The 26 reference contexts in paper V. Mineev N., L. Sorokina N., M. Nyoma A., V. Trofimov I., В. Минеев Н., Л. Сорокина Н., М. Нёма А., В. Трофимов И. (2014) “ЭКСПРЕССИЯ ТРАНСКРИПЦИОННОГО ФАКТОРА GATA-3 В ЛИМФОЦИТАХ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ // GATA-3 EXPRESSION IN PERIPHERAL BLOOD LYMPHOCYTES OF PATIENTS WITH BRONCHIAL ASTHMA” / spz:neicon:mimmun:y:2010:i:2:p:21-28

  1. Start
    3337
    Prefix
    Адрес для переписки: Минеев Валерий Николаевич 198516, Санкт-Петербург, г. Петродворец, Санкт-Петербургский пр., 56, кв. 15. Тел.: (812) 450-71-63. E-mail: minvn@spmu.rssi.ru Введение В предыдущих статьях
    Exact
    [2, 3]
    Suffix
    нами рассмотрена роль транскрипционного фактора STAT6 и его активной (фосфорилированной) формы phospho-STAT6, образующейся в результате активации JAK-STAT сигнального пути (Janus Kinases – Signal Transducer and Activator of Transcription) при формировании Th2-иммунного ответа, запускаемого с помощью IL-4 у больных бронхиальной астмой (БА).
    (check this in PDF content)

  2. Start
    3857
    Prefix
    в результате активации JAK-STAT сигнального пути (Janus Kinases – Signal Transducer and Activator of Transcription) при формировании Th2-иммунного ответа, запускаемого с помощью IL-4 у больных бронхиальной астмой (БА). Следует, однако, заметить, что Th2дифференцировка является сложным и многогранным процессом, обеспечиваемым взаимодействием и взаимовлиянием комплекса факторов и механизмов
    Exact
    [4, 6, 19]
    Suffix
    . Данная статья посвящена еще одному не менее важному в Th2-дифференцировке транскрипционному фактору GATA-3 – представителю семейства GATA-связывающих белков, относящегося к классу транскрипционных факторов, содержащих в своем составе по два домена типа «цинковые пальцы» GATA-типа Cys4 (каждый «палец» включает четыре остатка аминокислоты Cys).
    (check this in PDF content)

  3. Start
    4492
    Prefix
    Это семейство насчитывает 6 представителей, которые взаимодействуют с GATA-последовательностью ДНК в ядре. Эта последовательность обнаружена в регуляторных областях ряда генов, играющих важную роль в патогенезе БА (гены Th2-цитокинов, рецепторов, молекул адгезии и др.)
    Exact
    [7, 8]
    Suffix
    . GATA-3 необходим для развития Th2- фенотипа и действует не только посредством активации секреции соответствующих цитокинов в Th2- клетках (IL-4, IL-5 и IL-13) [9], но и через одновременное ингибирование Th1- специфичных транскрипционных факторов (таких как T-bet, NF-AT1, FOXP3 и т. д.) [17, 21, 27].
    (check this in PDF content)

  4. Start
    4658
    Prefix
    Эта последовательность обнаружена в регуляторных областях ряда генов, играющих важную роль в патогенезе БА (гены Th2-цитокинов, рецепторов, молекул адгезии и др.) [7, 8]. GATA-3 необходим для развития Th2- фенотипа и действует не только посредством активации секреции соответствующих цитокинов в Th2- клетках (IL-4, IL-5 и IL-13)
    Exact
    [9]
    Suffix
    , но и через одновременное ингибирование Th1- специфичных транскрипционных факторов (таких как T-bet, NF-AT1, FOXP3 и т. д.) [17, 21, 27]. При гиперреактивности бронхов важную роль играет превалирование GATA-3 в иммунном ответе [22], а активированный STAT6 может нарушать антигенспецифичную иммунную толерантность, что может являться ведущим в патогенезе аллергического воспаления.
    (check this in PDF content)

  5. Start
    4786
    Prefix
    GATA-3 необходим для развития Th2- фенотипа и действует не только посредством активации секреции соответствующих цитокинов в Th2- клетках (IL-4, IL-5 и IL-13) [9], но и через одновременное ингибирование Th1- специфичных транскрипционных факторов (таких как T-bet, NF-AT1, FOXP3 и т. д.)
    Exact
    [17, 21, 27]
    Suffix
    . При гиперреактивности бронхов важную роль играет превалирование GATA-3 в иммунном ответе [22], а активированный STAT6 может нарушать антигенспецифичную иммунную толерантность, что может являться ведущим в патогенезе аллергического воспаления.
    (check this in PDF content)

  6. Start
    4889
    Prefix
    GATA-3 необходим для развития Th2- фенотипа и действует не только посредством активации секреции соответствующих цитокинов в Th2- клетках (IL-4, IL-5 и IL-13) [9], но и через одновременное ингибирование Th1- специфичных транскрипционных факторов (таких как T-bet, NF-AT1, FOXP3 и т. д.) [17, 21, 27]. При гиперреактивности бронхов важную роль играет превалирование GATA-3 в иммунном ответе
    Exact
    [22]
    Suffix
    , а активированный STAT6 может нарушать антигенспецифичную иммунную толерантность, что может являться ведущим в патогенезе аллергического воспаления. Целью данного исследования является изучение экспрессии транскрипционного фактора GATA-3 в лимфоцитах периферической крови больных аллергической и неаллергической БА.
    (check this in PDF content)

  7. Start
    6685
    Prefix
    В качестве модели исследования использовали лимфоциты из периферической крови здоровых лиц и больных БА, выделенные на градиенте плотности с использованием стандартной методики выделения мононуклеаров
    Exact
    [1]
    Suffix
    на градиенте плотности Lymphoseparation Medium (производство «MP Biomedicals»), с последующим удалением моноцитов осаждением на пластике в условиях инкубации в СО2-инкубаторе в течение 40 мин. После окончания инкубации лимфоциты помещали на лед и все дальнейшие процедуры проводили при +4 °С.
    (check this in PDF content)

  8. Start
    7548
    Prefix
    К супернатанту добавляли 1/4 часть буфера для электрофоретических проб и инкубировали в течение 5 мин при +100 °С. Концентрацию белка определяли по методу Bradford (1976), используя овальбумин для построения калибровочной кривой. Методика электрофореза и иммуноблоттинга подробно описана ранее
    Exact
    [2]
    Suffix
    . Хемилюминесцентное излучение регистрировали экспонированием на рентгеновскую пленку CEA RP NEW (CEA AB, Швеция). Антитела. Для специфического выявления транскрипционного фактора GATA-3 использовали поликлональные кроличьи антитела против GATA-3 (Abcam, Великобритания).
    (check this in PDF content)

  9. Start
    9026
    Prefix
    Результаты Уровни экспрессии GATA-3 в лимфоцитах периферической крови больных аллергической БА существенно выше по сравнению с уровнем данного транскрипционного фактора у практически здоровых лиц и больных неаллергической БА (табл. 1, рис. 1, 2)
    Exact
    [5, 25]
    Suffix
    . С целью оценки наличия связи между дозой вводимых системных глюкокортикоидов и уровнем экспрессии GATA-3 был проведен корреляционный анализ между уровнями экспрессии транскрипционного фактора GATA-3 и дозами вводимых парентерально глюкокортикоидов: выявлена положительная корреляционная связь r = 0,38; p = 0,048; n = 27 [7].
    (check this in PDF content)

  10. Start
    9357
    Prefix
    С целью оценки наличия связи между дозой вводимых системных глюкокортикоидов и уровнем экспрессии GATA-3 был проведен корреляционный анализ между уровнями экспрессии транскрипционного фактора GATA-3 и дозами вводимых парентерально глюкокортикоидов: выявлена положительная корреляционная связь r = 0,38; p = 0,048; n = 27
    Exact
    [7]
    Suffix
    . Интересно, что в условиях действия IL-4 становится статистически значимой положительная корреляционная связь между уровнями транскрипционных факторов STAT6 и GATA-3: r = 0,44; p = 0,015; n = 30.
    (check this in PDF content)

  11. Start
    14584
    Prefix
    Как видно из таб лицы 2, исходные значения исследованных транскрипционных факторов уменьшаются к окончанию госпитализации. Обсуждение Несмотря на появление все новых публикаций о ключевой роли транскрипционного фактора GATA-3 в патогенезе аллергической патологии
    Exact
    [7, 8, 16]
    Suffix
    , механизмы его действия остаются пока до конца не ясными. Показано, что он активируется в сигнальном пути при активации р38 МАРК [20], приводя к увеличению экспрессии генов Th2-цитокинов при непосредственном участии транскрипционного фактора STAT6 [6, 14, 28, 29].
    (check this in PDF content)

  12. Start
    14725
    Prefix
    Обсуждение Несмотря на появление все новых публикаций о ключевой роли транскрипционного фактора GATA-3 в патогенезе аллергической патологии [7, 8, 16], механизмы его действия остаются пока до конца не ясными. Показано, что он активируется в сигнальном пути при активации р38 МАРК
    Exact
    [20]
    Suffix
    , приводя к увеличению экспрессии генов Th2-цитокинов при непосредственном участии транскрипционного фактора STAT6 [6, 14, 28, 29]. Как известно, данный транскрипционный фактор исходно локализуется в цитоплазме.
    (check this in PDF content)

  13. Start
    14846
    Prefix
    Несмотря на появление все новых публикаций о ключевой роли транскрипционного фактора GATA-3 в патогенезе аллергической патологии [7, 8, 16], механизмы его действия остаются пока до конца не ясными. Показано, что он активируется в сигнальном пути при активации р38 МАРК [20], приводя к увеличению экспрессии генов Th2-цитокинов при непосредственном участии транскрипционного фактора STAT6
    Exact
    [6, 14, 28, 29]
    Suffix
    . Как известно, данный транскрипционный фактор исходно локализуется в цитоплазме. При активации Т-лимфоцита (через CD3 и CD28 рецепторы) GATA-3 фосфорилируется р38 МАР- киназой и транслоцируется в ядро через канал импортин-α в ядерной мембране.
    (check this in PDF content)

  14. Start
    15130
    Prefix
    Как известно, данный транскрипционный фактор исходно локализуется в цитоплазме. При активации Т-лимфоцита (через CD3 и CD28 рецепторы) GATA-3 фосфорилируется р38 МАР- киназой и транслоцируется в ядро через канал импортин-α в ядерной мембране. В предыдущей статье нами
    Exact
    [3]
    Suffix
    было показано изменение экспрессии транскрипционного фактора STAT6 в лимфоцитах периферической крови больных БА различной степени тяжести, а также влияние IL-4 на активность STAT6. Полученные ранее закономерности нашли отражение при рассмотрении клинического случая в данной статье.
    (check this in PDF content)

  15. Start
    15626
    Prefix
    Больные БА характеризуются повышением экспрессии STAT6 и активности IL-4 сигнализации. Выявленное нами повышение экспрессии транскрипционного фактора GATA-3 при бронхиальной астме согласуется с данными литературы
    Exact
    [5, 9]
    Suffix
    о повышении его экспрессии при атопии и представляется вполне закономерным, поскольку, по данным некоторых авторов [25, 26], STAT6 может увеличивать экспрессию GATA-3. В этой связи представляют интерес выявленные нами положительные корреляционные связи между уровнем экспрессии STAT6 и GATA-3.
    (check this in PDF content)

  16. Start
    15746
    Prefix
    Выявленное нами повышение экспрессии транскрипционного фактора GATA-3 при бронхиальной астме согласуется с данными литературы [5, 9] о повышении его экспрессии при атопии и представляется вполне закономерным, поскольку, по данным некоторых авторов
    Exact
    [25, 26]
    Suffix
    , STAT6 может увеличивать экспрессию GATA-3. В этой связи представляют интерес выявленные нами положительные корреляционные связи между уровнем экспрессии STAT6 и GATA-3. В частности, при исследовании мононуклеров периферической крови больных атопическим дерматитом [5] в отсутствие какой-либо стимуляции определялось существенное повышение уровней экспрессии GATA-3 и SOCS3 (супрессора цитоки
    (check this in PDF content)

  17. Start
    16019
    Prefix
    В этой связи представляют интерес выявленные нами положительные корреляционные связи между уровнем экспрессии STAT6 и GATA-3. В частности, при исследовании мононуклеров периферической крови больных атопическим дерматитом
    Exact
    [5]
    Suffix
    в отсутствие какой-либо стимуляции определялось существенное повышение уровней экспрессии GATA-3 и SOCS3 (супрессора цитокиновой сигнализации) в сравнении с практически здоровыми лицами. Следует отметить, что более выраженная экспрессия GATA-3 наблюдалась в группе больных аллергической БА.
    (check this in PDF content)

  18. Start
    16523
    Prefix
    Выявленный факт согласуется с данными литературы, подтверждающими, что повышенная экспрессия GATA-3 при аллергической бронхиальной астме лежит в основе повышения продукции Th2-цитокинов при этом заболевании
    Exact
    [8, 12, 25]
    Suffix
    . При этом установлено [8], что GATA-3 экспрессируется в Т-лимфоцитах (а именно в Th2-клетках), в то время как отсутствует в моноцитах, в которых, наоборот, экспрессированы два других представителя семейства GATA-белков: GATA-4 и GATA-6.
    (check this in PDF content)

  19. Start
    16557
    Prefix
    Выявленный факт согласуется с данными литературы, подтверждающими, что повышенная экспрессия GATA-3 при аллергической бронхиальной астме лежит в основе повышения продукции Th2-цитокинов при этом заболевании [8, 12, 25]. При этом установлено
    Exact
    [8]
    Suffix
    , что GATA-3 экспрессируется в Т-лимфоцитах (а именно в Th2-клетках), в то время как отсутствует в моноцитах, в которых, наоборот, экспрессированы два других представителя семейства GATA-белков: GATA-4 и GATA-6.
    (check this in PDF content)

  20. Start
    17779
    Prefix
    в условиях активации IL-4исходно в условиях активации IL-4 STAT61,120,560,040,6 pSTAT60,50,690,0090,63 GATA-30,2–0,026– у больных аллергической БА, а также в определении механизмов утяжеления данного заболевания. Так, важное значение, на наш взгляд, имеет выявленная нами положительная корреляционная связь между уровнем экспрессии GATA-3 и дозой вводимых парентерально глюкокортикостероидов
    Exact
    [10, 17]
    Suffix
    , а также существенные отрицательные корреляционные связи между уровнем экспрессии GATA-3 и STAT6 в лимфоцитах периферической крови и ОФВ - 1 исходно (до бронхолитического теста) [3, 17], что может указывать на связь выраженности экспрессии данных транскрипционных факторов со степенью тяжести течения БА.
    (check this in PDF content)

  21. Start
    17962
    Prefix
    Так, важное значение, на наш взгляд, имеет выявленная нами положительная корреляционная связь между уровнем экспрессии GATA-3 и дозой вводимых парентерально глюкокортикостероидов [10, 17], а также существенные отрицательные корреляционные связи между уровнем экспрессии GATA-3 и STAT6 в лимфоцитах периферической крови и ОФВ - 1 исходно (до бронхолитического теста)
    Exact
    [3, 17]
    Suffix
    , что может указывать на связь выраженности экспрессии данных транскрипционных факторов со степенью тяжести течения БА. Рассматривая влияние кортикостероидов в терапии аллергических заболеваний с позиций клеточной и внутриклеточной сигнализации, необходимо отметить, что иногда их влияние на экспрессию транскрипционных факторов является достаточно опосредованным и также может иметь дозозависи
    (check this in PDF content)

  22. Start
    18707
    Prefix
    Как известно, глюкокортикоиды связываются с цитоплазматическим глюкокортикоидным рецептором (GR), в результате чего он активируется и транслоцируется в ядро, где может связываться со специфичными зонами в области промоторов различных противовоспалительных генов, таких как липокортин-1 и секреторный протеазный лейкоцитарный ингибитор (SLPI)
    Exact
    [13, 15]
    Suffix
    . GR преимущественно связываются с транскрипционными факторами, которые регулируют экспрессию различных провоспалительных генов. Так, в частности, было показано [10, 22], что GR не влияет на дефосфорилирование NF- AT2, а, связываясь с NF-AT, подавляет образование комплекса GATA-3/NF-AT2 в ядре в области сайта VA гена IL-4, и вследствие этого их связывание с промотором гена IL-13 и усиление а
    (check this in PDF content)

  23. Start
    18878
    Prefix
    он активируется и транслоцируется в ядро, где может связываться со специфичными зонами в области промоторов различных противовоспалительных генов, таких как липокортин-1 и секреторный протеазный лейкоцитарный ингибитор (SLPI) [13, 15]. GR преимущественно связываются с транскрипционными факторами, которые регулируют экспрессию различных провоспалительных генов. Так, в частности, было показано
    Exact
    [10, 22]
    Suffix
    , что GR не влияет на дефосфорилирование NF- AT2, а, связываясь с NF-AT, подавляет образование комплекса GATA-3/NF-AT2 в ядре в области сайта VA гена IL-4, и вследствие этого их связывание с промотором гена IL-13 и усиление активности промотора гена IL-4, что в конечном итоге может приводить к уменьшению их высвобождения [14].
    (check this in PDF content)

  24. Start
    19209
    Prefix
    Так, в частности, было показано [10, 22], что GR не влияет на дефосфорилирование NF- AT2, а, связываясь с NF-AT, подавляет образование комплекса GATA-3/NF-AT2 в ядре в области сайта VA гена IL-4, и вследствие этого их связывание с промотором гена IL-13 и усиление активности промотора гена IL-4, что в конечном итоге может приводить к уменьшению их высвобождения
    Exact
    [14]
    Suffix
    . Что касается собственно GATA-3, то кортикостероиды, связываясь с GR, ингибируют этот транскрипционный фактор, конкурируя с ним за вход в ядро через импортин-α, а также посредством ингибирования р38 МАР- киназы за счет активации соответствующей фосфатазы-1.
    (check this in PDF content)

  25. Start
    19617
    Prefix
    собственно GATA-3, то кортикостероиды, связываясь с GR, ингибируют этот транскрипционный фактор, конкурируя с ним за вход в ядро через импортин-α, а также посредством ингибирования р38 МАР- киназы за счет активации соответствующей фосфатазы-1. Анализ рассмотренных закономерностей важен и обязателен в разработке новых концепций и стратегий лечения БА и других аллергических заболеваний
    Exact
    [11, 18, 22, 23]
    Suffix
    , базирующихся в настоящее время на молекулярных технологиях с использованием антисмысловых олигонуклеотидов, направленных против Th2-цитокинов и ассоциированных с ними транскрипционных факторов и находящихся пока на стадии доклинических исследований.
    (check this in PDF content)

  26. Start
    20065
    Prefix
    на молекулярных технологиях с использованием антисмысловых олигонуклеотидов, направленных против Th2-цитокинов и ассоциированных с ними транскрипционных факторов и находящихся пока на стадии доклинических исследований. Прямое ингибирование транскрипционных факторов (в частности GATA-3) с помощью ингаляционных специфичных олигонуклеотидов или путем интерференции РНК остается пока невозможным
    Exact
    [7, 24]
    Suffix
    . Кортикостероиды действуют на ряд транскрипционных факторов (NF-AT, STAT6, GATA-3 и др.) как непрямые (косвенные) ингибиторы. В этой связи у пациентов с резистентностью к глюкокортикоидам могут оказаться эффективными разрабатываемые в настоящее время ингибиторы р38 МАРК.
    (check this in PDF content)