The 31 reference contexts in paper E. Kiseleva P., O. Tsyganova V., K. Mikhailopulo I., O. Sviridov V., Y. Demidchic E., A. Izhik V., Y. Knirel A., G. Novik I., Е. Киселева П., О. Цыганова В., К. Михайлопуло И., О. Свиридов В., Ю. Демидчик Е.,  А. Ижик В.,  Ю. Книрель А., Г. Новик И. (2014) “ВОЗМОЖНАЯ РОЛЬ ПРОБИОТИЧЕСКИХ МИКРООРГАНИЗМОВ РОДА BIFIDOBACTERIUM И LACTOBACILLUS В ПАТОГЕНЕЗЕ АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ // POSSIBLE ROLE OF PROBIOTIC MICROORGANISMS OF BIFIDOBACTERIUM AND LACTOBACILLUS GENUS IN PATHOGENESIS OF AUTOIMMUNE THYROID DISEASES” / spz:neicon:mimmun:y:2010:i:2:p:71-80

  1. Start
    3474
    Prefix
    Введение По данным Всемирной организации здравоохранения, в 21 веке хронические неинфекционные заболевания щитовидной железы (ЩЖ) приближаются по частоте встречаемости к наиболее распространенным сердечно-сосудистым заболеваниям и диабету
    Exact
    [6, 14]
    Suffix
    . Среди указанных заболеваний ЩЖ выделяют большую группу аутоиммунных патологий, развивающихся в результате реакции иммунной системы на собственные белки ЩЖ (тироантигены) – тиропероксидазу (ТПО), тироглобулин (ТГ) и рецептор тиротропного гормона [27] и проявляющихся в виде нарушения эндокринной функции ЩЖ и ее деструкции [19].
    (check this in PDF content)

  2. Start
    3731
    Prefix
    Среди указанных заболеваний ЩЖ выделяют большую группу аутоиммунных патологий, развивающихся в результате реакции иммунной системы на собственные белки ЩЖ (тироантигены) – тиропероксидазу (ТПО), тироглобулин (ТГ) и рецептор тиротропного гормона
    Exact
    [27]
    Suffix
    и проявляющихся в виде нарушения эндокринной функции ЩЖ и ее деструкции [19]. Аутоантитела (ААТ) к тироантигенам играют важную роль в патогенезе аутоиммунных заболеваний ЩЖ (АЗЩЖ) и являются признанными диагностическими маркерами этих заболеваний [12, 19].
    (check this in PDF content)

  3. Start
    3810
    Prefix
    Среди указанных заболеваний ЩЖ выделяют большую группу аутоиммунных патологий, развивающихся в результате реакции иммунной системы на собственные белки ЩЖ (тироантигены) – тиропероксидазу (ТПО), тироглобулин (ТГ) и рецептор тиротропного гормона [27] и проявляющихся в виде нарушения эндокринной функции ЩЖ и ее деструкции
    Exact
    [19]
    Suffix
    . Аутоантитела (ААТ) к тироантигенам играют важную роль в патогенезе аутоиммунных заболеваний ЩЖ (АЗЩЖ) и являются признанными диагностическими маркерами этих заболеваний [12, 19]. Установлено, что в основе патогенеза АЗЩЖ лежит частичный дефект иммунологического контроля, связанный с врожденным дефицитом супрессорной функции Т-лимфоцитов [23], а механизм и клинические проявления этих заболев
    (check this in PDF content)

  4. Start
    3987
    Prefix
    реакции иммунной системы на собственные белки ЩЖ (тироантигены) – тиропероксидазу (ТПО), тироглобулин (ТГ) и рецептор тиротропного гормона [27] и проявляющихся в виде нарушения эндокринной функции ЩЖ и ее деструкции [19]. Аутоантитела (ААТ) к тироантигенам играют важную роль в патогенезе аутоиммунных заболеваний ЩЖ (АЗЩЖ) и являются признанными диагностическими маркерами этих заболеваний
    Exact
    [12, 19]
    Suffix
    . Установлено, что в основе патогенеза АЗЩЖ лежит частичный дефект иммунологического контроля, связанный с врожденным дефицитом супрессорной функции Т-лимфоцитов [23], а механизм и клинические проявления этих заболеваний зависят от соотношения различных клонов Т-лимфоцитов-хелперов и их растворимых факторов – цитокинов [24].
    (check this in PDF content)

  5. Start
    4156
    Prefix
    Аутоантитела (ААТ) к тироантигенам играют важную роль в патогенезе аутоиммунных заболеваний ЩЖ (АЗЩЖ) и являются признанными диагностическими маркерами этих заболеваний [12, 19]. Установлено, что в основе патогенеза АЗЩЖ лежит частичный дефект иммунологического контроля, связанный с врожденным дефицитом супрессорной функции Т-лимфоцитов
    Exact
    [23]
    Suffix
    , а механизм и клинические проявления этих заболеваний зависят от соотношения различных клонов Т-лимфоцитов-хелперов и их растворимых факторов – цитокинов [24]. Пусковые механизмы развития АЗЩЖ остаются невыясненными.
    (check this in PDF content)

  6. Start
    4318
    Prefix
    Установлено, что в основе патогенеза АЗЩЖ лежит частичный дефект иммунологического контроля, связанный с врожденным дефицитом супрессорной функции Т-лимфоцитов [23], а механизм и клинические проявления этих заболеваний зависят от соотношения различных клонов Т-лимфоцитов-хелперов и их растворимых факторов – цитокинов
    Exact
    [24]
    Suffix
    . Пусковые механизмы развития АЗЩЖ остаются невыясненными. В списке внешних этиологических факторов, потенциально способных приводить к реализации генетической предрасположенности к развитию АЗЩЖ или осложнять протекание этих заболеваний, одно из первых мест занимают инфекционные агенты [21].
    (check this in PDF content)

  7. Start
    4614
    Prefix
    В списке внешних этиологических факторов, потенциально способных приводить к реализации генетической предрасположенности к развитию АЗЩЖ или осложнять протекание этих заболеваний, одно из первых мест занимают инфекционные агенты
    Exact
    [21]
    Suffix
    . Установлено, что бактерии и вирусы, компоненты которых имеют гомологию структуры с собственными белками организма человека (в частности тироантигенами), могут провоцировать развитие АЗЩЖ и других аутоиммунных заболеваний по механизму молекулярной мимикрии [8, 10, 15, 21].
    (check this in PDF content)

  8. Start
    4879
    Prefix
    Установлено, что бактерии и вирусы, компоненты которых имеют гомологию структуры с собственными белками организма человека (в частности тироантигенами), могут провоцировать развитие АЗЩЖ и других аутоиммунных заболеваний по механизму молекулярной мимикрии
    Exact
    [8, 10, 15, 21]
    Suffix
    . В этой связи представляет интерес выяснение роли в патогенезе АЗЩЖ пробиотических микроорганизмов (ПМ) рода Bifidobacterium и Lactobacillus, являющихся симбионтами желудочно-кишечного тракта человека и животных.
    (check this in PDF content)

  9. Start
    5481
    Prefix
    Такой интерес связан, в первую очередь, с широким применением живых ПМ и их компонентов в составе традиционных и диетических продуктов питания, а также фармакологических препаратов профилактического и лечебного действия. Кроме того, он обусловлен информацией о возможности нарушения иммунологической толерантности организма хозяина к антигенам симбиотической микрофлоры
    Exact
    [22]
    Suffix
    в результате проникновения целых клеток ПМ и их компонентов через кишечный эпителий и их последующего поступления в кровь. Вероятность этого возрастает при повреждении слизистой оболочки кишечника в результате воспалительного процесса или цитотоксической химиотерапии, а также при аномальном росте кишечной микрофлоры или увеличении уровня экскреции компонентов бактерий под влиянием антибиоти
    (check this in PDF content)

  10. Start
    5886
    Prefix
    Вероятность этого возрастает при повреждении слизистой оболочки кишечника в результате воспалительного процесса или цитотоксической химиотерапии, а также при аномальном росте кишечной микрофлоры или увеличении уровня экскреции компонентов бактерий под влиянием антибиотиков
    Exact
    [22]
    Suffix
    . Дополнительными аргументами в пользу необходимости проверки возможной роли ПМ в качестве фактора, провоцирующего развитие АЗЩЖ, являются известные эффекты ПМ, реализующиеся на уровне иммунной системы организмахозяина – модуляция численности субпопуляций лимфоцитов периферической крови, фагоцитарной активности нейтрофилов, синтеза иммуноглобулинов и медиаторов иммунной системы и др. [21, 27].
    (check this in PDF content)

  11. Start
    6284
    Prefix
    Дополнительными аргументами в пользу необходимости проверки возможной роли ПМ в качестве фактора, провоцирующего развитие АЗЩЖ, являются известные эффекты ПМ, реализующиеся на уровне иммунной системы организмахозяина – модуляция численности субпопуляций лимфоцитов периферической крови, фагоцитарной активности нейтрофилов, синтеза иммуноглобулинов и медиаторов иммунной системы и др.
    Exact
    [21, 27]
    Suffix
    . Цель работы – исследование эффектов ПМ в иммунохимических системах, включающих тироантигены и специфические ААТ, ориентированное на выяснение роли ПМ в механизмах развития АЗЩЖ. Задачи: 1. Определение частоты встречаемости антител к компонентам ПМ рода Bifidobacterium и Lactobacillus в образцах сыворотки крови больных АЗЩЖ и здоровых доноров. 2.
    (check this in PDF content)

  12. Start
    8364
    Prefix
    Тироантигены выделяли из послеоперационной ЩЖ человека, полученной из Минского городского онкологического диспансера МЗ РБ. Очистку ТПО проводили методом иммуноаффинной хроматографии из фракции гомогената ЩЖ, оставшейся после удаления центрифугированием ядер, митохондрий и микросом
    Exact
    [14]
    Suffix
    . ТГ получали из той же фракции осаждением сульфатом аммония (60% насыщения) и гель-фильтрацией перерастворенного осадка на акрилексе Р-200 «Bio-Rad» (США). Чистота тироантигенов по результатам электрофореза в 10% полиакриламидном геле в присутствии 0,2% додецилсульфата натрия соответствовала 95%.
    (check this in PDF content)

  13. Start
    9354
    Prefix
    Очищенные Ig человека выделяли из препарата, полученного объединением образцов сыворотки крови 10 здоровых доноров, последовательным осаждением альбумина и Ig каприловой кислотой и сульфатом аммония соответственно
    Exact
    [25]
    Suffix
    . Концентрацию Ig определяли спектрофотометрически, используя D280 нм, 1 см, 1 мг/мл = 1,35. ААТ к тироантигенам выделяли из препарата, полученного объединением образцов сыворотки крови 10 больных АЗЩЖ методом антигенаффинной хроматографии на сорбентах с иммобилизованными ТПО и ТГ [19].
    (check this in PDF content)

  14. Start
    9643
    Prefix
    Концентрацию Ig определяли спектрофотометрически, используя D280 нм, 1 см, 1 мг/мл = 1,35. ААТ к тироантигенам выделяли из препарата, полученного объединением образцов сыворотки крови 10 больных АЗЩЖ методом антигенаффинной хроматографии на сорбентах с иммобилизованными ТПО и ТГ
    Exact
    [19]
    Suffix
    . Количественное определение ААТ к ТПО и ТГ в исходных сыворотках и конечных препаратах проводили с использованием наборов реагентов «ИФА-антиТПО» и «ИФА-анти-ТГ» (УП «ХОП ИБОХ НАН Беларуси»). Очищенные ААТ хранили при -20 °С, размораживая не более 1 раза непосредственно перед использованием.
    (check this in PDF content)

  15. Start
    11439
    Prefix
    клеток бактерий с Ig в лунки планшетов вносили по 0,1 мл образцов сывороток крови, предварительно разведенных в 100 раз, или очищенных общих Ig человека, или очищенных ААТ к ТПО (ТГ), или тех же компонентов в присутствии ТПО (ТГ). В отдельных экспериментах на первой стадии анализа инкубировали иммобилизованные клетки с ТПО или ТГ, а на второй стадии – с МАТ клонов А1 или F8 к ТПО
    Exact
    [27]
    Suffix
    или МАТ клона 5Н8 к ТГ соответственно, полученными в Институте биоорганической химии НАН Беларуси. В качестве инкубационной среды в ИФА с иммобилизованными клетками использовали буфер 1, содержащий 0,02% Tween 20 и 1% бычий сывороточный альбумин.
    (check this in PDF content)

  16. Start
    12043
    Prefix
    Выявляли Ig человека и МАТ к ТПО (ТГ) на твердой фазе с использованием конъюгатов пероксидазы из корней хрена (ПХ) с белком А «Sigma» (США) и антителами овцы против Ig мыши соответственно. Конъюгаты получали методом синтеза, основанным на окислении олигосахаридных цепей ПХ перйодатом Na
    Exact
    [25]
    Suffix
    . После проведения и остановки ферментативной реакции ПХ [27] измеряли значения оптической плотности раствора в лунках при длине волны 450 нм (D450) в многоканальном иммуноферментном анализаторе «АИФ М/340» (Беларусь).
    (check this in PDF content)

  17. Start
    12148
    Prefix
    Выявляли Ig человека и МАТ к ТПО (ТГ) на твердой фазе с использованием конъюгатов пероксидазы из корней хрена (ПХ) с белком А «Sigma» (США) и антителами овцы против Ig мыши соответственно. Конъюгаты получали методом синтеза, основанным на окислении олигосахаридных цепей ПХ перйодатом Na [25]. После проведения и остановки ферментативной реакции ПХ
    Exact
    [27]
    Suffix
    измеряли значения оптической плотности раствора в лунках при длине волны 450 нм (D450) в многоканальном иммуноферментном анализаторе «АИФ М/340» (Беларусь). Результаты Определение частоты встречаемости антител к компонентам ПМ рода Bifidobacterium и Lactobacillus в образцах сыворотки крови больных АЗЩЖ и здоровых доноров С целью установления возможной роли ПМ в патогенезе АЗЩЖ проводили пар
    (check this in PDF content)

  18. Start
    14215
    Prefix
    Следует отметить, что обнаруженное ранее наличие антител к антигенам Yersinia enterocolitica у более 70% больных АЗЩЖ явилось основанием для заключения о возможном участии этого микроорганизма в патогенезе данной группы заболеваний
    Exact
    [21]
    Suffix
    . Следует отметить, что в исследуемой выборке корреляция значений D450 по результатам ИФА антител к БФ B. bifidum 791 и L. plantarum B-01 составляет не более 20%, в то время как значение указанного показателя для близкородственных штаммов B. bifidum 791 и B. longum B379M равно 97%, что позволяет предположить независимое участие микроорганизмов родов Bifidobacterium и Lactobacillus в пато
    (check this in PDF content)

  19. Start
    16475
    Prefix
    По результатам ИФА с использованием клеток штаммов 1-4, иммобилизованных из суспензий с указанными выше концентрациями, среднее значение D450 в группе образцов сыворотки больных АЗЩЖ (n = 35), содержащих (100-3200) МЕ/мл ААТ к ТПО и (или) ААТ к ТГ, перекрестно реагирующих с ТПО
    Exact
    [17]
    Suffix
    , оказалось только на 10-15 % выше (в зависимости от штамма) по сравнению со значением того же показателя в группе здоровых доноров (n = 69). Учитывая установленную нами концентрационную зависимость связывания Ig сыворотки крови человека бактериальными клетками (табл. 1), полученные данные можно объяснить тем, что ААТ к тироантигенам являются минорной фракцией общих Ig сыворотки крови больных
    (check this in PDF content)

  20. Start
    16954
    Prefix
    Учитывая установленную нами концентрационную зависимость связывания Ig сыворотки крови человека бактериальными клетками (табл. 1), полученные данные можно объяснить тем, что ААТ к тироантигенам являются минорной фракцией общих Ig сыворотки крови больных АЗЩЖ (концентрации 0,05-1,4 г/л
    Exact
    [23]
    Suffix
    и 7-16 г/л [25] соответственно). В этой связи далее исследовали связывание клетками штаммов 1-4 очищенных ААТ к ТПО (ТГ) и общих Ig, выделенных из сыворотки крови здоровых доноров (рис. 1). Наблюдаемая пропорция значений D450, отражающая связывание клетками Ig, находящихся в составе 5 препаратов, соответствует пропорции концентраций иммунореактивных ААТ к ТПО (ТГ), а не общих Ig.
    (check this in PDF content)

  21. Start
    16968
    Prefix
    Учитывая установленную нами концентрационную зависимость связывания Ig сыворотки крови человека бактериальными клетками (табл. 1), полученные данные можно объяснить тем, что ААТ к тироантигенам являются минорной фракцией общих Ig сыворотки крови больных АЗЩЖ (концентрации 0,05-1,4 г/л [23] и 7-16 г/л
    Exact
    [25]
    Suffix
    соответственно). В этой связи далее исследовали связывание клетками штаммов 1-4 очищенных ААТ к ТПО (ТГ) и общих Ig, выделенных из сыворотки крови здоровых доноров (рис. 1). Наблюдаемая пропорция значений D450, отражающая связывание клетками Ig, находящихся в составе 5 препаратов, соответствует пропорции концентраций иммунореактивных ААТ к ТПО (ТГ), а не общих Ig.
    (check this in PDF content)

  22. Start
    21405
    Prefix
    Основанием для такого предположения является способность ТПО к образованию гидрофобных агрегатов с другими природными биополимерами, в частности Ig, отмеченная в ряде работ, посвященных разработке методов очистки этого белка
    Exact
    [14, 6]
    Suffix
    . В составе таких комплексов ТПО может взаимодействовать с клетками ПМ непосредственно (ПМ – ТПО (– Ig) n) или через Ig, связавшиеся с обнаруженными нами компонентами ПМ (ПМ – Ig – ТПО (– Ig) n-1).
    (check this in PDF content)

  23. Start
    24588
    Prefix
    Известно, что эти МАТ взаимодействуют с Ка~108 М-1 с пространственно изолированными конформационными эпитопами антигена, находящимися в иммунодоминантной области ТПО (эпитоп МАТ F8), являющейся преимущественным местом связывания ААТ, и за пределами этой области (эпитоп МАТ A1)
    Exact
    [27]
    Suffix
    . Как видно из таблицы 2, значения D450, отражающие количества МАТ на твердой фазе, находятся в прямой зависимости от концентраций ТПО в растворе, что свидетельствует о связывании этих Ig с эпитопами тироантигена, а не с компонентами микроорганизмов.
    (check this in PDF content)

  24. Start
    26435
    Prefix
    Кроме того, установлена зависимость между наличием в сыворотке крови человека ААТ к ТПО и антител к компонентам БФ Lactobacillus plantarum B-01 и Bifidobacterium bifidum 791. Полученные данные свидетельствуют о возможном участии ПМ в патогенезе АЗЩЖ. Известно, что в норме ТПО присутствует на апикальной мембране тироцитов, обращенной в коллоид фолликула
    Exact
    [27]
    Suffix
    , и не попадает в кровь. Аномальная локализация ТПО на базальной мембране тироцитов [26] или поступление этого белка в кровь в результате деструкции ЩЖ, например, при воспалительном процессе тироидной локализации, является одним из пусковых факторов иммунного ответа на ТПО [19], лежащего в основе патогенеза АЗЩЖ.
    (check this in PDF content)

  25. Start
    26521
    Prefix
    Полученные данные свидетельствуют о возможном участии ПМ в патогенезе АЗЩЖ. Известно, что в норме ТПО присутствует на апикальной мембране тироцитов, обращенной в коллоид фолликула [27], и не попадает в кровь. Аномальная локализация ТПО на базальной мембране тироцитов
    Exact
    [26]
    Suffix
    или поступление этого белка в кровь в результате деструкции ЩЖ, например, при воспалительном процессе тироидной локализации, является одним из пусковых факторов иммунного ответа на ТПО [19], лежащего в основе патогенеза АЗЩЖ.
    (check this in PDF content)

  26. Start
    26708
    Prefix
    Аномальная локализация ТПО на базальной мембране тироцитов [26] или поступление этого белка в кровь в результате деструкции ЩЖ, например, при воспалительном процессе тироидной локализации, является одним из пусковых факторов иммунного ответа на ТПО
    Exact
    [19]
    Suffix
    , лежащего в основе патогенеза АЗЩЖ. Не исключено, что компоненты исследуемых нами бактерий, предпочтительно связывающие ААТ к ТПО и имеющие структурное сходство с эпитопами этого гликопротеина, при поступлении в кровь могут провоцировать иммунный ответ на ТПО по механизму молекулярной мимикрии.
    (check this in PDF content)

  27. Start
    27260
    Prefix
    Такой механизм участия в патогенезе АЗЩЖ был доказан для вируса гепатита С, РНК которого обнаружена в ЩЖ и лимфоцитах периферической крови больных указанным заболеванием, а белки имеют 60 % гомологии с другим аутоантигеном ЩЖ – рецептором тиреотропного гормона
    Exact
    [21]
    Suffix
    . Ранее методами структурногомологич ного анализа c использованием программы BLAST (http://www.expasy.org/tools/blast/) нами была обнаружена гомология аминокислотных последовательностей ТГ и ряда белков B. adolescentis, B. longum и B. animalis [12].
    (check this in PDF content)

  28. Start
    27500
    Prefix
    Ранее методами структурногомологич ного анализа c использованием программы BLAST (http://www.expasy.org/tools/blast/) нами была обнаружена гомология аминокислотных последовательностей ТГ и ряда белков B. adolescentis, B. longum и B. animalis
    Exact
    [12]
    Suffix
    . Максимальный интерес вызывает участок NAD-зависимой ДНК-лигазы B. animalis, ТАблИцА 2. КОНцЕНТРАцИОННАЯ ЗАВИСИМОСТЬ СВЯЗЫВАНИЯ ТПО КОМПОНЕНТАМИ ИММОбИлИЗОВАННЫХ КлЕТОК ПМ Штамм МАТ F8, 5 мг/лМАТ А1, 5 мг/л Концентрация ТПО, мг/л 0,52,05,00,52,05,0 B. bifidum 7910,421,11,70,71,31,7 B. longum B379M0,230,71,171,171,41,7 L. plantarum B-010,421,181,550,81,31,7 E. coli М170,341,281,570,621,371,57
    (check this in PDF content)

  29. Start
    29051
    Prefix
    сродством, и исходя из принципа комплиментарности структур антигенных детерминант и эпитопов соответствующих антител, можно предположить, что поступление таких компонентов в кровь человека будет сопровождаться выработкой антител, имеющих общие с ТПО элементы структуры. Такие антитела могут провоцировать аутоиммунный ответ на ТПО, подобно тому как это происходит при поступлении ТПО в кровь
    Exact
    [19]
    Suffix
    или аномальной локализации этого белка на базальной мембране тироцитов [26]. Продолжение исследований возможной роли ПМ в патогенезе АЗЩЖ может состоять в выяснении химической природы компонентов бактерий, связывающих ТПО и ААТ к тироантигенам.
    (check this in PDF content)

  30. Start
    29127
    Prefix
    Такие антитела могут провоцировать аутоиммунный ответ на ТПО, подобно тому как это происходит при поступлении ТПО в кровь [19] или аномальной локализации этого белка на базальной мембране тироцитов
    Exact
    [26]
    Suffix
    . Продолжение исследований возможной роли ПМ в патогенезе АЗЩЖ может состоять в выяснении химической природы компонентов бактерий, связывающих ТПО и ААТ к тироантигенам. Актуальность таких исследований обусловлена высокой частотой встречаемости АЗЩЖ, отсутствием однозначных представлений о механизмах и пусковых факторах этих заболеваний, а также широким использованием населением продуктов пи
    (check this in PDF content)

  31. Start
    29563
    Prefix
    Актуальность таких исследований обусловлена высокой частотой встречаемости АЗЩЖ, отсутствием однозначных представлений о механизмах и пусковых факторах этих заболеваний, а также широким использованием населением продуктов питания, содержащих до 107-108 КОЕ ПМ
    Exact
    [15]
    Suffix
    , и фармакологических препаратов профилактического и лечебного действия на основе клеток ПМ или их компонентов. Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (грант 08-04-90055-Bel_a) и Белорусского фонда фундаментальных исследований (грант Х08Р-072).
    (check this in PDF content)