The 15 reference contexts in paper N. Duplik V., I. Koroleva V., K. Grabovskaya B., A. Suvorov  N., H. Дуплик В., И. Королева В., К. Грабовская Б., А. Суворов Н. (2014) “РЕКОМБИНАНТНЫЕ ПОЛИПЕПТИДЫ НА ОСНОВЕ С5a ПЕПТИДАЗЫ КАК ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ ВАКЦИН ПРОТИВ СТРЕПТОКОККА ГРУППЫ // RECOMBINANT POLYPEPTIDES BASED ON C5A PEPTIDASE AS POTENTIAL VACCINE COMPONENTS AGAINST GROUP B STREPTOCOCCI” / spz:neicon:mimmun:y:2011:i:1:p:41-48

  1. Start
    3391
    Prefix
    Immunol., 2011, vol. 13, N 1, pp 41-48) Keywords: group B streptococci, C5a peptidase, recombinant polypeptides, immunogenicity, opsonophagocytosis Введение Стрептококк группы В (СГВ) остается наиболее острой проблемой в области здравоохранения, поскольку вызывает серьезные осложнения в ходе беременности женщин и является основной причиной пневмонии, менингита и сепсиса у новорожденных
    Exact
    [11, 16]
    Suffix
    . Особую озабоченность вызывают случаи стремительного развития стрептококкового сепсиса, которые приводят к высокой смертности новорожденных в первые дни жизни [10, 13]. Также в группу риска развития СГВ инфекции входят лица пожилого возраста и лица с пониженным состоянием иммунной системы [12, 14].
    (check this in PDF content)

  2. Start
    3560
    Prefix
    группы В (СГВ) остается наиболее острой проблемой в области здравоохранения, поскольку вызывает серьезные осложнения в ходе беременности женщин и является основной причиной пневмонии, менингита и сепсиса у новорожденных [11, 16]. Особую озабоченность вызывают случаи стремительного развития стрептококкового сепсиса, которые приводят к высокой смертности новорожденных в первые дни жизни
    Exact
    [10, 13]
    Suffix
    . Также в группу риска развития СГВ инфекции входят лица пожилого возраста и лица с пониженным состоянием иммунной системы [12, 14]. Традиционное применение антибиотикотерапии для лечения заболеваний, вызванных СГВ, оказывается не всегда эффективно, вследствие появления все большего количества устойчивых к антибиотикам штаммов.
    (check this in PDF content)

  3. Start
    3694
    Prefix
    Особую озабоченность вызывают случаи стремительного развития стрептококкового сепсиса, которые приводят к высокой смертности новорожденных в первые дни жизни [10, 13]. Также в группу риска развития СГВ инфекции входят лица пожилого возраста и лица с пониженным состоянием иммунной системы
    Exact
    [12, 14]
    Suffix
    . Традиционное применение антибиотикотерапии для лечения заболеваний, вызванных СГВ, оказывается не всегда эффективно, вследствие появления все большего количества устойчивых к антибиотикам штаммов.
    (check this in PDF content)

  4. Start
    4838
    Prefix
    Однако невысокая иммуногенность самого полисахарида и существование 10-капсульных серотипов СГВ явились существенным недостатком полисахаридных вакцин. В дальнейшем исследователи для повышения иммуногенности стали конъюгировать полисахариды с белками и другими носителями
    Exact
    [5, 18, 20]
    Suffix
    . Параллельно начали создаваться вакцины с использованием белковых факторов патогенности СГВ в качестве вакцинных компонентов. В настоящее время наиболее перспективными представляются разработки поликомпонентных вакцин, состоящих из нескольких белков либо их частей [15].
    (check this in PDF content)

  5. Start
    5118
    Prefix
    Параллельно начали создаваться вакцины с использованием белковых факторов патогенности СГВ в качестве вакцинных компонентов. В настоящее время наиболее перспективными представляются разработки поликомпонентных вакцин, состоящих из нескольких белков либо их частей
    Exact
    [15]
    Suffix
    . Развитие данного направления стало возможным в первую очередь с внедрением новых методов генетической инженерии [4]. В представленной работе в качестве потенциального вакцинного препарата был выбран известный фактор патогенности СГВ – С5а пептидаза (SCPB).
    (check this in PDF content)

  6. Start
    5237
    Prefix
    В настоящее время наиболее перспективными представляются разработки поликомпонентных вакцин, состоящих из нескольких белков либо их частей [15]. Развитие данного направления стало возможным в первую очередь с внедрением новых методов генетической инженерии
    Exact
    [4]
    Suffix
    . В представленной работе в качестве потенциального вакцинного препарата был выбран известный фактор патогенности СГВ – С5а пептидаза (SCPB). С5а пептидаза специфически расщепляет С5а фракцию комплемента и, как следствие, препятствует миграции полиморфноядерных лейкоцитов в очаг воспаления [7, 19].
    (check this in PDF content)

  7. Start
    5533
    Prefix
    В представленной работе в качестве потенциального вакцинного препарата был выбран известный фактор патогенности СГВ – С5а пептидаза (SCPB). С5а пептидаза специфически расщепляет С5а фракцию комплемента и, как следствие, препятствует миграции полиморфноядерных лейкоцитов в очаг воспаления
    Exact
    [7, 19]
    Suffix
    . Кроме того, было продемонстрировано, что эта клеточносвязанная протеаза обладает свойствами адгезина и инвазина, взаимодействует с фибринектином и непосредственно с эпителиальными клетками человека [6, 8].
    (check this in PDF content)

  8. Start
    5741
    Prefix
    Кроме того, было продемонстрировано, что эта клеточносвязанная протеаза обладает свойствами адгезина и инвазина, взаимодействует с фибринектином и непосредственно с эпителиальными клетками человека
    Exact
    [6, 8]
    Suffix
    . Интерес к SCPB также обусловлен ее высокой консервативностью и распространенностью [9]. В предыдущей работе на основе SCPB нами был получен рекомбинантный полипептид молекулярной массой 43 кДа с выраженными иммуногенными и антимикробными свойствами [2].
    (check this in PDF content)

  9. Start
    5833
    Prefix
    Кроме того, было продемонстрировано, что эта клеточносвязанная протеаза обладает свойствами адгезина и инвазина, взаимодействует с фибринектином и непосредственно с эпителиальными клетками человека [6, 8]. Интерес к SCPB также обусловлен ее высокой консервативностью и распространенностью
    Exact
    [9]
    Suffix
    . В предыдущей работе на основе SCPB нами был получен рекомбинантный полипептид молекулярной массой 43 кДа с выраженными иммуногенными и антимикробными свойствами [2]. Задачей данного исследования стало создание низкомолекулярных рекомбинантных полипептидов на основе SCPB, способных стимулировать выработку антимикробных специфических иммуноглобулинов.
    (check this in PDF content)

  10. Start
    6002
    Prefix
    Интерес к SCPB также обусловлен ее высокой консервативностью и распространенностью [9]. В предыдущей работе на основе SCPB нами был получен рекомбинантный полипептид молекулярной массой 43 кДа с выраженными иммуногенными и антимикробными свойствами
    Exact
    [2]
    Suffix
    . Задачей данного исследования стало создание низкомолекулярных рекомбинантных полипептидов на основе SCPB, способных стимулировать выработку антимикробных специфических иммуноглобулинов. Необходимость получения высокоэффективных низкомолекулярных рекомбинантных полипептидов в качестве вакцинных препаратов стала особенно востребованной в последние годы при разработках поликомпонентных вакцин.
    (check this in PDF content)

  11. Start
    9498
    Prefix
    Молекулярную массу (М.М.) рекомбинантных полипептидов оценивали в SDS-PAGE, сравнивая их подвижность с подвижностью белков с известными молекулярными массами (М.М. = 10 ÷ 250 кДа, «Precision Plus Protein Standards», Bio-Rad, США) на одной и той же пластинке геля. Количественное определение белка в растворах проводили по методу Лоури
    Exact
    [17]
    Suffix
    . Иммунологические методы. Гуморальный иммунный ответ к рекомбинантным полипептидам изучали на беспородных белых мышах (самцах массой 16 ÷ 18 г), полученных из питомника «Рапполово», РАМН. Иммунизацию проводили двукратно и подкожно с адъювантом гидроокиси алюминия (Pierce, США).
    (check this in PDF content)

  12. Start
    10268
    Prefix
    Конечная концентрация полипептида (К) при 1-ой инъекции составляла 100 мкг/мл и при второй инъекции – 50 мкг/мл; инъекции проводили на 1-й и 22-й дни соответственно. Наличие сывороточных специфических антител к рекомбинантным полипептидам определяли, используя пул сывороток от 4-х животных, методом иммуноферментного анализа, как описано
    Exact
    [3]
    Suffix
    . Для детекции IgG антител использовали белок А стафилококка, ковалентно связанный с пероксидазой хрена, в концентрации 10-7 моль/л. Для визуализации реакции использовали 0,5 мкг/мл о-фенилендиамин в 150 мМ фосфатноцитратном буфере (рН = 5,0) с добавлением 30% перекиси водорода.
    (check this in PDF content)

  13. Start
    10835
    Prefix
    Реакцию регистрировали при длине волны 492 нм с помощью прибора Anthos 2010 (Anthos, Австрия). Опсонизирующую активность антител, полученных к рекомбинантным полипептидам, изучали на суточном монослое мышиных перитонеальных макрофагов, как описано у Грабовской К.Б. с соавторами
    Exact
    [1]
    Suffix
    . Стрептококковую суспензию в концентрации 1,0 × 107 КОЕ/мл после предварительной инкубации (при 37 °С, 30 мин, 5% СО2) с сыворотками (в разведении 1:50) добавляли к макрофагам (при 37 °С, 30 мин, 5% СО2).
    (check this in PDF content)

  14. Start
    12189
    Prefix
    Оценку антимикробных свойств мышиных антител, полученных к полипептидам, проводили путем определения количества СГВ в селезенках мышей на разных сроках развития инфекции (по 3 мыши на каждый срок), высевая на чашки с кровяным агаром серию десятикратных разведений каждого гомогената селезенки, как описано у Грабовской К.Б. с соавторами
    Exact
    [1]
    Suffix
    . Статистическую обработку результатов проводили по методу Стьюдента–Фишера. Компьютерный анализ. Нуклеотидная последовательность гена scpB была получена в базе данных PabMed и GeneBank (http:/www.ncbi. nlm.nih.gov/).
    (check this in PDF content)

  15. Start
    23650
    Prefix
    Эти эксперименты подтвердили полученные ранее результаты опсонофагоцитарного теста, в котором активность анти-SCPB1а и анти-SCPB3а антител проявлялась усилением фагоцитирующей способности макрофагов. С5а пептидаза давно привлекает внимание ученых и достаточно хорошо исследована
    Exact
    [6-9, 19]
    Suffix
    . В представленной здесь работе впервые были изучены небольшие фрагменты С5а пептидазы, расположенные в N-терминальной и центральной части молекулы. Полученные результаты указывают на то, что эти части молекулы содержат эпитопы, ответственные индукцию антител класса G, способствующих опсонизации СГВ.
    (check this in PDF content)