The 38 reference contexts in paper M. Pashenkov V., B. Alkhazova I., V. L'vov L., B. Pinegin V., М. Пащенков В., Б. Алхазова И., В. Львов Л., Б. Пинегин В. (2014) “ПРИМЕНЕНИЕ ИНГИБИТОРНОГО АНАЛИЗА ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ МЕХАНИЗМОВ ДЕЙСТВИЯ МУРАМИЛПЕПТИДНОГО ИММУНОМОДУЛЯТОРА «ПОЛИМУРАМИЛ» // APPLICATION OF INHIBITOR ANALYSIS FOR STUDYING MECHANISMS AND ACTIONS OF POLYMURAMYL, A MURAMYL PEPTIDE-BASED IMMUNE MODULATOR” / spz:neicon:mimmun:y:2013:i:1:p:21-28

  1. Start
    3335
    Prefix
    E-mail: mvpashenkov@yandex.ru Введение Мурамилпептиды – короткие гликопептидные фрагменты пептидогликана (ПГ), которые образуются при обработке ПГ лизоцимом. Мурамилпептиды и их синтетические аналоги широко применяются в качестве иммуностимуляторов
    Exact
    [20, 28]
    Suffix
    . Мурамилпептиды распознаются рецепторами NOD1 и NOD2, которые находятся в цитозоле клеток иммунной системы, эпителиальных клеток и ряда других [5, 6]. NOD1 распознает мурамилпептиды грамотрицательных бактерий, содержащие остаток мезо-диаминопимелиновой кислоты (мезо-ДАП) [5, 7].
    (check this in PDF content)

  2. Start
    3488
    Prefix
    Мурамилпептиды и их синтетические аналоги широко применяются в качестве иммуностимуляторов [20, 28]. Мурамилпептиды распознаются рецепторами NOD1 и NOD2, которые находятся в цитозоле клеток иммунной системы, эпителиальных клеток и ряда других
    Exact
    [5, 6]
    Suffix
    . NOD1 распознает мурамилпептиды грамотрицательных бактерий, содержащие остаток мезо-диаминопимелиновой кислоты (мезо-ДАП) [5, 7]. NOD2 распознает мурамилдипептид (МДП) и глюкозаминилмурамилдипептид (ГМДП) – фрагменты ПГ практически всех бактерий, а также мурамилтрипептид с концевым L-лизином, характерный для грамположительных бактерий [6, 7, 19].
    (check this in PDF content)

  3. Start
    3619
    Prefix
    Мурамилпептиды распознаются рецепторами NOD1 и NOD2, которые находятся в цитозоле клеток иммунной системы, эпителиальных клеток и ряда других [5, 6]. NOD1 распознает мурамилпептиды грамотрицательных бактерий, содержащие остаток мезо-диаминопимелиновой кислоты (мезо-ДАП)
    Exact
    [5, 7]
    Suffix
    . NOD2 распознает мурамилдипептид (МДП) и глюкозаминилмурамилдипептид (ГМДП) – фрагменты ПГ практически всех бактерий, а также мурамилтрипептид с концевым L-лизином, характерный для грамположительных бактерий [6, 7, 19].
    (check this in PDF content)

  4. Start
    3837
    Prefix
    NOD2 распознает мурамилдипептид (МДП) и глюкозаминилмурамилдипептид (ГМДП) – фрагменты ПГ практически всех бактерий, а также мурамилтрипептид с концевым L-лизином, характерный для грамположительных бактерий
    Exact
    [6, 7, 19]
    Suffix
    . Активация NOD1 и NOD2 ведет к индукции экспрессии медиаторов воспаления, антимикробных пептидов и других защитных факторов [4, 13, 18, 22, 29]. Молекулярные механизмы действия мурамилпептидов на клетки интенсивно изучаются.
    (check this in PDF content)

  5. Start
    3974
    Prefix
    NOD2 распознает мурамилдипептид (МДП) и глюкозаминилмурамилдипептид (ГМДП) – фрагменты ПГ практически всех бактерий, а также мурамилтрипептид с концевым L-лизином, характерный для грамположительных бактерий [6, 7, 19]. Активация NOD1 и NOD2 ведет к индукции экспрессии медиаторов воспаления, антимикробных пептидов и других защитных факторов
    Exact
    [4, 13, 18, 22, 29]
    Suffix
    . Молекулярные механизмы действия мурамилпептидов на клетки интенсивно изучаются. Поскольку рецепторы NOD1 и NOD2 находятся в цитозоле, то мурамилпептиды вначале поступают в эндосомальный компартмент клеток (вероятнее всего, путем клатрин-зависимого эндоцитоза [14, 16]), откуда доставляются в цитозоль, причем описано несколько путей их трансмембранного транспорта: 1) с участием олигопептидных т
    (check this in PDF content)

  6. Start
    4257
    Prefix
    Молекулярные механизмы действия мурамилпептидов на клетки интенсивно изучаются. Поскольку рецепторы NOD1 и NOD2 находятся в цитозоле, то мурамилпептиды вначале поступают в эндосомальный компартмент клеток (вероятнее всего, путем клатрин-зависимого эндоцитоза
    Exact
    [14, 16]
    Suffix
    ), откуда доставляются в цитозоль, причем описано несколько путей их трансмембранного транспорта: 1) с участием олигопептидных транспортеров SLC15A4 [14] и PepT1 [27]; 2) с участием канала, образованного белком паннексин-1 [11, 17].
    (check this in PDF content)

  7. Start
    4416
    Prefix
    Поскольку рецепторы NOD1 и NOD2 находятся в цитозоле, то мурамилпептиды вначале поступают в эндосомальный компартмент клеток (вероятнее всего, путем клатрин-зависимого эндоцитоза [14, 16]), откуда доставляются в цитозоль, причем описано несколько путей их трансмембранного транспорта: 1) с участием олигопептидных транспортеров SLC15A4
    Exact
    [14]
    Suffix
    и PepT1 [27]; 2) с участием канала, образованного белком паннексин-1 [11, 17]. Вклад каждого из этих путей, вероятно, зависит от типа мурамилпептидов, типа клеток и других факторов. Проникшие в цитозоль мурамилпептиды вызывают активацию NOD-рецепторов, хотя сам факт взаимодействия мурамилпептидов с NOD1/ NOD2 пока не установлен [24].
    (check this in PDF content)

  8. Start
    4429
    Prefix
    Поскольку рецепторы NOD1 и NOD2 находятся в цитозоле, то мурамилпептиды вначале поступают в эндосомальный компартмент клеток (вероятнее всего, путем клатрин-зависимого эндоцитоза [14, 16]), откуда доставляются в цитозоль, причем описано несколько путей их трансмембранного транспорта: 1) с участием олигопептидных транспортеров SLC15A4 [14] и PepT1
    Exact
    [27]
    Suffix
    ; 2) с участием канала, образованного белком паннексин-1 [11, 17]. Вклад каждого из этих путей, вероятно, зависит от типа мурамилпептидов, типа клеток и других факторов. Проникшие в цитозоль мурамилпептиды вызывают активацию NOD-рецепторов, хотя сам факт взаимодействия мурамилпептидов с NOD1/ NOD2 пока не установлен [24].
    (check this in PDF content)

  9. Start
    4491
    Prefix
    NOD1 и NOD2 находятся в цитозоле, то мурамилпептиды вначале поступают в эндосомальный компартмент клеток (вероятнее всего, путем клатрин-зависимого эндоцитоза [14, 16]), откуда доставляются в цитозоль, причем описано несколько путей их трансмембранного транспорта: 1) с участием олигопептидных транспортеров SLC15A4 [14] и PepT1 [27]; 2) с участием канала, образованного белком паннексин-1
    Exact
    [11, 17]
    Suffix
    . Вклад каждого из этих путей, вероятно, зависит от типа мурамилпептидов, типа клеток и других факторов. Проникшие в цитозоль мурамилпептиды вызывают активацию NOD-рецепторов, хотя сам факт взаимодействия мурамилпептидов с NOD1/ NOD2 пока не установлен [24].
    (check this in PDF content)

  10. Start
    4751
    Prefix
    Вклад каждого из этих путей, вероятно, зависит от типа мурамилпептидов, типа клеток и других факторов. Проникшие в цитозоль мурамилпептиды вызывают активацию NOD-рецепторов, хотя сам факт взаимодействия мурамилпептидов с NOD1/ NOD2 пока не установлен
    Exact
    [24]
    Suffix
    . Активированные NOD-рецепторы олигомеризуются и привлекают киназу RIP2 [12]. RIP2 служит адаптором, с которым взаимодействует киназа TAK-1 и γ-субъединица IκB-киназы (IKKγ или NEMO). Далее, по-видимому, TAK-1 фосфорилирует субъединицу IKKβ, что приводит к активации комплекса IKK [23, 31].
    (check this in PDF content)

  11. Start
    4829
    Prefix
    Проникшие в цитозоль мурамилпептиды вызывают активацию NOD-рецепторов, хотя сам факт взаимодействия мурамилпептидов с NOD1/ NOD2 пока не установлен [24]. Активированные NOD-рецепторы олигомеризуются и привлекают киназу RIP2
    Exact
    [12]
    Suffix
    . RIP2 служит адаптором, с которым взаимодействует киназа TAK-1 и γ-субъединица IκB-киназы (IKKγ или NEMO). Далее, по-видимому, TAK-1 фосфорилирует субъединицу IKKβ, что приводит к активации комплекса IKK [23, 31].
    (check this in PDF content)

  12. Start
    5039
    Prefix
    RIP2 служит адаптором, с которым взаимодействует киназа TAK-1 и γ-субъединица IκB-киназы (IKKγ или NEMO). Далее, по-видимому, TAK-1 фосфорилирует субъединицу IKKβ, что приводит к активации комплекса IKK
    Exact
    [23, 31]
    Suffix
    . Последний фосфорилирует ингибиторный белок IκB и инициирует его деградацию. Фактор транскрипции NF-κB, освобожденный от ингибирующего влияния IκB, поступает в ядро и инициирует экспрессию генов.
    (check this in PDF content)

  13. Start
    6083
    Prefix
    Поэтому при расщеплении ПГ, катализируемом лизоцимом, образуются димерные мурамилпептиды, в которых имеется два дисахаридных остатка, соединенных мостиком из 8 и более аминокислот. Димерные мурамилпептиды в низких концентрациях не активируют NOD-рецепторы в модельных клетках – клетках HEK293T, трансгенно экспрессирующих NOD1 или NOD2
    Exact
    [9, 11]
    Suffix
    , но активируют макрофаги МФ человека [22]. Информация о механизмах действия димерных мурамилпептидов практически отсутствует. Недавно мы сообщили об иммуностимулирующих свойствах комплекса мурамилпептидов (КМП), полученного из ПГ грамотрицательной бактерии – S. typhi [1].
    (check this in PDF content)

  14. Start
    6128
    Prefix
    Димерные мурамилпептиды в низких концентрациях не активируют NOD-рецепторы в модельных клетках – клетках HEK293T, трансгенно экспрессирующих NOD1 или NOD2 [9, 11], но активируют макрофаги МФ человека
    Exact
    [22]
    Suffix
    . Информация о механизмах действия димерных мурамилпептидов практически отсутствует. Недавно мы сообщили об иммуностимулирующих свойствах комплекса мурамилпептидов (КМП), полученного из ПГ грамотрицательной бактерии – S. typhi [1].
    (check this in PDF content)

  15. Start
    6360
    Prefix
    Информация о механизмах действия димерных мурамилпептидов практически отсутствует. Недавно мы сообщили об иммуностимулирующих свойствах комплекса мурамилпептидов (КМП), полученного из ПГ грамотрицательной бактерии – S. typhi
    Exact
    [1]
    Suffix
    . КМП состоит из трех мурамилпептидов: 1) N-ацетил-D-глюкозаминил(β1→4)-N-ацетил-D-мурамоил-L-аланил-Dизоглютаминил-мезо-диаминопимелиновой кислоты (ГМтри); 2) N-ацетил-D-глюкозаминил(β1→4)-N-ацетил-D-мурамоил-L-аланилD-изоглютаминил-мезо-диаминопимелоилD-аланина (ГМтетра) и 3) димера ГМтетра (диГМтетра), в котором мономерные остатки ГМтетра соединены путем амидной связи между карбоксильной груп
    (check this in PDF content)

  16. Start
    7573
    Prefix
    components is provided by, at least, three biological processes: (1) clathrin-dependent endocytosis; (2) peptidase-mediated processing of diGMtetra; 3) activation of a signal chain RIP2 – IκB-kinase – NF-κB transcription factor. (Med. Immunol., 2013, vol. 15, N 1, pp 21-28) Keywords: muramyl peptides, macrophages, SB203580, genistein, tumor necrosis factor. ские и клинические испытания
    Exact
    [2, 3]
    Suffix
    . Целью настоящей работы было уточнение молекулярных механизмов действия КМП, в частности двух его компонентов – ГМтри и диГМтетра, являющихся, соответственно, мономерным и димерным мурамилпептидами.
    (check this in PDF content)

  17. Start
    8360
    Prefix
    В качестве выходного параметра использовали продукцию фактора некроза опухолей (ФНО) как одного из индикаторных цитокинов, характеризующих активацию клеток врожденной иммунной системы. Материалы и методы Мурамилпептиды и ЛПС ГМтри и диГМтетра получали из ПГ S. typhi, как описано ранее
    Exact
    [1, 22]
    Suffix
    . По данным LALтеста (EndoSafe KTA; Charles River Laboratories, США), уровни эндотоксина во всех препаратах были ниже 0,01 эндотоксиновой единицы (ЭЕ) на 1 мкг. ЛПС E. coli штамм O111:B4 был куплен у Sigma (США).
    (check this in PDF content)

  18. Start
    8953
    Prefix
    Ингибиторы Коктейль ингибиторов протеаз (КИП) широкого спектра действия с активностью против сериновых, цистеиновых, аспартат- и аминопептидаз, был куплен у Sigma (каталожный No P8340). Генистеин, дайнасор и BAY 11-7082 были закуплены у Merck (Германия), SB203580 – у Sigma. Антагонист паннексина-1 10panx1, представляющий собой пептид с последовательностью WRQAAFVDSY
    Exact
    [17]
    Suffix
    , был синтезирован в Институте биоорганической химии им. Овчинникова и Шемякина (Москва). Культивирование и стимуляция МФ Эффект каждого ингибитора оценивали на МФ, полученных от минимум 6 различных здоровых доноров.
    (check this in PDF content)

  19. Start
    9350
    Prefix
    Культивирование и стимуляция МФ Эффект каждого ингибитора оценивали на МФ, полученных от минимум 6 различных здоровых доноров. МФ получали из моноцитов крови путем 6-суточного культивирования с гранулоцитарно-макрофагальным колониестимулирующим фактором (Invitrogen, Великобритания), как описано ранее
    Exact
    [22]
    Suffix
    . МФ отделяли от пластика путем трипсинизации, отмывали, подсчитывали и приводили к концентрации 4 × 105 клеток/мл в полной культуральной среде (RPMI-1640 с добавлением 2 мМ L-глутамина и 10% фетальной телячьей сыворотке [все PAA, Австрия]).
    (check this in PDF content)

  20. Start
    11211
    Prefix
    Результаты Роль клатрин-зависимого эндоцитоза в механизмах действия ГМтри и диГМтетра ГМтри и ЛПС являются мощными индукторами синтеза ФНО макрофагами, тогда как диГМтетра несколько менее активен
    Exact
    [22]
    Suffix
    . В настоящей работе уровни ФНО в супернатантах нестимулированных МФ составили 71±39 пг/мл, при стимуляции ЛПС – 6084±3987 пг/мл, при стимуляции ГМтри – 3424±2486 пг/мл, при стимуляции диГМтетра – 956±109 пг/мл (M±σ).
    (check this in PDF content)

  21. Start
    11568
    Prefix
    В настоящей работе уровни ФНО в супернатантах нестимулированных МФ составили 71±39 пг/мл, при стимуляции ЛПС – 6084±3987 пг/мл, при стимуляции ГМтри – 3424±2486 пг/мл, при стимуляции диГМтетра – 956±109 пг/мл (M±σ). Lee et al. показали, что клетки HEK293T поглощают мурамилпептиды, содержащие остаток мезо- ДАП, путем клатрин-зависимого эндоцитоза
    Exact
    [14]
    Suffix
    . Мы стимулировали МФ ГМтри, диГМтетра и ЛПС в присутствии дайнасора – специфического ингибитора клатрин-зависимого эндоцитоза [15]. В концентрации 80 мкМ дайнасор умеренно ингибировал ЛПС-индуцированную продукцию ФНО (ОП ФНО = 27±22%; рис. 1А), что согласуется с данными Kagan et al. [10].
    (check this in PDF content)

  22. Start
    11744
    Prefix
    Lee et al. показали, что клетки HEK293T поглощают мурамилпептиды, содержащие остаток мезо- ДАП, путем клатрин-зависимого эндоцитоза [14]. Мы стимулировали МФ ГМтри, диГМтетра и ЛПС в присутствии дайнасора – специфического ингибитора клатрин-зависимого эндоцитоза
    Exact
    [15]
    Suffix
    . В концентрации 80 мкМ дайнасор умеренно ингибировал ЛПС-индуцированную продукцию ФНО (ОП ФНО = 27±22%; рис. 1А), что согласуется с данными Kagan et al. [10]. Влияние дайнасора на ГМтри-индуцированную продукцию ФНО варьировало от донора к донору и было статистически недостоверным.
    (check this in PDF content)

  23. Start
    11903
    Prefix
    Мы стимулировали МФ ГМтри, диГМтетра и ЛПС в присутствии дайнасора – специфического ингибитора клатрин-зависимого эндоцитоза [15]. В концентрации 80 мкМ дайнасор умеренно ингибировал ЛПС-индуцированную продукцию ФНО (ОП ФНО = 27±22%; рис. 1А), что согласуется с данными Kagan et al.
    Exact
    [10]
    Suffix
    . Влияние дайнасора на ГМтри-индуцированную продукцию ФНО варьировало от донора к донору и было статистически недостоверным. Однако дайнасор значительно подавлял выработку ФНО, индуцированную диГМтетра (ОП ФНО = 41±28%; рис. 1А).
    (check this in PDF content)

  24. Start
    13844
    Prefix
    BAY 11-7082 (10мкМ) * * * ГМтри диГМтетра ЛПС ГМтри диГМтетра ЛПС ГМтри диГМтетра ЛПСГМтри диГМтетра ЛПС ГМтри диГМтетра ЛПС ГМтри диГМтетра ЛПС * А Г Б Д В Е КИП был токсичен. Таким образом, эндоцитированный диГМтетра, вероятно, расщепляется на фрагменты, которые и оказывают активирующее действие на МФ. Антагонист паннексина-1 10panx1 в концентрации 500 мкМ
    Exact
    [17]
    Suffix
    не оказывал ингибирующего влияния на продукцию ФНО, индуцированную любым из трех агонистов (рис. 1В). Более вероятно, что транспорт мурамилпептидов из эндосом в цитозоль в МФ происходит с участием олигопептидных транспортеров семейства SLC15 [14].
    (check this in PDF content)

  25. Start
    14093
    Prefix
    Антагонист паннексина-1 10panx1 в концентрации 500 мкМ [17] не оказывал ингибирующего влияния на продукцию ФНО, индуцированную любым из трех агонистов (рис. 1В). Более вероятно, что транспорт мурамилпептидов из эндосом в цитозоль в МФ происходит с участием олигопептидных транспортеров семейства SLC15
    Exact
    [14]
    Suffix
    . Ингибитор sb203580 полностью подавляет ответ МФ на ГМтри и диГМтетра Соединение SB203580 обычно рассматривается как ингибитор митоген-активируемой протеинкиназы p38, однако ингибирует также киназу RIP2 [8].
    (check this in PDF content)

  26. Start
    14302
    Prefix
    Ингибитор sb203580 полностью подавляет ответ МФ на ГМтри и диГМтетра Соединение SB203580 обычно рассматривается как ингибитор митоген-активируемой протеинкиназы p38, однако ингибирует также киназу RIP2
    Exact
    [8]
    Suffix
    . SB203580 в концентрациях 0,1-5 мкМ [8] дозозависимо подавлял ГМтри-индуцированную продукцию ФНО, причем при концентрации 5 мкМ подавление было полным (рис. 1Г). Ответ МФ на диГМтетра был полностью подавлен даже при минимальной концентрации SB203580, равной 0,1 мкМ (рис. 1Г).
    (check this in PDF content)

  27. Start
    14342
    Prefix
    Ингибитор sb203580 полностью подавляет ответ МФ на ГМтри и диГМтетра Соединение SB203580 обычно рассматривается как ингибитор митоген-активируемой протеинкиназы p38, однако ингибирует также киназу RIP2 [8]. SB203580 в концентрациях 0,1-5 мкМ
    Exact
    [8]
    Suffix
    дозозависимо подавлял ГМтри-индуцированную продукцию ФНО, причем при концентрации 5 мкМ подавление было полным (рис. 1Г). Ответ МФ на диГМтетра был полностью подавлен даже при минимальной концентрации SB203580, равной 0,1 мкМ (рис. 1Г).
    (check this in PDF content)

  28. Start
    14822
    Prefix
    Ответ МФ на ЛПС при максимальной концентрации SB203580 был подавлен лишь на треть (ОП ФНО = 66±15%; рис. 1Г). Киназа RIP2 не участвует в передаче сигнала от рецептора ЛПС, но является ключевым компонентом сигнального пути от NOD1 и NOD2
    Exact
    [21]
    Suffix
    . Поэтому ингибирующий эффект SB203580 на выработку ФНО, индуцированную ГМтри и диГМтетра, наиболее вероятно, обусловлен именно ингибированием RIP2. Умеренное снижение ЛПС-индуцированной продукции ФНО в присутствии SB203580, вероятно, обусловлено ингибированием p38.
    (check this in PDF content)

  29. Start
    15192
    Prefix
    Умеренное снижение ЛПС-индуцированной продукции ФНО в присутствии SB203580, вероятно, обусловлено ингибированием p38. Генистеин ингибирует ответ МФ на ГМтри и диГМтетра Хотя RIP2 относят к серин-треониновым киназам
    Exact
    [24]
    Suffix
    , описана также ее протеинтирозинкиназная активность [23]. Кроме того, генистеин – ингибитор протеинтирозинкиназ – отменяет потенциирующее действие МДП на продукцию NO культурами крысиных астроцитов, индуцированную интерфероном-гамма [25].
    (check this in PDF content)

  30. Start
    15250
    Prefix
    Умеренное снижение ЛПС-индуцированной продукции ФНО в присутствии SB203580, вероятно, обусловлено ингибированием p38. Генистеин ингибирует ответ МФ на ГМтри и диГМтетра Хотя RIP2 относят к серин-треониновым киназам [24], описана также ее протеинтирозинкиназная активность
    Exact
    [23]
    Suffix
    . Кроме того, генистеин – ингибитор протеинтирозинкиназ – отменяет потенциирующее действие МДП на продукцию NO культурами крысиных астроцитов, индуцированную интерфероном-гамма [25]. В наших опытах генистеин в концентрации 50 мкМ [25, 30] существенно подавлял продукцию ФНО, вызванную ГМтри и диГМтетра (ОП ФНО = 71±11% и 95±11% соответственно; рис. 1Д).
    (check this in PDF content)

  31. Start
    15432
    Prefix
    Генистеин ингибирует ответ МФ на ГМтри и диГМтетра Хотя RIP2 относят к серин-треониновым киназам [24], описана также ее протеинтирозинкиназная активность [23]. Кроме того, генистеин – ингибитор протеинтирозинкиназ – отменяет потенциирующее действие МДП на продукцию NO культурами крысиных астроцитов, индуцированную интерфероном-гамма
    Exact
    [25]
    Suffix
    . В наших опытах генистеин в концентрации 50 мкМ [25, 30] существенно подавлял продукцию ФНО, вызванную ГМтри и диГМтетра (ОП ФНО = 71±11% и 95±11% соответственно; рис. 1Д). Генистеин не влиял на ЛПС-индуцированную выработку ФНО.
    (check this in PDF content)

  32. Start
    15485
    Prefix
    Кроме того, генистеин – ингибитор протеинтирозинкиназ – отменяет потенциирующее действие МДП на продукцию NO культурами крысиных астроцитов, индуцированную интерфероном-гамма [25]. В наших опытах генистеин в концентрации 50 мкМ
    Exact
    [25, 30]
    Suffix
    существенно подавлял продукцию ФНО, вызванную ГМтри и диГМтетра (ОП ФНО = 71±11% и 95±11% соответственно; рис. 1Д). Генистеин не влиял на ЛПС-индуцированную выработку ФНО. Ингибитор iκb-киназы подавляет ответ МФ на ГМтри, диГМтетра и ЛПС Мурамилпептиды и ЛПС реализуют большую часть своих эффектов, к числу которых относится и индукция гена ФНО, через фактор транскрипции NF-κB.
    (check this in PDF content)

  33. Start
    16083
    Prefix
    Для активации NF-κB необходимо отделение от него ингибирующей субъединицы IκB. Последнее происходит вследствие фосфорилирования IκB, которое катализируется IκBкиназой (IKK), и последующего убиквитилирования
    Exact
    [26]
    Suffix
    . Специфический ингибитор IKK – BAY 117082 – в концентрации 10 мкМ [9] ингибировал продукцию ФНО, индуцированную ГМтри, диГМтетра и ЛПС, примерно на две трети (рис. 1Е). Более полного эффекта достичь не удалось, так как в более высоких концентрациях (> 25 мкМ) BAY 11-7082 был токсичен по отношению к МФ.
    (check this in PDF content)

  34. Start
    16154
    Prefix
    Последнее происходит вследствие фосфорилирования IκB, которое катализируется IκBкиназой (IKK), и последующего убиквитилирования [26]. Специфический ингибитор IKK – BAY 117082 – в концентрации 10 мкМ
    Exact
    [9]
    Suffix
    ингибировал продукцию ФНО, индуцированную ГМтри, диГМтетра и ЛПС, примерно на две трети (рис. 1Е). Более полного эффекта достичь не удалось, так как в более высоких концентрациях (> 25 мкМ) BAY 11-7082 был токсичен по отношению к МФ.
    (check this in PDF content)

  35. Start
    16585
    Prefix
    Более полного эффекта достичь не удалось, так как в более высоких концентрациях (> 25 мкМ) BAY 11-7082 был токсичен по отношению к МФ. Обсуждение В таблице 1 приведены сводные данные всех экспериментов. Результаты, полученные для ГМтри, в целом сопоставимы с ранее опубликованными данными по другим мономерным мурамилпептидам
    Exact
    [14, 23, 25, 31]
    Suffix
    . На основании данных ингибиторного анализа (рис. 1, табл. 1) можно предположить, что ГМтри индуцирует экспрессию ФНО в МФ путем активации сигТАБлицА 1. ОсТАТОчНАя ПРОДукция ФНО* МАкРОФАГАМи, АкТиВиРОВАННыМи ГМтри, диГМтетра и лПс В ПРисуТсТВии укАзАННых иНГиБиТОРОВ Активатор ИнгибиторГМтридиГМтетраЛПС Дайнасор–+++ КИП–+++– 10panx1––– SB203580 (0,1 мкМ / 5 мкМ)++/++++++++/+++++/+ Генистеин++++
    (check this in PDF content)

  36. Start
    17325
    Prefix
    *Градации остаточной продукции ФНО: «–» – > 80%, «+» – 60-80%; «++» – 40-60%; «+++» – 20-40%; «++++» – 0-20%. нальной цепочки «RIP2 – IKK – NF-κB». Подтверждена описанная ранее роль протеинтирозинкиназной активности в механизмах действия мурамилпептидов
    Exact
    [23]
    Suffix
    . Учитывая наши и литературные данные [8, 23, 31], можно предположить, что SB203580 и генистеин в условиях стимуляции мурамилпептидами реализуют свое действие путем ингибирования одной и той же мишени – RIP2.
    (check this in PDF content)

  37. Start
    17368
    Prefix
    *Градации остаточной продукции ФНО: «–» – > 80%, «+» – 60-80%; «++» – 40-60%; «+++» – 20-40%; «++++» – 0-20%. нальной цепочки «RIP2 – IKK – NF-κB». Подтверждена описанная ранее роль протеинтирозинкиназной активности в механизмах действия мурамилпептидов [23]. Учитывая наши и литературные данные
    Exact
    [8, 23, 31]
    Suffix
    , можно предположить, что SB203580 и генистеин в условиях стимуляции мурамилпептидами реализуют свое действие путем ингибирования одной и той же мишени – RIP2. Ответ МФ на димерный мурамилпептид диГМ тетра по чувствительности к ингибиторам был сопоставим с ответом на мономерный ГМтри, однако обладал некоторыми особенностями.
    (check this in PDF content)

  38. Start
    18551
    Prefix
    предположить, что диГМтетра не способен проникнуть через мембрану эндосом и/или активировать NOD-рецепторы, однако такими свойствами обладают фрагменты расщепления диГМтетра, такие как ГМтетра, ГМтри и ГМДП. Не исключено, что и мономерные мурамилпептиды подвергаются дальнейшему процессингу с расщеплением на углеводную и пептидную части, из которых только последняя проникает в цитозоль
    Exact
    [14]
    Suffix
    ; эта возможность в настоящей работе не исследована. В-третьих, ответ МФ на диГМтетра более эффективно подавлялся генистеином и SB203580, чем ответ на ГМтри. Это может быть обусловлено тем, что диГМтетра является менее мощным активатором NOD1 и RIP2.
    (check this in PDF content)