, антиген ВЭ обнаруживается в сыворотке крови инфицированных морских свинок и обезьян уже через 4 суток, фактически в конце инкубационного периода заболевания
    Exact
    [9, 10]
    Suffix
    . У пациентов ВЭ может быть обнаружен на третий день после начала заболевания и его концентрация в крови достигает 106-108 вирусных частиц в миллилитре [48, 49]. ВМ появляется в крови инфицированных морских свинок и обезьян Macaca mulatta на 4 сутки от заражения и может быть обнаружен методом ИФА [6].

10
Мерзликин Н.В. Иммуноферментные тестсистемы для изучения лихорадки Эбола: Автореф. дис. ... канд. биол. наук. – Кольцово, 1995.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=5739
    Prefix
    Характерной особенностью филовирусных заболеваний является раннее появление вирусных антигенов в сыворотке крови. Так, антиген ВЭ обнаруживается в сыворотке крови инфицированных морских свинок и обезьян уже через 4 суток, фактически в конце инкубационного периода заболевания
    Exact
    [9, 10]
    Suffix
    . У пациентов ВЭ может быть обнаружен на третий день после начала заболевания и его концентрация в крови достигает 106-108 вирусных частиц в миллилитре [48, 49]. ВМ появляется в крови инфицированных морских свинок и обезьян Macaca mulatta на 4 сутки от заражения и может быть обнаружен методом ИФА [6].

11
Никифоров В.В., Туровской Ю.И, Калинин П.П., Акинфеева Л.А., Каткова Л.Р., Бармин В.С., Рябчикова Е.И., Попкова Н.И., Шестопалов А.М., Назаров В.П., Ведищев С.В., Нетесов С.В. Случай лабораторного заражения лихорадкой Марбург // Микробиология. – 1994. – No 3. – C. 104-110.
Total in-text references: 4
  1. In-text reference with the coordinate start=8981
    Prefix
    Антисыворотки к рекомбинантным белкам получали при иммунизации беспородных белых мышей. Сыворотки и иммуноглобулины, специфичные к вирусу Марбург. В качестве референсантисыворотки против ВМ использовали сыворотку человека, переболевшего лихорадкой Марбург
    Exact
    [11]
    Suffix
    . Коммерческий препарат очищенных лошадиных иммуноглобулинов (Ig-лошадьВМ) был получен из ВЦ НИИМ МО РФ (г. Сергиев Посад). С целью получения иммунных сывороток (АС-ВМ) проводили иммунизацию инактивированным препаратом ВМ мышей BALB/c и кроликов [14].

  2. In-text reference with the coordinate start=13648
    Prefix
    Специфическое связывание антител, взаимодействующих с вирусными или рекомбинантными белками, выявляли с помощью конъюгата антивидовых антител меченых пероксидазой хрена. Результаты и обсуждение Антитела сыворотки человека, переболевшего лихорадкой Марбург в результате случайного лабораторного заражения
    Exact
    [11]
    Suffix
    , выявляют все вирусные структурные белки в препарате очищенного и инактивированного ВМ (рис. 1). Наиболее отчетливо выявлялись белки NP, VP35 и VP40, что говорит об их высокой иммуногенности для иммунной системы человека и возможности использования этих вирусных полипептидов в качестве антигена для конструирования иммунодиагностических тест систем.

  3. In-text reference with the coordinate start=14973
    Prefix
    Важно отметить, что поликлональные антитела не выявили значимого антигенного 12 GP L NP VP35 VP30 VP40 VP24 Рисунок 1. Иммуноблот белков вируса Марбург с антителами сыворотки реконвалесцента Примечание. 1 – нормальная сыворотка человека в разведении 1:1000; 2 – сыворотка человека, переболевшего лихорадкой Марбург
    Exact
    [11]
    Suffix
    , в разведении 1:1000. Стрелками обозначено местоположение белков вируса Марбург. 1352467 97 75 50 35 25 перекреста между рекомбинантными полипептидами ВМ и ВЭ. Это позволяет заключить, что полученные рекомбинантные полипептиды могут быть использованы для конструирования иммунодиагностических методов, дифференцирующих эти две филовирусные инфекции.

  4. In-text reference with the coordinate start=17608
    Prefix
    V40-ВЭ*< 100< 100< 100< 1006561001968300< 100 МАС-рек. NP-ВЭ*< 100< 100< 100< 100656100< 1001968300 отрицательные контроли**< 100< 100< 100< 100< 100< 100< 100 Примечание. ЧС – сыворотка человека, переболевшего лихорадкой Марбург
    Exact
    [11]
    Suffix
    (в скобках указана дата забора крови); Л. IgG – очищенные IgG лошадей, иммунизированных инактивированными и инфекционными препаратами Марбург и Эбола (г. Сергиев Посад); МАС – мышиные антисыворотки; КАС – антисыворотка кролика, иммунизированного инактивированным антигеном ВМ или ВЭ; Кр-АС-ВЭ – антисыворотка крысы, иммунизированной инактивированным антигеном ВЭ; PQE – лизат E. coli (отрицатель

12
Остерман П.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование. – М.: Наука, 1981. – С. 37-64.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=12706
    Prefix
    Для отрицательного контроля связывания антител с антигеном использовали пару неспецифичных МКА или один вид МКА для «захвата» антигена. Электрофорез и иммуноблот. Электрофорез проводили по методу, описанному в работе
    Exact
    [12]
    Suffix
    в прерывистой буферной системе с использованием 12-15% полиакриламидного геля с 0,1% додецилсульфата натрия в трис-глициновом буфере. Окраску гелей проводили при помощи Кумасси G-250. Вирусные и рекомбинантные белки после электрофореза переносили на нитроцеллюлозную мембрану (Millipore, США) на аппарате Transpor («LKB», Швеция).

14
Разумов И.А., Беланов Е.Ф.. Букреев А.А., Казачинская Е.И. Моноклональные антитела к белкам вируса Марбург и их иммунохимическая характеризация // Вопросы вирусологии. – 1998. – No 6. – С. 274-279.
Total in-text references: 4
  1. In-text reference with the coordinate start=6870
    Prefix
    Поэтому более перспективно использовать для иммунодиагностики филовирусных инфекций структурные белки – нуклеопротеин (NP), матриксный белок VP40 и кофактор вирусной полимеразы (белок VP35), которые составляют 17, 37,7 и 24,5% от массы вириона соответ ственно [27]. Ранее нами была получена коллекция гибридом, стабильно продуцирующих МКА к структурным белкам NP, VP40, VP35 ВМ
    Exact
    [14]
    Suffix
    и к белкам NP и VP35 ВЭ [4]. Целью данной работы было пополнение коллекции гибридом и исследование иммунохимических свойств МКА в конкурентном ИФА для выявления пар МКА способных: а) эффективно «захватывать» вирусные и рекомбинантные антигены ВМ и ВЭ в твердофазном ИФА; б) эффективно выявлять образовавшиеся на твердой фазе иммунные комплексы; а также исследование иммунохимических свойств рек

  2. In-text reference with the coordinate start=9234
    Prefix
    Коммерческий препарат очищенных лошадиных иммуноглобулинов (Ig-лошадьВМ) был получен из ВЦ НИИМ МО РФ (г. Сергиев Посад). С целью получения иммунных сывороток (АС-ВМ) проводили иммунизацию инактивированным препаратом ВМ мышей BALB/c и кроликов
    Exact
    [14]
    Suffix
    . Антисыворотки к рекомбинантным белкам получали при иммунизации беспородных белых мышей. Получение гибридом. Слияние клеток (гибридизацию) проводили, как описано [4], с помощью полиэтиленгликоля по методу, предложенному Gefter М. [30].

  3. In-text reference with the coordinate start=29174
    Prefix
    ,0 1,5 1,0 0,5 0,0 25001250625312,5156,2578,1239,619,89,94,952,471,23 Концентрация антигенов нг/мл Титрование рек. белка VP40 ВТитрование вируса ЭболаЭОтрицательный контроль Рисунок 5с. график титрования антигена вируса Эбола и рекомбинатного белка VP40 парой Мка 4а2 и 1с1* Примечание. В качестве отрицательного контроля использовали пару МКА 7D8 и 7Н10*, специфичные к белку VP40 вируса Марбург
    Exact
    [14]
    Suffix
    . Исходная концентрация препаратов антигенов по СФ 1мг/мл, первая точка титрования в разведении 1:400 соответствует концентрации 2500 нг/мл; 3F9*, 7H10*, 1C1*,7B11* – индикаторные МКА, меченные биотином. 4,0 3,5 3,0 2,5 2,0 1,5 1,0 0,5 0,0 25001250625312,5156,2578,1239,619,89,94,952,471,23 Концентрация антигенов нг/мл Титрование рек.

  4. In-text reference with the coordinate start=29798
    Prefix
    NP ВЭТитрование вируса ЭболаОтрицательный контроль Рисунок 5d. график титрования антигена вируса Эбола и рекомбинантного белка NP парой Мка 1B2 и 7B11* Примечвание. В качестве отрицательного контроля использовали пару МКА 9С7 и 5F11*, специфичных к нуклеопротеину вируса Марбург
    Exact
    [14]
    Suffix
    ; концентрация МКА для «захвата» антигенов – 10 мкг/мл; концентрация индикаторных МКА, меченных биотином – 1 мкг/мл. Исходная концентрация препаратов антигенов по СФ 1мг/мл, первая точка титрования в разведении 1:400 соответствует концентрации 2500 нг/мл; 3F9*, 7H10*, 1C1*,7B11* – индикаторные МКА, меченные биотином.

15
Ручко С.В., Лебедев В.Н., Пащенко Ю.И., Борисевич Г.В., Семенова И.С., Хамитов Р.А., Максимов В.А., Фирсова И.В., Петровский А.В. Получение и изучение гибридом, продуцирующих моноклональные антитела к структурному гликопротеину вируса Марбург // Вопросы вирусологии. – 2001. – No 6. – С. 21-24.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=25010
    Prefix
    Только одна группа авторов сообщает о двух экспериментальных системах ИФА на основе «захватывающих» антиген и «индикаторных» МКА, специфичных к GP ВЭ [38] и к VP40 ВЭ [39]. Из описанных в литературе ИФА систем в формате «сэндвич» для выявления ВМ
    Exact
    [3, 6, 15]
    Suffix
    нет системы на основе двух МКА. В некоторых из перечисленных работ показано, что антитела к внутренним структурным вирусным белкам – нуклеопротеину и матриксному – успешно выявляли инактивированный вирус в биологических пробах экспериментально зараженных животных.

16
Сорокин А.В., Казачинская Е.И., Качко А.В., Иванова А.В., Букреев А.А., Разу мов И.А. Сравнительное исследование антигенных и иммуногенных свойств природного и рекомбинантного белков VP35 вируса Марбург // Вопросы вирусологии. – 1999. – No 5. – C. 206-213.
Total in-text references: 2
  1. In-text reference with the coordinate start=8227
    Prefix
    Антиген ВМ был любезно предоставлен доктором Белановым Е.Ф., а антиген ВЭ-доктором Чепурновым А.А. Рекомбинантные белки ВМ и ВЭ. Белки ВМ были получены в результате экспрессии полноразмерных генов VP35 и VP40 в клетках E. coli, по методикам, приведенным в
    Exact
    [16]
    Suffix
    . Рекомбинантные белки VP40 и NP ВЭ получали аналогично по методикам, приведенным в [5]. Сыворотки и иммуноглобулины, специфичные к вирусу Эбола. Препарат очищенных лошадиных иммуноглобулинов (Ig-лошадь-ВЭ) был получен из ВЦ НИИМ МО РФ (г.

  2. In-text reference with the coordinate start=10418
    Prefix
    Концентрацию белков определяли при помощи набора «Bio-Rad Protein Assay» в соответствии с рекомендациями производителя. Иммунологические методы. Твердофазный ИФА (ТИФА) проводили в полистироловых планшетах, как описано нами ранее
    Exact
    [16]
    Suffix
    . Для проявления иммунохимической реакции использовали хромоген, 0,1% O-фенилендиамин, в цитратно-фосфатном буфере (0,2 М лимонной кислоты, 0,5 М Na2HPO3, рН 5,0) с 0,03% перекиси водорода. Останавливали реакцию добавлением 100 мкл на лунку 1 NHCl и измеряли оптическую плотность образцов на спектрофотометре «Multiscan» с использованием светофильтра с максимумом пропускания 492 нм.

17
Турьянов М.Х., Царегородцев А.Д., Лобзин Ю.В. Инфекционные болезни – М.: Медицина, 1998.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=5454
    Prefix
    Это, прежде всего, желтая лихорадка, лихорадка Ласса, дизентерия, тиф, чума, малярия и целый ряд других инфекционных заболеваний [29], для некоторых из них разработаны вакцины и методы специфического лечения, а точная диагностика в этом случае предопределяет успех лечения
    Exact
    [17]
    Suffix
    . Характерной особенностью филовирусных заболеваний является раннее появление вирусных антигенов в сыворотке крови. Так, антиген ВЭ обнаруживается в сыворотке крови инфицированных морских свинок и обезьян уже через 4 суток, фактически в конце инкубационного периода заболевания [9, 10].

18
Чепурнов А.А., Мерзликин Н.В., Рябчикова Е.И., Чепурнова Т.С., Волчков В.Е., Истомина Н.И., Кузьмин В.А., Воробьева М.С. Получение очищенного вируса Эбола // Вопросы вирусологии. – 1994. – No 6. – С. 254-257.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=7638
    Prefix
    Материалы и методы Вирусные препараты. В экспериментах использовали очищенный, концентрированный из культуральной среды инфицированных клеток Vero, инактивированный ВЭ, субтип Заир (штамм Mayinga)
    Exact
    [18]
    Suffix
    . Вирус Марбург (штамм Popp) был получен методом ультрацентрифугирования плазмы крови инфицированных морских свинок по методике, приведенной в [2], инактивирован обработкой 0,17% димером этиленимина с последующей инкубацией при 8-10 °С в течение 24 ч и далее прогреванием при 60 °С в течение 1 часа, как описано в работе [41].

19
Чепурнов А.А., Мерзликин Н.В., Чепурнова Т.С., Воробьева М.С. Получение кроличьих антисывороток к вирусу Эбола // Вопросы вирусологии. – 1994. – No 6. – C. 286-288.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=8717
    Prefix
    Поликлональные антисыворотки (АС-ВЭ) получали путем иммунизации препаратом ВЭ мышей BALB/c (весом 18-20 г) и крыс Lou (весом 180-200 г), как описано [4]. Получение поликлональной антисыворотки кролика против ВЭ описано
    Exact
    [19]
    Suffix
    . Антисыворотки к рекомбинантным белкам получали при иммунизации беспородных белых мышей. Сыворотки и иммуноглобулины, специфичные к вирусу Марбург. В качестве референсантисыворотки против ВМ использовали сыворотку человека, переболевшего лихорадкой Марбург [11].

21
Чепурнова Т.С., Писанко В.А., Бакулина Л.Ф., Жуков В.А., Чепурнов А.А. Определение содержания вируса Марбург в крови и выделениях экспериментально инфицированных животных // Вопросы вирусологии. – 2000. – No 2. – C. 18-20.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=6148
    Prefix
    ВМ появляется в крови инфицированных морских свинок и обезьян Macaca mulatta на 4 сутки от заражения и может быть обнаружен методом ИФА [6]. Также характерно высокое содержание ВМ в слюне и выделениях лабораторно инфицированных животных
    Exact
    [21]
    Suffix
    . Эта особенность развития заболевания делает высокоэффективными методы иммунологической диагностики, основанные на раннем выявлении вирусных антигенов в биологических жидкостях человека и животных.

22
Bazin H., Malache I.M, Nisol F., Delaunay T. Rat hybridomas and rat monoclonal antibodies. – Florida: CRC Press. – 1990. – P. 165-201.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=9988
    Prefix
    Криоконсервацию гибридных клеточных линий проводили в жидком азоте, как описано [4]. Моноклональные антитела. Наработку МКА проводили, как описано [4]. Для очистки МКА использовали каприловую кислоту в соответствии с рекомендациями
    Exact
    [22]
    Suffix
    и с последующим осаждением в 50% растворе сульфата аммония (pH 7,0). Типирование классов и подклассов МКА проводили методом ТИФА с использованием моноспецифических мышиных антител («Sigma», США).

23
Bayer EA, Wilchek M. The use of the avidinbiotin complex as a tool in molecular biology // Methods Biochem. Anal. – 1980. – Vol. 26. – P. 1-45.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=11032
    Prefix
    В качестве отрицательного и положительного контроля использовали гомологичные нормальную (неиммунную) и гипериммунную сыворотки соответственно. Приготовление конъюгатов антител с биотином проводили по методу, описанному
    Exact
    [23]
    Suffix
    , используя Biotin N-hydroxysuccinimide ester с FW 341 («Sigma», США) в соотношении 250 мкг/1мг МКА. Процесс включения биотина в МКА контролировали титрованием меченых антител на антигене, иммобилизованном на пластик, с конъюгатом пероксидазы со стрептовидином.

24
Becker S., Feldmann H., Will C., Slenczka W. Evidence for occurrence of filovirus antibodies in humans and imported monkeys: do subclinical filovirus infections occur worldwide? // J. Med. Microbiol. Immunol. – 1992. – Vol. 181. – P. 43-55.
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=25594
    Prefix
    Кроме того, при исследовании методом иммуноблота сывороток крови обезьян из возможного ареала распространения филовирусов, а также людей, переболевших лихорадками Марбург и Эбола, было обнаружено наличие антител к структурным нуклеокапсидным белкам – NP, VP40, VP35, но не к наружному гликопротеину
    Exact
    [24]
    Suffix
    . Интересно отметить, что чувствительность и специфичность ИФА по выявлению филовирусных антигенов сопоставима с результатами ПЦР [44]. Использование очищенных антигенов и рекомбинантных белков позволяет более точно определять чувствительность выявления индивидуальных антигенов.

27
Elliott L.H., Kiley M.P., McCormick J.B. Descriptive analysis of Ebola virus protein // Virology. – 1985. – Vol. 147. – P. 169-176.
Total in-text references: 2
  1. In-text reference with the coordinate start=6482
    Prefix
    Эта особенность развития заболевания делает высокоэффективными методы иммунологической диагностики, основанные на раннем выявлении вирусных антигенов в биологических жидкостях человека и животных. Гликопротеин (GP), основной структурный белок оболочки филовирусов, имеет невысокий удельный вес в составе вириона, около 4,7%
    Exact
    [27]
    Suffix
    . Поэтому более перспективно использовать для иммунодиагностики филовирусных инфекций структурные белки – нуклеопротеин (NP), матриксный белок VP40 и кофактор вирусной полимеразы (белок VP35), которые составляют 17, 37,7 и 24,5% от массы вириона соответ ственно [27].

  2. In-text reference with the coordinate start=6750
    Prefix
    Поэтому более перспективно использовать для иммунодиагностики филовирусных инфекций структурные белки – нуклеопротеин (NP), матриксный белок VP40 и кофактор вирусной полимеразы (белок VP35), которые составляют 17, 37,7 и 24,5% от массы вириона соответ ственно
    Exact
    [27]
    Suffix
    . Ранее нами была получена коллекция гибридом, стабильно продуцирующих МКА к структурным белкам NP, VP40, VP35 ВМ [14] и к белкам NP и VP35 ВЭ [4]. Целью данной работы было пополнение коллекции гибридом и исследование иммунохимических свойств МКА в конкурентном ИФА для выявления пар МКА способных: а) эффективно «захватывать» вирусные и рекомбинантные антигены ВМ и ВЭ в твердофазном ИФА; б) эф

29
Gear J.H. Hemorrahagic fevers, with special
Total in-text references: 1
  1. In-text reference with the coordinate start=5309
    Prefix
    геморрагические лихорадки приводят к летальному исходу в течение 5-12 дней, и первичные симптомы филовирусных лихорадок во многом схожи с клинической картиной, характерной для ряда других заболеваний, которые вызываются вирусами, бактериями или простейшими. Это, прежде всего, желтая лихорадка, лихорадка Ласса, дизентерия, тиф, чума, малярия и целый ряд других инфекционных заболеваний
    Exact
    [29]
    Suffix
    , для некоторых из них разработаны вакцины и методы специфического лечения, а точная диагностика в этом случае предопределяет успех лечения [17]. Характерной особенностью филовирусных заболеваний является раннее появление вирусных антигенов в сыворотке крови.