The 19 reference contexts in paper E. Kurganova V., E. Shevela Ya., M. Tihonova A., A. Ostanin A., E. Chernykh R., Е. Курганова В., Е. Шевела Я., М. Тихонова А., А. Останин А., Е. Черных Р. (2014) “ГЕНЕРАЦИЯ В КУЛЬТУРЕ IN VITRO И ХАРАКТЕРИСТИКА РЕГУЛЯТОРНЫХ Т-КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА // IN VITRO GENERATION AND CHARACTERIZATION OF HUMAN REGULATORY T-CELLS” / spz:neicon:mimmun:y:2008:i:3:p:173-180

  1. Start
    257
    Prefix
    Медицинская Иммунология 2008, Т. 10, No 2-3, стр. 173-180 © 2008, СПб РО РААКИ Оригинальные статьи Регуляторные Т-клетки (Treg) привлекают все большее внимание в связи с их важной ролью в поддержании периферической толерантности к собственным антигенам
    Exact
    [2, 29]
    Suffix
    . Выделяют два типа Treg – естественные, которые образуются в тимусе, и индуцибельные регуляторные клетки, представленные активированными клетками периферической крови. Естественные регуляторные Т-клетки фенотипически представлены субпопуляцией CD4+CD25+Т-лимфоцитов, не отвечают пролиферацией на митогенные воздействия и подавляют in vitro пролиферативный ответ Т-клеток п
    (check this in PDF content)

  2. Start
    702
    Prefix
    Естественные регуляторные Т-клетки фенотипически представлены субпопуляцией CD4+CD25+Т-лимфоцитов, не отвечают пролиферацией на митогенные воздействия и подавляют in vitro пролиферативный ответ Т-клеток посредством прямого клеточного контакта
    Exact
    [22, 27]
    Suffix
    . Супрессорной реАдрес для переписки: Курганова Екатерина Владимировна 630099, г. Новосибирск, ул. Ядринцевская 14, НИИ клинической иммунологии СО РАМН. Тел.: (383) 228-21-01. Факс: (383) 222-70-28.
    (check this in PDF content)

  3. Start
    3766
    Prefix
    Nevertheless, increased ratio of cells expressing CD4+FOXP3+ among Treg obtained by model 2, may also suggest an ability to generate natural regulatory cells. (Med. Immunol., 2008, vol. 10, n 2-3, pp 173-180) гуляторной активностью обладает только часть CD4+ клеток с высокой экспрессией молекулы CD25 – так называемые CD4+CD25hi
    Exact
    [16]
    Suffix
    . Индуцибельные Treg также представлены CD4+ лимфоцитами, которые могут экспрессировать α-цепь рецептора к IL-2 и характеризуются функциональной ареактивностью. Ингибирующее действие индуцибельных Treg связано с продукцией иммуносупрессорных цитокинов.
    (check this in PDF content)

  4. Start
    4182
    Prefix
    Ингибирующее действие индуцибельных Treg связано с продукцией иммуносупрессорных цитокинов. В зависимости от преобладающего типа продуцируемых цитокинов – IL-10 или TGFβ – эти клетки обозначают соответственно как Tr1 и Tr2/(Th3)
    Exact
    [10, 18]
    Suffix
    . Развитие аутоиммунных и аллергических заболеваний у человека ассоциировано со снижением количества и/или функциональной активности Treg [5, 6, 19, 20, 21, 26, 31]. С другой стороны, введение Treg экспериментальным животным в моделях аутоиммунной патологии приводит к реверсии или предотвращению аутоиммунного процесса, что обосновывает перспективу их использования в лечении ц
    (check this in PDF content)

  5. Start
    4331
    Prefix
    В зависимости от преобладающего типа продуцируемых цитокинов – IL-10 или TGFβ – эти клетки обозначают соответственно как Tr1 и Tr2/(Th3) [10, 18]. Развитие аутоиммунных и аллергических заболеваний у человека ассоциировано со снижением количества и/или функциональной активности Treg
    Exact
    [5, 6, 19, 20, 21, 26, 31]
    Suffix
    . С другой стороны, введение Treg экспериментальным животным в моделях аутоиммунной патологии приводит к реверсии или предотвращению аутоиммунного процесса, что обосновывает перспективу их использования в лечении целого ряда заболеваний [28, 30].
    (check this in PDF content)

  6. Start
    4608
    Prefix
    С другой стороны, введение Treg экспериментальным животным в моделях аутоиммунной патологии приводит к реверсии или предотвращению аутоиммунного процесса, что обосновывает перспективу их использования в лечении целого ряда заболеваний
    Exact
    [28, 30]
    Suffix
    . Поэтому актуальным является разработка воспроизводимых технологий генерации в культуре in vitro регуляторных Т-клеток с заданными функциями. Известно, что интенсивная активация Т-клеток через Т-клеточный рецептор уже сама по себе приводит к генерации Treg [15].
    (check this in PDF content)

  7. Start
    4894
    Prefix
    Поэтому актуальным является разработка воспроизводимых технологий генерации в культуре in vitro регуляторных Т-клеток с заданными функциями. Известно, что интенсивная активация Т-клеток через Т-клеточный рецептор уже сама по себе приводит к генерации Treg
    Exact
    [15]
    Suffix
    . Именно этим объясняется кинетика пролиферации в aнти-СD3-индуцированных культурах с пиком ответа на 3 сутки и снижением пролиферации к 6 дню. Причем после удаления CD25+Тклеток ограничения пролиферации на 6 сутки не наблюдается [1].
    (check this in PDF content)

  8. Start
    5137
    Prefix
    Именно этим объясняется кинетика пролиферации в aнти-СD3-индуцированных культурах с пиком ответа на 3 сутки и снижением пролиферации к 6 дню. Причем после удаления CD25+Тклеток ограничения пролиферации на 6 сутки не наблюдается
    Exact
    [1]
    Suffix
    . Поэтому одним из способов генерации Treg является поликлональная активация Т-лимфоцитов с добавлением IL-2, приводящим к экспансии Treg [17, 22]. Кроме того, Treg могут индуцироваться in vitro в присутствии TGFβ и IL-10 [7, 11, 14], однако внедрение таких подходов в клиническую практику ограничивается отсутствием фармакопейных форм указанных цитокинов.
    (check this in PDF content)

  9. Start
    5296
    Prefix
    Причем после удаления CD25+Тклеток ограничения пролиферации на 6 сутки не наблюдается [1]. Поэтому одним из способов генерации Treg является поликлональная активация Т-лимфоцитов с добавлением IL-2, приводящим к экспансии Treg
    Exact
    [17, 22]
    Suffix
    . Кроме того, Treg могут индуцироваться in vitro в присутствии TGFβ и IL-10 [7, 11, 14], однако внедрение таких подходов в клиническую практику ограничивается отсутствием фармакопейных форм указанных цитокинов.
    (check this in PDF content)

  10. Start
    5384
    Prefix
    Поэтому одним из способов генерации Treg является поликлональная активация Т-лимфоцитов с добавлением IL-2, приводящим к экспансии Treg [17, 22]. Кроме того, Treg могут индуцироваться in vitro в присутствии TGFβ и IL-10
    Exact
    [7, 11, 14]
    Suffix
    , однако внедрение таких подходов в клиническую практику ограничивается отсутствием фармакопейных форм указанных цитокинов. С другой стороны, имеются данные о возможности генерации Treg путем активации лимфоцитов периферической крови в присутствии глюкокортикоидов, разрешенных для медицинского использования [8].
    (check this in PDF content)

  11. Start
    5713
    Prefix
    , Treg могут индуцироваться in vitro в присутствии TGFβ и IL-10 [7, 11, 14], однако внедрение таких подходов в клиническую практику ограничивается отсутствием фармакопейных форм указанных цитокинов. С другой стороны, имеются данные о возможности генерации Treg путем активации лимфоцитов периферической крови в присутствии глюкокортикоидов, разрешенных для медицинского использования
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Настоящее исследование посвящено оценке эффективности генерации и характеристике Treg, полученных при поликлональной активации Т-лимфоцитов с IL-2 в отсутствии и в присутствии дексаметазона и витамина D3.
    (check this in PDF content)

  12. Start
    10437
    Prefix
    Таким образом, если в первой модели генерировались клетки со сниженной пролиферативной реактивностью, то клетки, полученные во второй модели, характеризовались полной функциональной анергией. Известно, что дефект пролиферативного ответа Т-клеток вследствие их анергии может частично коррегироваться экзогенным IL-2
    Exact
    [13]
    Suffix
    . Поэтому в отдельной серии экспериментов было исследовано влияние IL-2 на уровень анти-CD3стимулированной пролиферации полученных клеток. Усиление пролиферативного ответа в присутствии субоптимальных доз IL-2 (50 МЕ/мл) проявлялось в виде тенденции в культурах клеток первой модели (с 3570±860 до 9480±3480 имп/мин) и достоверного увеличения в культурах клеток второй модели (с
    (check this in PDF content)

  13. Start
    19069
    Prefix
    Следовательно, можно полагать, что выявленное увеличение CD4+CD25+ и CD4+CD25high Т-клеток в используемых культуральных условиях, повидимому, отражает не столько появление Treg, сколько процессы активации Т-лимфоцитов. В то же время анализ экспрессии более специфического маркера естественных регуляторных клеток – транскрипционного фактора FOXP3
    Exact
    [25, 33]
    Suffix
    – выявил максимальный (2-кратный) прирост CD4+FOXP3+ клеток именно в культурах МНК, обладающих супрессорной активностью (модель 2). Количество CD4+FOXP3+ клеток в культурах МНК, полученных в модели 1, было достоверно ниже, тогда как в контрольных культурах их содержание не отличалось от исходного уровня среди свежевыделенных МНК.
    (check this in PDF content)

  14. Start
    20958
    Prefix
    Учитывая, что IL-2 обеспечивает экспансию естественных Treg тимического происхождения, одним из методов генерации Treg является активация Т-клеток через Т-клеточный рецептор в присутствии IL-2
    Exact
    [9, 12]
    Suffix
    . Согласно полученным нами данным, стимуляция МНК анти-CD3 антителами с IL-2 сопровождалась индукцией анергии Т-клеток, однако полученные клетки не обладали супрессорной активностью, что может объясняться использованием низких доз IL-2 (50 МЕ/мл) и относительно коротким сроком культивирования (7 сут.
    (check this in PDF content)

  15. Start
    22441
    Prefix
    Генерация IL-10-продуцирующих регуляторных клеток в присутствии витамина D3 и дексаметазона из популяции наивных CD4+ Т-лимфоцитов впервые была описана Barrat с соавт. в 2002 г.
    Exact
    [8]
    Suffix
    . Выбор такой комбинации основывался на известных фактах об ингибирующем действии витамина D3 и дексаметазона на пролиферацию Т-клеток и продукцию ими цитокинов за счет подавления активации ряда транскрипционных факторов [4, 8].
    (check this in PDF content)

  16. Start
    22677
    Prefix
    Выбор такой комбинации основывался на известных фактах об ингибирующем действии витамина D3 и дексаметазона на пролиферацию Т-клеток и продукцию ими цитокинов за счет подавления активации ряда транскрипционных факторов
    Exact
    [4, 8]
    Suffix
    . С другой стороны, известно, что генерация IL-10продуцирующих Treg может индуцироваться незрелыми миелоидными дендритными клетками, а витамин D3 и дексаметазон подавляют созревание дендритных клеток [14, 23, 24].
    (check this in PDF content)

  17. Start
    22898
    Prefix
    С другой стороны, известно, что генерация IL-10продуцирующих Treg может индуцироваться незрелыми миелоидными дендритными клетками, а витамин D3 и дексаметазон подавляют созревание дендритных клеток
    Exact
    [14, 23, 24]
    Suffix
    . Таким образом, еще одним механизмом действия этих иммуносупрессорных агентов может быть их непрямое влияние на Т-клетки, опосредованное через антигенпрезентирующие клетки [32]. Поскольку в проведенных нами исследованиях использовались не наивные CD4+ Т-клетки, а популяции несепарированных МНК, данный механизм индукции Tr1 представляется вполне возможным.
    (check this in PDF content)

  18. Start
    23087
    Prefix
    другой стороны, известно, что генерация IL-10продуцирующих Treg может индуцироваться незрелыми миелоидными дендритными клетками, а витамин D3 и дексаметазон подавляют созревание дендритных клеток [14, 23, 24]. Таким образом, еще одним механизмом действия этих иммуносупрессорных агентов может быть их непрямое влияние на Т-клетки, опосредованное через антигенпрезентирующие клетки
    Exact
    [32]
    Suffix
    . Поскольку в проведенных нами исследованиях использовались не наивные CD4+ Т-клетки, а популяции несепарированных МНК, данный механизм индукции Tr1 представляется вполне возможным. Кроме того, применение в качестве источника генерации Treg мононуклеарных клеток не исключает присутствия среди них и последующей экспансии естественных Treg тимического происхождения.
    (check this in PDF content)

  19. Start
    23966
    Prefix
    Данный факт, тем не менее, не является прямым доказательством генерации естественных Treg, поскольку в последние годы появились данные об экспрессии FOXP3 не только естественными, но и индуцированными регуляторными клетками периферической крови
    Exact
    [3]
    Suffix
    . В заключение следует отметить еще один факт. Несмотря на увеличение относительного количества CD4+FOXP3+ клеток в процессе генерации Treg в присутствии витамина D3 и дексаметазона, содержание CD4+CD25hi клеток, с которыми обычно связывают популяцию естественных регуляторных клеток, значимо не увеличивалось по сравнению с контрольными культурами.
    (check this in PDF content)