The 16 reference contexts in paper D. Tsyrendorzhiev D., S. Sennikov V., I. Orlovskaya A., I. Gileva P., I. Ryazankin A., L. Toporkova B., V. Kurilin V., Yu. Lopatnikova A., A. Grydina A., S. Schelkunov N., Д. Цырендоржиев Д., С. Сенников В., И. Орловская А., И. Гилева П., И. Рязанкин А., Л. Топоркова Б., В. Курилин В., Ю. Лопатникова А., А. Грыдина А., С. Щелкунов Н. (2014) “ЭФФЕКТИВНОСТЬ РЕКОМБИНАНТНОГО TNF-СВЯЗЫВАЮЩЕГО БЕЛКА ВИРУСА НАТУРАЛЬНОЙ ОСПЫ В МОДЕЛИ КОЛЛАГЕН-ИНДУЦИРОВАННОГО АРТРИТА // EFFICIENCY OF RECOMBINANT TNF-BINDING PROTEIN FROM VARIOLA VIRUS IN A MODEL OF COLLAGEN-INDUCED ARTHRITIS” / spz:neicon:mimmun:y:2013:i:6:p:513-524

  1. Start
    10153
    Prefix
    Из широкого спектра медиаторов ведующую роль в патогенезе РА отводят таким провоспалительным цитокинам, как TNFα, IL-1 и IL-6, которые прямо или опосредованно участвуют в повреждении суставной ткани и в развитии системных проявлений заболевания
    Exact
    [9]
    Suffix
    . В настоящее время усилиями ученых многих стран не только разработаны принципы антицитокиновой стратегии лечения больных с различными заболеваниями, в патогенезе которых ключевую роль играют цитокины, но и внедрены в практическую медицину лекарственные средства, способные ингибировать биологические эффекты цитокинов [7, 8].
    (check this in PDF content)

  2. Start
    10478
    Prefix
    В настоящее время усилиями ученых многих стран не только разработаны принципы антицитокиновой стратегии лечения больных с различными заболеваниями, в патогенезе которых ключевую роль играют цитокины, но и внедрены в практическую медицину лекарственные средства, способные ингибировать биологические эффекты цитокинов
    Exact
    [7, 8]
    Suffix
    . Действующим началом этих препаратов являются моноклональные антитела [16, 38] или рекомбинантные химерные белки, состоящие из соответствующих рецепторных и иммуноглобулиновых доменов [18]. Однако в клинической практике около 30-40% пациентов остаются рефрактерными к терапии этими препаратами, менее чем у половины из них удается достигнуть полной или частичной ремиссии, а около 1/3 – вынужден
    (check this in PDF content)

  3. Start
    11759
    Prefix
    Относительно недавно нами был выделен и охарактеризован новый тип TNF-антагониста – TNF-связывающий белок вируса натуральной оспы (VARV-CrmB) [18], основанный на эволюционно выработанных свойствах защиты вирусов от действия иммунной системы макроорганизма
    Exact
    [7, 15]
    Suffix
    . Предварительные исследования показали, что VARV-CrmB эффективно нейтрализует TNF при экспериментальном септическом шоке [1, 3, 25], ингибирует миграционную и окислительно-метаболическую функцию лейкоцитов крови мышей при эпикутанной аппликации TNF [10].
    (check this in PDF content)

  4. Start
    12019
    Prefix
    Предварительные исследования показали, что VARV-CrmB эффективно нейтрализует TNF при экспериментальном септическом шоке [1, 3, 25], ингибирует миграционную и окислительно-метаболическую функцию лейкоцитов крови мышей при эпикутанной аппликации TNF
    Exact
    [10]
    Suffix
    . Кроме того, нами было показано, что VARV-CrmB ингибирует TNF-индуцированную ОМФ и цитокин-продукцирующую активность мононуклеарных клеток здоровых доноров [11]. Однако для уточнения механизмов TNF-нейтрализующего эффекта есть необходимость в проведении всесторонних исследований биологических свойств VARV-CrmB, для чего требуется выбрать адекватную модель из множества экспериментальных мод
    (check this in PDF content)

  5. Start
    12181
    Prefix
    исследования показали, что VARV-CrmB эффективно нейтрализует TNF при экспериментальном септическом шоке [1, 3, 25], ингибирует миграционную и окислительно-метаболическую функцию лейкоцитов крови мышей при эпикутанной аппликации TNF [10]. Кроме того, нами было показано, что VARV-CrmB ингибирует TNF-индуцированную ОМФ и цитокин-продукцирующую активность мононуклеарных клеток здоровых доноров
    Exact
    [11]
    Suffix
    . Однако для уточнения механизмов TNF-нейтрализующего эффекта есть необходимость в проведении всесторонних исследований биологических свойств VARV-CrmB, для чего требуется выбрать адекватную модель из множества экспериментальных моделей РА.
    (check this in PDF content)

  6. Start
    12750
    Prefix
    Цель исследования: исследовать эффективность TNF-связывающего белка вируса натуральной оспы в модели коллаген-индуцированного артрита у мышей (CBAxC57Bl/6)F1. Материалы и методы Реактивы и среды В работе использовался pекомбинантный TNF мыши (МuTNF), выделенный из бактериального штамма-продуцента (1,5 мг/мл, 3 × 107 МЕ)
    Exact
    [2]
    Suffix
    . Выделение рекомбинантного TNF-связывающего белка вируса натуральной оспы VARV-CrmB проводили, как описано в работе [5]. Антисыворотку к TNF мыши (poly-AbМиTNF) получали путем иммунизации кроликов рекомбинантным МuTNF.
    (check this in PDF content)

  7. Start
    12872
    Prefix
    Материалы и методы Реактивы и среды В работе использовался pекомбинантный TNF мыши (МuTNF), выделенный из бактериального штамма-продуцента (1,5 мг/мл, 3 × 107 МЕ) [2]. Выделение рекомбинантного TNF-связывающего белка вируса натуральной оспы VARV-CrmB проводили, как описано в работе
    Exact
    [5]
    Suffix
    . Антисыворотку к TNF мыши (poly-AbМиTNF) получали путем иммунизации кроликов рекомбинантным МuTNF. Фракционирование лизатов клеток и Вестернблот анализ проводили, как описано в работе [25]. В работе использовались: среда М 3434 (Stem Cell Technology, Canada), среда Metho Cult GF Н 4434 (Stem Cell Technology, Canada), среда RPMI1640, бычий коллаген II типа («Sigma»).
    (check this in PDF content)

  8. Start
    16577
    Prefix
    Оценка структурно-метаболических изменений соединительной ткани О структурно-метаболических изменениях соединительной ткани в динамике развития КИА судили по коллагенолитической активности сыворотки (КАС) крови мышей и по суммарному содержанию гликозаминогликанов (ГАГ) по методикам П.Н. Шараева и соавт.
    Exact
    [12, 13]
    Suffix
    . Суммарное содержание ГАГ (кислые мукополисахариды) в сыворотке крови определяли с использованием ТХУ и карбзольной реакции. Величины КАС и ГАГ выражали в мкмолях оксипролина на 1 л сыворотки за 1 час (мкмоль оксипролина/л) и мкмолях гексуроновой кислоты в 1 л сыворотки (мкмоль/л) соответственно.
    (check this in PDF content)

  9. Start
    27505
    Prefix
    КИА + VARV-CrmB25,7±1,7**31,2±1,1*, **, ***35,7±2,3*49,3±2,7* Примечание. * – статистические различия по сравнению с данными мышей I группы (контроль); ** – по сравнению с данными у животных II группы; *** – по сравнению с данными у мышей III группы (p < 0,05). (VARV-CrmB)
    Exact
    [7, 15]
    Suffix
    . Обнаружение этих свойств белка было основано на наблюдениях, свидетельствующих о том, что в процессе эволюции вирусом натуральной оспы были освоены различные механизмы преодоления иммунного ответа макроорганизма [35].
    (check this in PDF content)

  10. Start
    28117
    Prefix
    Вирусные белки функционируют как связывающие цитокины растворимые рецепторы, блокируя, таким образом, их активность. В дальнейшем был получен рекомбинантный бакуловирус, несущий ген TNF-связывающего белка VARV (VARV-CrmB)
    Exact
    [1]
    Suffix
    и разработан метод его выделения [5]. Оказалось, что TNF-связывающий белок VARV обладает более выраженной TNFнейтрализующей активностью в экспериментальных системах in vitro и in vivo по сравнению с аналогичными белками вирусов оспы обезьян (MPXV) и оспы коров (CPXV) [25].
    (check this in PDF content)

  11. Start
    28155
    Prefix
    Вирусные белки функционируют как связывающие цитокины растворимые рецепторы, блокируя, таким образом, их активность. В дальнейшем был получен рекомбинантный бакуловирус, несущий ген TNF-связывающего белка VARV (VARV-CrmB) [1] и разработан метод его выделения
    Exact
    [5]
    Suffix
    . Оказалось, что TNF-связывающий белок VARV обладает более выраженной TNFнейтрализующей активностью в экспериментальных системах in vitro и in vivo по сравнению с аналогичными белками вирусов оспы обезьян (MPXV) и оспы коров (CPXV) [25].
    (check this in PDF content)

  12. Start
    31186
    Prefix
    TNF, взаимодействуя с клеточными рецепторами TNFRI (p55) и TNFRII (p75) [31], запускает каскад внутриклеточных реакций, в том числе модулирует окислительный метаболизм иммунокомпетентных клеток, с усилением продукции активных метаболитов кислорода (АМК)
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Высокая реакционная способность АМК определяет их токсичность для биологических систем на всех уровнях – от молекулярно-клеточного до организменного. Гиперпродукция TNF и АМК эффекторными клетками воспаления при массивной антигенной нагрузке и/или на фоне дефицита антиоксидантов приводит к разрушению клеток и тканей, в том числе суставов [6].
    (check this in PDF content)

  13. Start
    31535
    Prefix
    Высокая реакционная способность АМК определяет их токсичность для биологических систем на всех уровнях – от молекулярно-клеточного до организменного. Гиперпродукция TNF и АМК эффекторными клетками воспаления при массивной антигенной нагрузке и/или на фоне дефицита антиоксидантов приводит к разрушению клеток и тканей, в том числе суставов
    Exact
    [6]
    Suffix
    . В наших исследованиях было выявлено усиление генерации АМК лейкоцитами крови мышей в динамике развития КИА. Генерация АМК лейкоцитами крови мышей в динамике развития КИА, возможно, была индуцирована стимулирующим действием цитокинов, в том числе и TNF.
    (check this in PDF content)

  14. Start
    32615
    Prefix
    Они стимулируют продукцию оксида азота и АМК, которые вовлечены в катаболизм хряща и, кроме этого, могут вызывать повреждение ДНК и апоптоз хондроцитов [20, 21]. Провоспалительные цитокины отвечают за повышенный синтез и экспрессию матриксных металлопротеиназ в суставных тканях
    Exact
    [14]
    Suffix
    . Очевидно, что усиление КАС крови в динамике развития КИА является результатом усиления синтеза матриксных металлопротеиназ, активности коллагеназы и протеаз, индуцированных провоспалительными цитокинами IL-1 и TNFα [12, 14].
    (check this in PDF content)

  15. Start
    32839
    Prefix
    Очевидно, что усиление КАС крови в динамике развития КИА является результатом усиления синтеза матриксных металлопротеиназ, активности коллагеназы и протеаз, индуцированных провоспалительными цитокинами IL-1 и TNFα
    Exact
    [12, 14]
    Suffix
    . После введения VARV-CrmB мышам с КИА наблюдали снижение КАС крови мышей с КИА, что, по сути, и является результатом его TNF-блокирующего действия. TNF-нейтрализующая активность VARVCrmB может быть связана с тем, что данный белок, наряду с N-концевым TNF-связывающим, содержит С-концевой SECRET-домен, обеспечивающий связывание вирусного белка с хемокинами.
    (check this in PDF content)

  16. Start
    33388
    Prefix
    TNF-нейтрализующая активность VARVCrmB может быть связана с тем, что данный белок, наряду с N-концевым TNF-связывающим, содержит С-концевой SECRET-домен, обеспечивающий связывание вирусного белка с хемокинами. Возможно, что не только TNFсвязывающая активность, но и хемокин-связывающие свойства VARV-CrmB важны для проявления нейтрализующеего эффекта данного белка при септическом шоке
    Exact
    [3]
    Suffix
    , а также для угнетения продукции АМК лейкоцитами, индуцированными цитокинами и хемокинами, обнаруженными в нашем исследовании. Таким образом, при введении VARV-CrmB мышам с КИА происходит снижение активности артрита, КАС и содержания гликозаминогликанов, численности нейтрофильных гранулоцитов и гранулоцитарных предшественников, ОМФ лейкоцитов крови на ранних сроках развития заболевания.
    (check this in PDF content)