The 25 reference contexts in paper S. Kruglov V., S. Lyamina V., T. Vedenikin Yu., O. Borodovizyna A., I. Suvorova A., Sh. Shimshelashvili L., I. Malyshev Yu., С. Круглов В., С. Лямина В., Т. Веденикин Ю., О. Бородовицына А., И. Суворова А., Ш. Шимшелашвили Л., И. Малышев Ю. (2014) “РЕПРОГРАММИРОВАНИЕ МЕХАНИЗМОВ СИНТЕЗА ОКСИДА АЗОТА У М1 И М2 ФЕНОТИПОВ ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ МАКРОФАГОВ МЫШЕЙ IN VITRO В ПРИСУТСТВИИ РАЗНЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ СЫВОРОТКИ // IN VITRO REPROGRAMMING OF NITRIC OXIDE-SYNTHETIC MECHANISMS FOR M1 AND M2 PHENOTYPES OF MURINE PERITONEAL MACROPHAGES: DEPENDENCE ON DIFFERENT SERUM CONCENTRATIONS” / spz:neicon:mimmun:y:2012:i:2:p:127-132

  1. Start
    2934
    Prefix
    Адрес для переписки: Малышев Игорь Юрьевич 105275, Москва, ул. Бориса Жигуленкова, 23/1. Тел.: (985) 766-24-40. E-mail: igor.malyshev@mtu-net.ru Введение Основным звеном патогенеза многих заболеваний является неадекватное течение воспалительной реакции
    Exact
    [1; 2]
    Suffix
    . В связи с этим, изучение возможности ее коррекции является одной из фундаментальных проблем медицины. Центральную роль в развитии воспаления играют макрофаги. При этом при взаимодействии макрофагов с внутриклеточными микробами – вирусами и бактериями и/или с IFNγ, формируется классический М1 фенотип макрофагов [11].
    (check this in PDF content)

  2. Start
    3258
    Prefix
    Центральную роль в развитии воспаления играют макрофаги. При этом при взаимодействии макрофагов с внутриклеточными микробами – вирусами и бактериями и/или с IFNγ, формируется классический М1 фенотип макрофагов
    Exact
    [11]
    Suffix
    . М1 макрофаги продуцируют много провоспалительных цитокинов IL-12, IL-18, IL-1β, TNFα, активных форм кислорода (АФК) и оксида азота (NO) [5; 10], обладают выраженными фагоцитарными и бактерицидными свойствами и интегрированы в Th1 ответ, который убивает бактерии, вирусы и опухолевые клетки [9].
    (check this in PDF content)

  3. Start
    3402
    Prefix
    При этом при взаимодействии макрофагов с внутриклеточными микробами – вирусами и бактериями и/или с IFNγ, формируется классический М1 фенотип макрофагов [11]. М1 макрофаги продуцируют много провоспалительных цитокинов IL-12, IL-18, IL-1β, TNFα, активных форм кислорода (АФК) и оксида азота (NO)
    Exact
    [5; 10]
    Suffix
    , обладают выраженными фагоцитарными и бактерицидными свойствами и интегрированы в Th1 ответ, который убивает бактерии, вирусы и опухолевые клетки [9]. Поверхностно-клеточными маркерами М1 являются МАРКО-рецептор, CD80, CD86, TLR-2, TLR-4, FcγRIII (CD16), FcγRII (CD32), CD62, IL-1r1, CD127 (9; 10); функциональным маркером – усиленная продукция NO за счет активации индуцибельной NO-синтазы (i
    (check this in PDF content)

  4. Start
    3556
    Prefix
    М1 макрофаги продуцируют много провоспалительных цитокинов IL-12, IL-18, IL-1β, TNFα, активных форм кислорода (АФК) и оксида азота (NO) [5; 10], обладают выраженными фагоцитарными и бактерицидными свойствами и интегрированы в Th1 ответ, который убивает бактерии, вирусы и опухолевые клетки
    Exact
    [9]
    Suffix
    . Поверхностно-клеточными маркерами М1 являются МАРКО-рецептор, CD80, CD86, TLR-2, TLR-4, FcγRIII (CD16), FcγRII (CD32), CD62, IL-1r1, CD127 (9; 10); функциональным маркером – усиленная продукция NO за счет активации индуцибельной NO-синтазы (iNOS) [8, 14], а морфологическим – округлая форма в культуре клеток [4].
    (check this in PDF content)

  5. Start
    3812
    Prefix
    Поверхностно-клеточными маркерами М1 являются МАРКО-рецептор, CD80, CD86, TLR-2, TLR-4, FcγRIII (CD16), FcγRII (CD32), CD62, IL-1r1, CD127 (9; 10); функциональным маркером – усиленная продукция NO за счет активации индуцибельной NO-синтазы (iNOS)
    Exact
    [8, 14]
    Suffix
    , а морфологическим – округлая форма в культуре клеток [4]. Если макрофаги взаимодействуют с экстраклеточными паразитами – грибами или гельминтами и/или с IL-4 и IL-13 они приобретают альтернативный M2 фенотип [11].
    (check this in PDF content)

  6. Start
    3874
    Prefix
    Поверхностно-клеточными маркерами М1 являются МАРКО-рецептор, CD80, CD86, TLR-2, TLR-4, FcγRIII (CD16), FcγRII (CD32), CD62, IL-1r1, CD127 (9; 10); функциональным маркером – усиленная продукция NO за счет активации индуцибельной NO-синтазы (iNOS) [8, 14], а морфологическим – округлая форма в культуре клеток
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Если макрофаги взаимодействуют с экстраклеточными паразитами – грибами или гельминтами и/или с IL-4 и IL-13 они приобретают альтернативный M2 фенотип [11]. М2 выделяют много антивоспалительных цитокинов IL-10 и IL-13, TGF-β [9; 11; 12], значительно меньше провоспалительных цитокинов, АФК и NO, по сравнению с М1.
    (check this in PDF content)

  7. Start
    4032
    Prefix
    , TLR-2, TLR-4, FcγRIII (CD16), FcγRII (CD32), CD62, IL-1r1, CD127 (9; 10); функциональным маркером – усиленная продукция NO за счет активации индуцибельной NO-синтазы (iNOS) [8, 14], а морфологическим – округлая форма в культуре клеток [4]. Если макрофаги взаимодействуют с экстраклеточными паразитами – грибами или гельминтами и/или с IL-4 и IL-13 они приобретают альтернативный M2 фенотип
    Exact
    [11]
    Suffix
    . М2 выделяют много антивоспалительных цитокинов IL-10 и IL-13, TGF-β [9; 11; 12], значительно меньше провоспалительных цитокинов, АФК и NO, по сравнению с М1. M2 макрофаги интегрированы в Th2 ответ, который убивает экстраклеточных паразитов.
    (check this in PDF content)

  8. Start
    4106
    Prefix
    Если макрофаги взаимодействуют с экстраклеточными паразитами – грибами или гельминтами и/или с IL-4 и IL-13 они приобретают альтернативный M2 фенотип [11]. М2 выделяют много антивоспалительных цитокинов IL-10 и IL-13, TGF-β
    Exact
    [9; 11; 12]
    Suffix
    , значительно меньше провоспалительных цитокинов, АФК и NO, по сравнению с М1. M2 макрофаги интегрированы в Th2 ответ, который убивает экстраклеточных паразитов. М2 регулируют воспаление, участвуют в ремоделировании и репарации поврежденных тканей, и способствуют ангиогенезу и опухолевому росту [9; 10].
    (check this in PDF content)

  9. Start
    4416
    Prefix
    M2 макрофаги интегрированы в Th2 ответ, который убивает экстраклеточных паразитов. М2 регулируют воспаление, участвуют в ремоделировании и репарации поврежденных тканей, и способствуют ангиогенезу и опухолевому росту
    Exact
    [9; 10]
    Suffix
    . Поверхностно-клеточными маркерами М2 являются маннозный рецептор (MRC1, CD206), CD163, FcεRII (CD23), CD209, FIZZ1, ST2, рецепторы SR-A и M60, CD184, TRAIL, IL-1rα [10], а морфологическим маркером – фибробластоподобная форма в культуре клеток.
    (check this in PDF content)

  10. Start
    4590
    Prefix
    М2 регулируют воспаление, участвуют в ремоделировании и репарации поврежденных тканей, и способствуют ангиогенезу и опухолевому росту [9; 10]. Поверхностно-клеточными маркерами М2 являются маннозный рецептор (MRC1, CD206), CD163, FcεRII (CD23), CD209, FIZZ1, ST2, рецепторы SR-A и M60, CD184, TRAIL, IL-1rα
    Exact
    [10]
    Suffix
    , а морфологическим маркером – фибробластоподобная форма в культуре клеток. При заболеваниях фенотип макрофагов может меняться. В одних случаях репрограммирование фенотипа является адекватным «терапевтическим» и обеспечивает выздоровление, в других – неадекватным «патогенетическим» и может способствовать прогрессированию заболевания.
    (check this in PDF content)

  11. Start
    5203
    Prefix
    В связи с этим возник колоссальный интерес к способам коррекции фенотипа и факторам репрограммирования макрофагов (ФРМ). Так, стало известно, что некоторые эндогенные ФРМ находятся в сыворотке крови, например, TGF-β, который программирует макрофаги в сторону М2 фенотипа
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Исходя из этого, мы предположили, что с помощью снижения или увеличения концентрации сыворотки в окружающей макрофагов среде, можно альтернативно репрограммировать структурно-функциональные свойства макрофагов в направлении М1 или М2 фенотипа.
    (check this in PDF content)

  12. Start
    5759
    Prefix
    Материалы и методы Эксперименты проводились на культуре перитонеальных макрофагов, выделенных от мышей линии C57BL/6 и BALB/c, которые имеют генетически детерминированный М1 и М2 фенотип макрофагов, соответственно
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Мышей наркотизировали хлоралгидратом (32,5 нг на 100 г массы тела, в/б). Перитонеальные макрофаги были выделены из перитонеального смыва мышей. Полученный смыв с макрофагами центрифугировали при 1000 оборотов/мин, 4 мин., при комнатной температуре.
    (check this in PDF content)

  13. Start
    7496
    Prefix
    В наших экспериментах, для активации макрофагов и оценки функциональной активности, после 12-часовой процедуры репрограммирования, мы добавляли липополисахарид (ЛПС) в концентрации 500 нг/мл на 24 часа. После этого оценивали функциональный маркер М1/М2 фенотипа – продукцию NO макрофагами спектрофотометрически, по содержанию нитритов в культуральной среде с помощью реакции Грисса
    Exact
    [14]
    Suffix
    и содержание iNOS методом Western blot анализ [16]. Для морфологической характеристики всего пула макрофагов макрофаги культивировали 24 часа, после чего оценивали структурный маркер М1/М2 фенотипа – форму клеток и рассчитывали морфологический индекс как соотношение количества макрофагов с фибробластоподобной формой (М2) к количеству макрофагов с округлой формой (М1) среди 100 клеток, подсчита
    (check this in PDF content)

  14. Start
    7547
    Prefix
    После этого оценивали функциональный маркер М1/М2 фенотипа – продукцию NO макрофагами спектрофотометрически, по содержанию нитритов в культуральной среде с помощью реакции Грисса [14] и содержание iNOS методом Western blot анализ
    Exact
    [16]
    Suffix
    . Для морфологической характеристики всего пула макрофагов макрофаги культивировали 24 часа, после чего оценивали структурный маркер М1/М2 фенотипа – форму клеток и рассчитывали морфологический индекс как соотношение количества макрофагов с фибробластоподобной формой (М2) к количеству макрофагов с округлой формой (М1) среди 100 клеток, подсчитанных в 5 квадратах поля зрения лунки.
    (check this in PDF content)

  15. Start
    12459
    Prefix
    Обращает на себя внимание лишь то, что во всех случаях продукция NO макрофагами C57BL/6 была выше, чем макрофагами BALB/c. Это объясняется тем, что макрофаги C57BL/6 генетически более склонны к проявлению М1 фенотипа, BALB/c – М2 фенотипа
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Обсуждение Представленные здесь данные подтвердили нашу гипотезу о том что при отсутствии в среде сыворотки можно репрограммировать морфологию и функциональную активность продукции NO в сторону М1 фенотипа, и напротивя. при увеличении концентрации сыворотки – в сторону М2 фенотипа.
    (check this in PDF content)

  16. Start
    12993
    Prefix
    Первый вопрос, который возникает при анализе полученных результатов: какой из эндогенных ФРМ играл ключевую роль в репрограммировании NO-продуцирующей активности макрофагов в наших опытах? Потенциально это могли бы быть IFNγ – ФРМ на М1 (ФРМ1)
    Exact
    [3]
    Suffix
    , IL-4 – ФРМ2 [3], или TGF-β – ФРМ2 [4]. Ранее было показано, что изменение концентрации TGF-β в диапазоне изменений концентрации сыворотки влияет на один из важных маркеров М1/М2 фенотипа – продукцию NO [4].
    (check this in PDF content)

  17. Start
    13010
    Prefix
    Первый вопрос, который возникает при анализе полученных результатов: какой из эндогенных ФРМ играл ключевую роль в репрограммировании NO-продуцирующей активности макрофагов в наших опытах? Потенциально это могли бы быть IFNγ – ФРМ на М1 (ФРМ1) [3], IL-4 – ФРМ2
    Exact
    [3]
    Suffix
    , или TGF-β – ФРМ2 [4]. Ранее было показано, что изменение концентрации TGF-β в диапазоне изменений концентрации сыворотки влияет на один из важных маркеров М1/М2 фенотипа – продукцию NO [4]. Вместе с тем нельзя исключить роль и других ФРМ.
    (check this in PDF content)

  18. Start
    13031
    Prefix
    Первый вопрос, который возникает при анализе полученных результатов: какой из эндогенных ФРМ играл ключевую роль в репрограммировании NO-продуцирующей активности макрофагов в наших опытах? Потенциально это могли бы быть IFNγ – ФРМ на М1 (ФРМ1) [3], IL-4 – ФРМ2 [3], или TGF-β – ФРМ2
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Ранее было показано, что изменение концентрации TGF-β в диапазоне изменений концентрации сыворотки влияет на один из важных маркеров М1/М2 фенотипа – продукцию NO [4]. Вместе с тем нельзя исключить роль и других ФРМ.
    (check this in PDF content)

  19. Start
    13199
    Prefix
    Потенциально это могли бы быть IFNγ – ФРМ на М1 (ФРМ1) [3], IL-4 – ФРМ2 [3], или TGF-β – ФРМ2 [4]. Ранее было показано, что изменение концентрации TGF-β в диапазоне изменений концентрации сыворотки влияет на один из важных маркеров М1/М2 фенотипа – продукцию NO
    Exact
    [4]
    Suffix
    . Вместе с тем нельзя исключить роль и других ФРМ. Поэтому, на сегодняшний день, вопрос о главных факторах репрограммирования сыворотки остается открытым. Вероятно, что эксперименты с блокирующими антителами могли бы ответить на вопрос о роли разных цитокинов в репрограммирующих эффектах сыворотки.
    (check this in PDF content)

  20. Start
    14007
    Prefix
    Для успешного удаления патогена необходим запуск специфического адаптивного иммунного ответа, либо по клеточному Th1, либо по гуморальному Th2 типу. Th1 ответ обезвреживает вирусы, бактерии и раковые клетки
    Exact
    [11]
    Suffix
    , а Th2 – экстраклеточных паразитов и токсины [7]. Данные литературы позволяют считать, что фенотип макрофагов не только определяет характер врожденного иммунного ответа, но и в значительной мере предопределяет выбор между развитием Th1 или Th2 иммунными ответами.
    (check this in PDF content)

  21. Start
    14057
    Prefix
    Для успешного удаления патогена необходим запуск специфического адаптивного иммунного ответа, либо по клеточному Th1, либо по гуморальному Th2 типу. Th1 ответ обезвреживает вирусы, бактерии и раковые клетки [11], а Th2 – экстраклеточных паразитов и токсины
    Exact
    [7]
    Suffix
    . Данные литературы позволяют считать, что фенотип макрофагов не только определяет характер врожденного иммунного ответа, но и в значительной мере предопределяет выбор между развитием Th1 или Th2 иммунными ответами.
    (check this in PDF content)

  22. Start
    15331
    Prefix
    0% 10% 20% 0% 10% 20% С57BL/6 M1 M2 M1 M2 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 BALB/c А АБ Б М1 фенотип макрофагов и их провоспалительные цитокины TNFα, IL-12 и IFNγ стимулируют развитие Th0 клеток в Th1 клетки, а М2 фенотип макрофагов и их антивоспалительные цитокины IL-10 и IL-4 в Th2
    Exact
    [15]
    Suffix
    . Использование только двух маркеров не позволяют с уверенностью оценивать репрограммирование фенотипа макрофагов. Для этого необходимо оценить изменения других характеристик макрофагов, таких как поверхностно-клеточные маркеры и продукция цитокинов.
    (check this in PDF content)

  23. Start
    17546
    Prefix
    В свете наших данных, это будет способствовать репрограммированию макрофагов на М2 фенотип. Такое программирование, вероятно, имеет «терапевтический» характер, поскольку М2 фенотип усиливает процессы ремоделирования и репарации поврежденных тканей и способствует ангиогенезу
    Exact
    [6]
    Suffix
    . Аналогичные по сути рассуждения применимы для объяснения иммунологических событий при развитии опухоли, которое сопровождается значительным прорастанием ткани новыми сосудами, при ишемии миокарда и других органов, различных ранениях с повреждением сосудов, повреждениях в легких, и других заболеваниях, сопровождающихся кровотечением, гиперемией или напротив недостаточным притоком крови –
    (check this in PDF content)

  24. Start
    18496
    Prefix
    Например, при лечении последствий инсульта, как ишемического, так и геморрагического – использовать терапию, направленную на репрограммирование макрофагов (микроглии) в сторону М2 фенотипа, а при опухолевом росте – в сторону М1. В патогенезе заболеваний легких, таких как хроническая обструктивная болезнь легких или саркоидоз, ключевую роль играет М1 фенотип
    Exact
    [13, 18]
    Suffix
    , а в патогенезе других, таких как бронхиальная астма – М2 фенотип [17]. Соответственно, технология «терапевтического» репрограммирования макрофагов, должна учитывать эти особенности. В целом наши данные позволяют дополнить существующие знания о роли факторов окружающей среды в регуляции активности макрофагов и обозначить новые иммунологические подходы для лечения заболеваний, связанных с «н
    (check this in PDF content)

  25. Start
    18572
    Prefix
    В патогенезе заболеваний легких, таких как хроническая обструктивная болезнь легких или саркоидоз, ключевую роль играет М1 фенотип [13, 18], а в патогенезе других, таких как бронхиальная астма – М2 фенотип
    Exact
    [17]
    Suffix
    . Соответственно, технология «терапевтического» репрограммирования макрофагов, должна учитывать эти особенности. В целом наши данные позволяют дополнить существующие знания о роли факторов окружающей среды в регуляции активности макрофагов и обозначить новые иммунологические подходы для лечения заболеваний, связанных с «неадекватным» воспалением, ишемическими повреждениями органов или кровои
    (check this in PDF content)